于丹丹
- 作品数:6 被引量:16H指数:2
- 供职机构:贵州大学更多>>
- 发文基金:贵州省科技厅农业攻关项目贵州省优秀科技教育人才省长资金项目贵州省教育厅自然科学研究项目更多>>
- 相关领域:农业科学医药卫生更多>>
- 烟草HrBP的研究与应用被引量:1
- 2012年
- 旨在进一步发掘HrBP在新农药创制和抗病品种选育等方面的价值,采用BLAST和Clustal X2软件对HrBP进行序列同源性分析,发现其序列较保守;采用PSIPRED Protein Structure Prediction在线服务器进行烟草HrBP二级结构预测,采用UCLDepartment of Computer Science进行HrBP跨膜结构预测,发现两种可能存在的跨膜方式;采用SWISS-MODEL、Phyre和CPH进行HrBP空间结构预测,发现以膜蛋白为模板进行模建的蛋白具有相似的空间结构;建立基于Real-time PCR的HrBP mRNA定量分析方法,其相关系数为0.999 6;通过ProtScale方法分析HrBP抗原指数,并获得序列特异性较高的多肽,采用9-氟甲氧羰基固相合成法制备多肽,并由此制备多克隆抗体,采用Indirect-ELISA和Western blotting测定其效价和特异性,表明多克隆抗体可特异识别烟草HrBP。采用DIBA和Western blotting试验研究多克隆抗体对常见植物的抗原识别特性,发现多克隆抗体对这些植物的HrBP均有一定识别能力。此外,采用Real-time PCR和Indirect-ELISA等方法进行烟草各组织部位HrBP的表达量的研究,发现HrBP在各组织部位存在差异表达。
- 陈卓于丹丹郭勤刘家驹王贞超李向阳毕亮胡德禹杨松宋宝安
- 关键词:生物信息学分析基因克隆表达多克隆抗体制备
- EDS1多肽抗体的制备和应用被引量:1
- 2011年
- EDS1蛋白是植物寄主SA信号转导通路中具有重要调控功能的蛋白,为获得效价高和选择性强的EDS1抗体,根据NCBI GenBank中报道的EDS1蛋白一级结构信息,采用Blastn、Blastx和ExPASy等生物信息学软件进行序列同源性分析,获得三段序列特异性较高的多肽,并从中优选一段序列特异性多肽,采用9-氟甲氧羰基固相合成法获得序列特异性最好的多肽,采用HPLC和GC-MS测定合成多肽的浓度和分子量,试验表明目的多肽纯度达89.37%,目的多肽分子量为1978.33。采用碳化二亚胺法将多肽与KLH进行偶联获得免疫原——Pep-KLH,并将其免疫新西兰大白兔以获得抗血清和多克隆抗体,采用间接-ELISA和Western blotting测定其效价和特异性,经间接-ELISA检测表明抗血清和多克隆抗体可与Pep发生特异性免疫反应,经Western blotting试验表明抗血清和多克隆抗体可识别烟草叶片特异性条带,其相对分子量为70kD,与预测分子量相符,表明利用该方法制备的EDS1多肽抗体具有较高特异性和灵敏度。
- 陈卓刘开兴于丹丹刘家驹王贞超李向阳毕亮胡德禹杨松宋宝安
- 关键词:多肽合成多克隆抗体
- NPR1多肽抗体的制备和应用被引量:6
- 2012年
- 根据NCBI GenBank中报道的NPR1一级结构信息,采用Blastn、Blastx、ExPASy和Protean等软件进行序列同源性和抗原性指数分析,获得三段序列特异性较高的多肽,并从中优选一段序列特异性多肽,采用9-氟甲氧羰基固相合成法获得序列特异性最好的多肽,采用HPLC和LC-MS测定合成多肽的浓度和分子量,试验表明目的多肽纯度达88%、目的多肽分子量为1.92234 kD。采用碳化二亚胺法将多肽与KLH进行偶联获得免疫原Pep-KLH,并将其免疫新西兰大白兔以获得抗血清和多克隆抗体,采用ELISA和Western blotting测定其效价和特异性,经ELISA检测表明抗血清和多克隆抗体可与Pep发生特异性免疫反应,经Western blotting试验表明抗血清和多克隆抗体可识别烟草叶片特异性条带,其相对分子量为65 kD,与预测分子量相符,表明利用该方法制备的NPR1多肽抗体具有较高特异性和灵敏度。
- 陈卓刘家驹毕亮李向阳胡德禹于丹丹王贞超杨松宋宝安
- 关键词:多肽多克隆抗体
- 吡蚜酮等5种拌种剂防治贵州白背飞虱和南方水稻黑条矮缩病的技术初探被引量:9
- 2012年
- 本文采用25%吡蚜酮悬浮剂(SC)、60%吡虫啉悬浮种衣剂(FSC)、35%丁硫克百威种子处理干粉剂(DS)、70%噻虫嗪种子处理水分散剂(WG)和10%吡虫啉可湿性拌种剂(WP)进行药剂拌种以确定其防效。结果表明,移栽后7d上述药剂对白背飞虱的防效分别为92.13%、84.29%、80.62%、79.54%和69.54%;水稻腊熟期上述药剂对南方水稻黑条矮缩病的防效分别为96.15%、92.30%、89.77%、75.64%和70.51%。
- 何忠雪陆金鹏刘家驹潘化仁陈丽莉龙玉宁王贞超于丹丹谈孝凤
- 关键词:拌种剂吡蚜酮白背飞虱南方水稻黑条矮缩病防效
- 几种水稻病毒非结构蛋白研究进展
- 2013年
- 对水稻病毒编码的病毒基质、管状蛋白、逆转录酶、基因沉默抑制子、核酸结合活性蛋白、转录调节功能蛋白6种非结构蛋白及其功能进行了介绍,为发现水稻病毒的潜在药物靶标以及研究病毒与寄主互作关系提供了参考。
- 于丹丹
- 关键词:非结构蛋白
- 基于结构生物学和病毒生态学的抗植物病毒剂研究
- 李向阳宋宝安杨财广席真王贞超于丹丹杨松
- 关键词:共晶分辨率