何火聪
- 作品数：53 被引量：95H指数：6
- 供职机构：福建医科大学更多>>
- 发文基金：福建省自然科学基金国家自然科学基金福建省科技计划重点项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学核科学技术农业科学更多>>
- 蕲蛇蛇毒中一种新型自降解抗凝血酶AA-ACA-I的纯化和表征(英文)被引量：1
- 2009年
- 利用嗜硫色谱和POROSHQ20离子交换色谱从蕲蛇蛇毒中纯化得到一种新型P-Ⅲ型蛇毒金属蛋白酶(snake venom metalloproteases SVMP)AA-ACA-I.该酶经SDS-PAGE测得分子量为47.6kD,含有链内二硫键,加DTT处理后,分子量为50.8kD,中性糖含量为3.5%,具有出血毒性和抗凝血活性.在70℃和pH9.0条件下保温60min,该酶会自降解成分子量30kD左右的新蛋白,降解得到的新蛋白抗凝血活性高于原蛋白.
- 潘剑茹何火聪周康靖汪少芸王中来饶平凡
- 关键词：抗凝血酶纯化
- 带前导肽的人锰超氧化物歧化酶抗顺铂诱导的肾损伤效应
- 2023年
- 目的 探讨前导肽的融合对人锰超氧化物歧化酶(SOD2)结构以及抗顺铂(DDP)诱导的肾损伤效应。方法 通过结构预测和SOD比活力测定分析线粒体靶向序列(MTS)对SOD2构效的影响;建立昆明(KM)小鼠DDP损伤模型,以阿米福汀(AMFT)为阳性对照,测定小鼠肾功能、肾脏指数、肾脏抗氧化能力,同时观察肾脏表观及病理变化,以评估MTS-SOD2抗DDP诱导的肾损伤效应。结果 MTS前导肽对SOD2的二三级结构有一定影响,但也使MTS-SOD2蛋白的比活力提高。预给予中剂量MTS-SOD2(0.84 mg/kg)可以使损伤鼠肾脏丙二醛(MDA)水平显著降低,SOD活力和总抗氧化能力(T-AOC)显著增加,进而减少肾脏病理损伤,维持肾功能,整体效果与200 mg/kg AMFT相当甚至优于后者。结论 MTS前导肽既增强了SOD2的活性,又使其因具有跨膜功能而发挥优异的抗DDP诱导的肾损伤效应。
- 潘剑茹韩亚南何夏琪叶小强何火聪
- 关键词：锰超氧化物歧化酶前导肽顺铂肾损伤
- TAT-ASPP2融合蛋白的制备及其对胶质瘤细胞增殖的抑制作用
- 2011年
- 目的:制备TAT-ASPP2融合蛋白,探讨其对人胶质瘤U-87MG细胞和U251细胞增殖的抑制作用。方法:设计TAT-ASPP2引物,应用IN-Fusion技术构建原核表达质粒pET-TAT-ASPP2,双酶切、DNA测序鉴定后转化大肠杆菌E.coliBL21,IPTG诱导TAT-ASPP2融合蛋白的表达,SDS-PAGE和Western blotting鉴定TAT-ASPP2融合蛋白。MTT法检测TAT-AS-PP2融合蛋白对U-87MG和U251细胞增殖的作用。结果:成功构建了原核表达质粒pET-TAT-ASPP2,转化E.coli BL21后成功表达TAT-ASPP2融合蛋白,其相对分子质量约为128000,并可被ASPP2特异性抗体所识别。TAT-ASPP2融合蛋白对U-87MG和U251细胞增殖的抑制率分别为(65.0±3.0)%和(64.7±2.5)%,而ASPP2蛋白则不能抑制U-87MG和U251细胞的增殖。结论:成功地克隆、表达及纯化TAT-ASPP2融合蛋白,该融合蛋白可抑制胶质瘤细胞的增殖。
- 何火聪苏颖潘剑茹黄争荣
- 关键词：胶质瘤融合蛋白增殖
- Wnt/β-catenin通路与人鼻咽癌细胞放射敏感性的关系
- 目的:探讨Wnt/β-catenin通路与人鼻咽癌细胞放射敏感性的关系。方法:以放射敏感性不同的鼻咽癌细胞株为实验模型:鼻咽癌CNE细胞株和经放射诱导的CNE细胞放射抗拒株。收集上述对数生长期细胞,以Trizol法提取其...
- 苏颖何火聪邹长棪林可焴陈超
- 关键词：人鼻咽癌细胞WNTCATENIN
- shRNA沉默AnnxinA2基因对放射抗拒鼻咽癌细胞迁移和侵袭的影响
- 2017年
- 目的探讨sh RNA沉默Annxin A2基因对放射抗拒鼻咽癌细胞迁移和侵袭的影响。方法采用Fu GENE HD将Annexin A2 sh RNA转染放射抗拒的鼻咽癌CNE2(R743)细胞,q RT-PCR验证转染细胞中Annxin A2基因的表达,细胞划痕实验和Transwell实验观察下调Annxin A2基因表达及联合照射对鼻咽癌细胞迁移和侵袭的影响,Western blot检测细胞中基质金属蛋白酶2(MMP2)蛋白的表达。结果转染组细胞Annexin A2基因的m RNA相对表达量为(0.25±0.17),较对照组的(1±0.00)和转染对照组的(0.96±0.06)明显下降,差异有统计学意义(P<0.05)。细胞划痕实验显示,下调Annxin A2基因表达可抑制照射诱导的CNE2(R743)细胞的迁移能力(P<0.05)。Transwell实验结果显示,下调Annxin A2基因表达可抑制照射诱导的CNE2(R743)细胞的迁移和侵袭能力(P<0.05)。Western blot结果表明,下调Annxin A2基因表达能抑制照射诱导的MMP2蛋白的表达上调(P<0.05)。结论下调Annxin A2基因表达能抑制照射诱导放射抗拒的鼻咽癌CNE2(R743)细胞的迁移和侵袭能力,可能与MMP2蛋白表达下调相关。
- 何火聪苏颖林可焴邹长棪陈超
- 关键词：鼻咽肿瘤放射抗拒
- 全长SOD2重组蛋白的可溶表达、纯化、稳定性与跨膜效应被引量：1
- 2017年
- 超氧化物歧化酶(SOD)家族是保护细胞免受正常代谢过程中产生的活性氧(ROS)毒性所必需的,含Mn2+离子的超氧化物歧化酶(Mn-SOD,SOD2)是其中最重要的一种。本研究合成了人源SOD2全基因序列,并将其插入带有GST的原核表达载体p GEX-4T-1中,成功构建了GST-SOD2融合蛋白表达质粒。然后,将重组质粒p GEX-4T-1-SOD2转化大肠杆菌BL21(DE3),用IPTG在25℃下诱导表达融合蛋白,得到可溶性GST-SOD2融合蛋白,经GST亲和树脂纯化得到比活为1 788 U/mg的纯蛋白,分子量约为46 k Da。利用凝血酶切去GST标签后经肝素亲和柱纯化得到了电泳纯的SOD2重组蛋白,该蛋白分子量约为25 k Da,与SOD2全长序列的理论分子量相符,比活为2 000 U/mg。两种重组SOD2蛋白在生理条件下都具有良好的SOD活性,且都具有显著的跨膜能力(P<0.05)。这些工作为深入研究两种全长重组SOD2蛋白的结构与生物效应建立了基础。
- 潘剑茹陈莉娟何火聪苏颖王香玲李娴陈翠煌吴伦巧刘树滔
- 关键词：表达纯化稳定性
- 超氧化物歧化酶与阿米福汀对小鼠急性放射损伤预防作用的比较被引量：2
- 2012年
- 本研究建立了小鼠全身放疗的损伤模型,以比较预给药超氧化物歧化酶(SOD)和阿米福汀对小鼠放射治疗损伤的防护效果。C57BL/6小鼠用6 Gy X射线进行全身一次性照射,在放射后24 h处死,测定小鼠外周血红、白细胞数量,胸腺指数和脾脏指数,以及肝脏抗氧化活力。结果表明:与放疗对照组相比,放疗前给药SOD组对放疗鼠的外周血白细胞数量和胸腺指数有显著的保护作用,使之分别增加66.7%和19.1%。测得放疗前给药阿米福汀对放射鼠的外周血白细胞数量和脾脏指数有显著的保护作用,使之分别增加106.9%和22.6%。此外,与放疗对照组相比,放疗前给药SOD对放疗鼠的肝脏抗氧化能力也有显著提高,可使肝脏的MDA水平下降12.7%,SOD活力增加10.8%,T-AOC活力增加45.0%,放疗前给药阿米福汀可使放疗鼠肝脏的MDA水平下降22.3%。
- 潘剑茹郑光进何火聪吴君心苏颖刘树滔饶平凡
- 关键词：超氧化物歧化酶小鼠
- X线照射、顺铂及X线照射+顺铂对CC趋化因子受体7表达的影响
- 2018年
- 目的探讨X线照射、顺铂及放疗+顺铂对CC趋化因子受体7(CCR7)表达的影响。方法不同剂量X线单次照射SW480细胞、SPC-A1细胞和CNE-2细胞后,用Western blot法检测细胞中CCR7的表达变化;比较8 Gy单次X线照射组与2 Gy·d^(-1)连续照射6 d组SPC-A1细胞中CCR7表达的差异;观察不同浓度顺铂给药24 h和48 h后CNE-2细胞中CCR7表达的变化;比较2 Gy X线照射、不同浓度顺铂和不同浓度顺铂+2 Gy X线照射对CNE-2细胞中CCR7表达的影响。结果 1)单纯X线照射SW480细胞:2 Gy和10 Gy照射24 h后,SW480细胞中CCR7的表达高于0 Gy组,且随照射剂量的增加而增加(P均<0.05);与10 Gy组比较,20 Gy组的CCR7表达没有进一步增加(P>0.05);照射48 h后,各剂量组CCR7的表达较0 Gy组增加,但2 Gy、10 Gy、20 Gy组之间比较差异均无统计学意义(P均>0.05);2)单纯X线照射SPC-A1细胞:CCR7在SPC-A1细胞中的表达不随X线照射时间、照射方式及剂量的变化而变化(P均>0.05);3)单纯X线照射CNE-2细胞:照射24 h和48 h后,各剂量组CCR7的表达均较0 Gy组增加,差异均有统计学意义(P均<0.05);但相同时间2 Gy、10 Gy、20 Gy组之间比较差异均无统计学意义(P均>0.05)。各剂量组照射48 h后CCR7表达均较照射24 h后明显增加,差异均有统计学意义(P均<0.05);4)8 Gy单次X线照射与2 Gy·d^(-1)连续照射6 d这2种照射方式对CCR7无影响,CCR7的表达不随照射方式和照射时间的变化而变化(P均>0.05);5)不同治疗方案对CNE-2细胞CCR7表达的影响:与2 Gy·d^(-1)连续照射6 d组及相同浓度顺铂组比较,0.8μg·mL^(-1)顺铂+2 Gy组和20μg·mL^(-1)顺铂+2 Gy组CCR7的表达下降,差异均有统计学意义(P均<0.05)。0.032μg·mL^(-1)顺铂+2 Gy组、0.8μg·mL^(-1)顺铂组+2 Gy组、20μg·mL^(-1)顺铂+2 Gy组3组CCR7的表达两两比较差异均无统计学意义(P均>0.05)。结论 X线照射可增加SW480细胞和CNE-2细胞CCR7的表达,但对SPC-A1细胞CCR7表达无影响;顺铂能够增加CNE-2细胞中
- 郭爱华苏颖何火聪李金銮杨百华吴晨斌蒋伟平吴君心
- 关键词：趋化因子受体7X线照射顺铂
- Tat蛋白转导区域位于融合蛋白C端时的跨膜递送作用
- Tat蛋白的蛋白转导区域(PTD)的核心序列由11个氨基酸(YGRKKRRQRRR)组成,该多肽片段介导Tat蛋白的转导及其在细胞内的定位.利用这一特性,可将与PTD-Tat融合的外源蛋白诸如卵清蛋白、超氧化物歧化酶、过...
- 陈菁傅蓉刘树滔何火聪饶平凡
- 关键词：TAT蛋白融合蛋白分子生物学
- 沉默放射抗拒鼻咽癌细胞Annexin A2基因表达对裸鼠鼻咽癌移植瘤放射敏感性的影响被引量：2
- 2017年
- 目的探讨沉默Annexin A2基因对放射抗拒鼻咽癌细胞裸鼠移植瘤放射敏感性的影响。方法选择36只SPF级BALB/c裸鼠,雄性,6周龄,体质量18~22 g。按随机数字表法分为对照组[CNE-2(R743)组]、单纯照射组[CNE-2(R743)/R组]、转染对照组(sh R-C组)、转染对照联合照射组(sh R-C/R组)、转染组(sh R-ANXA2组)及转染联合照射组(sh R-ANXA2/R组),每组6只。用p Gene Clip空载体及p Gene Clip-ANXA2-sh RNA载体转染CNE-2(R743)细胞构建移植瘤动物模型,用6 MV X射线在室温下行单次照射动物,总吸收剂量为10 Gy,剂量率为每分钟400 c Gy,照射野面积为20 cm×20 cm。观察各组裸鼠移植瘤照射后的生长情况、移植瘤体积变化情况,免疫组织化学检测移植瘤组织中Annexin A2的表达,Western blot检测移植瘤组织中Ku70和增殖细胞核抗原(PCNA)的表达。结果 10 Gy X射线照射后3周,sh R-ANXA2/R组(168.46%±129.00%)裸鼠肿瘤生长速度最慢,与CNE-2(R743)/R组(462.26%±195.60%)和sh R-C/R组(407.99%±116.60%)比较,差异有统计学意义(P<0.05)。沉默Annexin A2的sh R-ANXA2/R组(2.68%±1.29%)的相对生长速率较CNE-2(R743)/R组(5.62%±1.96%)和sh R-C/R组(5.08%±1.17%)降低(P<0.05),生长抑制率增加。sh R-ANXA2/R组的q值为1.06,提示有放射增敏作用。免疫组织化学结果显示,sh R-ANXA2组移植瘤中Annexin A2的表达较CNE-2(R743)组和sh R-C组低。各组裸鼠移植瘤组织中Ku70蛋白的表达未见明显变化(P>0.05)。sh R-ANXA2/R组(2.97±0.44)的PCNA蛋白表达水平较CNE-2(R743)/R组(2.04±0.63)和sh R-C/R组(1.26±0.38)明显升高(P<0.05)。结论沉默Annxin A2基因可以提高裸鼠体内鼻咽癌移植瘤的放射敏感性。
- 邹长棪何火聪苏颖林可焴陈超
- 关键词：鼻咽癌ANNEXIN移植瘤
