严秀蕊
- 作品数：13 被引量：31H指数：4
- 供职机构：宁夏医科大学总医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金宁夏回族自治区自然科学基金中国科学院西部之光基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 一种低免疫原性组织工程皮肤构建方法
- 本发明公开了一种低免疫原性组织工程皮肤构建方法，属于生物工程技术领域，该方法方法采用人表皮干细胞和胎儿来源的胎盘间充质干细胞作为种子细胞，以牛I型胶原构建的3D基质作为支架，利用气液界面分离培养法复合构建为一种有活性的低...
- 陈冬梅杨银学魏军刘晓明刘淑丹梁雪云杨婷婷张耀林马晓娜马海滨严秀蕊刘婷
- 文献传递
- microRNA-592对人结直肠癌细胞增殖迁移的影响被引量：2
- 2015年
- 目的探讨microRNA-592(miR-592)在结直肠癌细胞系中的表达并观察对结直肠癌细胞系增殖、迁移的影响。方法 Real-time PCR检测miR-592在四种结直肠癌细胞系与正常结直肠细胞系的表达差异;构建miR-592的抑制表达载体并包装慢病毒,转染Lovo细胞,筛选出稳定表达的细胞株并Real-time PCR检测Ki67、Cyclin D1、P27的mRNA的表达;MTT、平板克隆和划痕实验分别检测miR-592对Lovo细胞增殖和迁移的影响。结果 miR-592在四种结直肠癌细胞系(HCT116、Lovo、LS174T、SW480)中的表达与正常结直肠细胞系CCD-18Co相比均明显增高(P均<0.01)。稳定转染后,Ki67、Cyclin D1的mRNA在Lovo细胞中的表达水平明显降低,P27mRNA的水平明显升高;Lovo细胞生长减慢,克隆形成减少,细胞迁移能力降低(P均<0.05或<0.01)。结论 miR-592在结直肠癌细胞中呈高表达,抑制miR-592表达可降低Lovo细胞的增殖和迁移能力。
- 王健杨宝付琦严秀蕊周洁李海杨萍杨银学
- 关键词：结直肠肿瘤细胞增殖细胞迁移
- 人胎盘胎儿侧间充质干细胞无血清培养上清对肺脏上皮细胞氧化应激的保护作用被引量：6
- 2017年
- 背景:前期研究证实人胎盘胎儿侧间充质干细胞培养上清具有一定的清除活性氧自由基的能力,且本身具有一定的抗氧化酶活性。目的:探究人胎盘胎儿侧间充质干细胞在无血清培养条件下所得上清对氧化应激损伤的肺脏上皮细胞的保护作用及其作用机制。方法:分别使用不同浓度的过氧化氢(200,400,500,600,800μmol/L)对肺脏上皮细胞A549细胞系进行6,12,24 h的氧化刺激,通过CCK-8法对肺脏上皮细胞存活率进行检测,得出存活率为50%时的过氧化氢浓度作为氧化损伤模型的最适条件。用Hochest33258染色及Western Blot对模型有效性进行验证。采用无血清培养基培养胎盘胎儿侧间充质干细胞,收集P3代细胞培养上清将其作用于氧化损伤的肺脏上皮细胞,培养24 h,即上清组。同时设立损伤组(仅进行氧化损伤)和维生素C组(培养基中添加100μmol/L的维生素C)。利用流式细胞术对各组细胞凋亡情况进行检测以及Western Blot检测凋亡相关蛋白及氧化应激经典信号通路Nrf2-Keap1-ARE信号通路相关蛋白的表达。结果与结论:(1)CCK-8法检测得出,采用600μmol/L的过氧化氢对肺脏上皮细胞进行24 h的氧化刺激,A549细胞存活率为(56.41±3.31)%。Hochest33258染色及Western Blot证实模型的可靠性;(2)流式细胞术结果显示维生素C组和上清组氧化损伤细胞的凋亡率与损伤组细胞相比有不同程度的降低,其中上清组与损伤组相比差异有统计学意义(P<0.05);(3)Western Blot对凋亡相关蛋白的检测显示,与损伤组对比,维生素C组和上清组凋亡促进基因Bax蛋白表达减弱,凋亡抑制基因Bcl-2蛋白表达增强,且差异有统计学意义(P<0.05)。Nrf2-Keap1-ARE信号通路相关蛋白显示与损伤组对比,维生素C组和上清组Nrf2蛋白表达增强,Keap1分子表达减弱且差异有统计学意义(P<0.05);(4)上述结果提示,实验成功构建了肺脏上皮细胞损伤模型,且人胎盘胎儿侧间充�
- 付雪刘国攀张玉洁严秀蕊马晓娜刘晓明魏军
- 关键词：干细胞间充质干细胞氧化应激WESTERNBLOT法
- 人结直肠癌组织miR-363表达对细胞增殖与迁移活性影响的观察被引量：5
- 2014年
- 目的:研究microRNA-363(miR-363)在结直肠癌组织中的表达对细胞增殖和迁移活性的影响,并探讨其临床意义。方法:收集2011-02-01-2011-12-31宁夏医科大学总医院经手术切除的结直肠癌标本22例及对应癌旁正常组织(距肿瘤边缘>5cm)。采用microRNA芯片技术筛选出在结直肠癌中低表达的miR-363;荧光定量PCR检测在3株恶性程度不同的结直肠癌细胞系LoVo、LS174T和SW480以及22例新鲜结直肠癌组织中miR-363的表达差异;构建miR-363慢病毒表达载体转染LoVo细胞,筛选出稳定表达miR-363及空载体的细胞株LoVo-363和LoVo-NC,荧光定量PCR检测转染后两细胞株中miR-363的表达;MTT法检测两细胞株的增殖情况;划痕实验检测两细胞株的迁移能力。结果:与正常结直肠细胞系CCD-18Co相比,miR-363在结直肠肿瘤细胞系LoVo、LS174T及SW480中表达均显著下调,在LoVo中表达水平为0.047±0.026,P<0.001;在LS174T中表达水平为0.42±0.045,P=0.013;在SW480中表达水平为0.058±0.017,P<0.001。miR-363的表达在不同性别(P=0.926)、不同年龄(P=0.785)间比较,差异均无统计学意义;而在不同病理分化程度(P=0.016)、TNM分期(P=0.018)及有无淋巴结转移(P=0.045)间比较,差异均有统计学意义。与LoVo-NC的1.00±0.131相比,LoVo-363中miR-363的表达5.32±0.329显著增高,P=0.001。MTT结果表明,第3天开始LoVo-363增殖能力显著低于LoVo-NC,第8天时差异达到最大,miR-363组为0.69±0.052,LoVo-363组为2.07±0.088,P=0.003。划痕实验表明,LoVo-363组细胞迁移能力为(35.26±12.09)%,显著低于LoVo-NC组的(51.89±10.11)%,P=0.023。结论:miR-363在结直肠癌中低表达,其能够抑制肿瘤细胞的增殖和迁移,可能与结直肠癌的发生、发展及转移密切相关。
- 严秀蕊王立斌陈冬梅李玉奎杨银学
- 关键词：结直肠肿瘤微RNAS基因芯片细胞增殖
- microRNA-451a在人结直肠癌中的表达及其对结直肠癌细胞增殖的影响被引量：4
- 2018年
- 目的研究microRNA-451a(miR-451a)在结直肠癌中的表达并观察其对结直肠癌细胞增殖的影响。方法荧光定量PCR检测miR-451a在24例新鲜的结直肠癌组织样本及4株结直肠癌细胞系HCT116、LoVo、LS174T及SW480中的表达;将miR-451a及NC病毒转染HCT116细胞,荧光定量PCR检测转染后HCT116细胞中miR-451a的表达及细胞增殖、细胞周期相关基因的表达情况;CCK-8及平板克隆形成实验检测HCT116-451a和HCT116-NC细胞的生长增殖情况。结果与正常结直肠组织比较,miR-451a在结直肠癌组织中表达下调,与正常结直肠细胞系CCD-18Co相比,miR-451a在4株结直肠癌细胞系HCT116、LoVo、LS174T及SW480中表达均下调(P均<0.05)。CCK-8结果显示转染miR-451a的HCT116细胞增殖能力低于NC组,平板克隆形成实验显示与HCT116-NC比较,HCT116-451a组克隆数减少(P<0.05)。与HCT116-NC比较,HCT116-451a组增殖细胞核抗原Ki-67及细胞周期蛋白D1(Cyclin D1)表达降低,细胞周期素依赖性激酶抑制因子(p21)表达增高(P<0.05)。结论 miR-451a在结直肠癌中低表达,上调miR-451a的表达可抑制结直肠癌细胞HCT116的生长增殖。
- 严秀蕊马海滨贾元元梁雪云
- 关键词：结直肠癌细胞增殖
- 人表皮干细胞在两种培养体系中的生长增殖及鉴定被引量：4
- 2013年
- 目的比较人表皮干细胞在两种体外培养体系下细胞的生长增殖情况。方法运用中性蛋白水解酶和胰蛋白酶两步法分离表皮层和真皮层,将得到的表皮细胞悬液差速黏附法分离角质形成细胞,在无血清角质细胞培养基中培养并免疫荧光法鉴定P63和K19的表达。鉴定后的细胞分别在无血清及有血清有饲养层条件下培养,MTT法检测两种条件下细胞的增殖情况,荧光定量PCR鉴定两种培养条件下不同代次细胞P63和K19的表达。结果在有血清有饲养层培养条件下表皮干细胞增殖较快。与无血清培养条件相比较,有血清培养条件下P3代及P5代K19 mRNA的表达水平显著提高,P5代P63 mRNA的表达水平显著提高(P<0.05)。结论表皮干细胞在有血清、有饲养层的培养条件下生长增殖较快且能更好地保持表皮干细胞的特性。
- 严秀蕊王琼
- 关键词：表皮干细胞
- 人胎盘胎儿侧间充质干细胞无血清培养上清的抗氧化活性分析被引量：6
- 2017年
- 背景:目前关于间充质干细胞的研究大多集中于其免疫调节功能,而关于细胞和培养上清的其抗氧化能力的研究较为少见。目的:观察人胎盘胎儿侧间充质干细胞在无血清培养条件下,其上清的抗氧化能力。方法:采用无血清培养基培养胎儿侧胎盘间充质干细胞,分别于48 h收集P2-P6代细胞培养上清。在空白培养基中添加维生素C 100μmol/L作为阳性对照。检测P2-P6代人胎盘胎儿侧间充质干细胞培养上清的总抗氧化能力、清除活性氧自由基的能力和抗氧化酶活性。结果与结论:(1)抗氧化能力:各代次人胎盘胎儿侧间充质干细胞培养上清具有一定的抗氧化能力,且不同代次间的上清具有一定的差异,其中总抗氧化能力与40-80μmol/L的维生素C相当,各代次上清均具有一定的清除二苯基苦基苯肼自由基、羟自由基、超氧阴离子自由基等自由基清除能力;(2)抗氧化酶活性分析:各代次间的人胎盘胎儿侧间充质干细胞培养上清中均可以检测到一定水平的超氧化物歧化酶和谷胱甘肽过氧化物酶活性;(3)结果提示,在无血清条件下培养胎儿侧胎盘间充质干细胞的上清具有一定的抗氧化能力和抗氧化酶的活性。人胎盘胎儿侧间充质干细胞的抗氧化能力与其旁分泌机制有关,但其中的抗氧化成分及分子机制有待进一步的研究。
- 付雪张玉洁严秀蕊马晓娜刘晓明魏军
- 关键词：干细胞胎盘间充质干细胞无血清培养培养上清抗氧化
- 一种检测人胎盘胎儿侧间充质干细胞抗氧化能力的方法
- 本发明属于间充质干细胞技术领域，具体涉及一种检测人胎盘胎儿侧间充质干细胞抗氧化能力的方法，其是从胎盘中提取人胎盘胎儿侧间充质干细胞得原代人胎盘胎儿侧间充质干细胞；将原代人胎盘胎儿侧间充质干细胞进行培养得第一代间充质干细胞...
- 魏军严秀蕊刘晓明付雪张玉洁
- 文献传递
- miR-1在人结直肠癌中的表达及其对结直肠癌细胞增殖及迁移的影响被引量：1
- 2015年
- 目的研究microRNA-1(miR-1)在结直肠癌中的表达并观察其对结直肠癌细胞增殖及迁移活性的影响。方法荧光定量PCR检测4株恶性程度不同的结直肠癌细胞系HCT116、Lo Vo、LS174T、SW480以及22例新鲜的结直肠癌组织中miR-1的表达差异;构建miR-1慢病毒表达载体转染HCT116细胞,筛选出稳定表达miR-1及空载体的细胞株HCT116-1和HCT116-NC,荧光定量PCR检测转染后两细胞株中miR-1的表达;MTT法及平板克隆形成实验检测细胞的增殖情况;划痕实验检测细胞的迁移能力。结果与正常结直肠细胞系CCD-18Co相比,miR-1在结直肠癌细胞系HCT116、Lo Vo、LS174T及SW480中表达均显著下调(P<0.05)。与正常结直肠组织相比,miR-1在结直肠癌组织中表达均显著下调(P<0.05)。与HCT116-NC相比,HCT116-1中miR-1的表达显著增高(P<0.05)。MTT结果表明,增殖第2~6天HCT116-1 MTT值低于HCT116-NC(P<0.05)。平板克隆形成实验表明,与HCT116-NC相比,HCT116-1细胞形成的克隆数减少且克隆本身较HCT116-NC小(P<0.05)。划痕实验表明HCT116-1组细胞迁移能力低于HCT116-NC组(P<0.05)。结论 miR-1在结直肠癌中低表达,上调miR-1的表达可有效抑制肿瘤细胞的增殖和迁移,推测miR-1可能与结直肠癌的发生、发展以及转移密切相关。
- 严秀蕊李玉奎梁雪云杨银学
- 关键词：MIR-1结直肠癌细胞增殖迁移
- 人胎盘间充质干细胞来源外泌体保护氧化应激损伤肺上皮细胞的机制被引量：2
- 2021年
- 背景:前期研究已证实人胎盘间充质干细胞来源培养上清能够通过抑制细胞凋亡保护氧化损伤的肺上皮细胞。目的:探究人胎盘间充质干细胞来源外泌体对氧化应激损伤肺上皮细胞BEAS-2B的保护作用。方法:体外培养BEAS-2B细胞,采用含100,200,300,400,500μmol/L过氧化氢的DME/F-12完全培养基培养细胞4 h,以及用含300μmol/L过氧化氢的DME/F-12完全培养基分别培养细胞2,4,6 h,CCK-8法测定细胞存活率,以确定过氧化氢氧化损伤模型条件。Hoechst33258染色观察细胞凋亡情况,q-PCR及Western blot检测bax、bcl-2基因和蛋白的表达以确定模型的有效性。收集第3代人胎盘间充质干细胞培养上清,按照外泌体提取试剂盒说明进行外泌体提取,将外泌体作用于氧化损伤的BEAS-2B细胞,q-PCR及Western blot检测bax、bcl-2、nrf2及keap1的表达。结果与结论:①采用300μmol/L过氧化氢作用于BEAS-2B细胞4 h,细胞存活率为(51.96±2.17)%,可作为氧化损伤模型的最适条件,且Hoechst33258染色、q-PCR及Western blot证明模型有效;②与损伤组比较,外泌体组bax表达降低而bcl-2表达升高,nrf2表达升高而keap1表达降低,差异有显著性意义(P<0.05);③结果提示,人胎盘间充质干细胞来源外泌体能够抑制氧化损伤BEAS-2B细胞凋亡,其作用机制可能与激活Nrf2-Keap1-ARE信号通路相关。
- 严秀蕊陶金梁雪云
- 关键词：干细胞人胎盘间充质干细胞肺上皮细胞BEAS-2B外泌体
