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G蛋白偶联受体激酶结合蛋白1的SHD结构域对成骨细胞内局部黏附激酶活性的影响: 2011年; 目的探讨G蛋白偶联受体激酶结合蛋白1（GIT1）的SHD结构域对成骨细胞内局部黏附激酶（FAK）活性的影响，并分析其机制。方法取1～2dSD大鼠颅盖骨进行成骨细胞原代培养，传至第3代。体外构建野生型GIT1和删除了SHD结构域的GIT1的质粒并组成慢病毒。血小板衍生生长因子（PDGF）刺激成骨细胞后，采用免疫共沉淀法检测GIT1、删除了SHD结构域的GIT1与FAK的相互关系，采用免疫荧光法检测GIT1和FAK在成骨细胞内的位置、删除了SHD结构域的GIT1对成骨细胞内FAK位置和活性的影响。结果PDGF刺激成骨细胞后，GIT1与FAK的相互结合明显增加，且随着时间的增加，结合量逐渐增加（F=293．105，P=0．000）。免疫荧光染色结果表明：PDGF刺激后，成骨细胞局部黏附内活性形式的FAK（FAK酪氨酸397磷酸化）明显增加。PDGF刺激成骨细胞后，删除了SHD结构域的GIT1与FAK的结合明显被抑制，且随着时间的增加，二者的相互关系无明显变化（F=0．322，P=0．737）；删除了SHD结构域的GITI抑制成骨细胞局部黏附内FAK酪氨酸397的磷酸化，同时降低FAK在局部黏附内的表达。结论删除了SHD结构域的GIT1通过降低与FAK的相互结合，从而抑制成骨细胞局部黏附内FAK酪氨酸397的磷酸化，影响成骨细胞的功能。; 于留钱张宁胡志毅殷国勇; 关键词：载体蛋白质类

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于留钱

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