余彩霞 作品数:8 被引量:27 H指数:3 供职机构: 四川大学生命科学学院 更多>> 发文基金: 国家科技型中小企业技术创新基金 更多>> 相关领域: 生物学 轻工技术与工程 化学工程 医药卫生 更多>>
产朊圆酵母尿酸酶形成条件研究 2005年 择到一株产尿酸酶较高水平的产朊圆酵母(Torula utilisHenneb).对此菌株尿酸酶形成条件的研究表明:蔗糖、葡萄糖是酶形成的适合碳源;蛋白胨和酵母膏是产酶的适合氮源,另添加无机氮源对产酶略有帮助作用;尿酸、黄嘌呤和鸟嘌呤对酶形成起诱导作用,底物尿酸是适宜的诱导物.尿酸酶形成最适培养基组成为(%):蔗糖3,蛋白胨2,酵母膏0.5,(NH4)2SO40.05,尿酸0.05,KCl 0.04,Pb2+、Fe3+、Hg2+、Mg2+、Ag+、Ca2+、Zn2+不利于产酶.另对培养条件做了优化探索:最适pH为6.0,在250mL三角瓶中装30mL培养液,接种量10%,在200r/min的旋转摇床上28℃振荡培养23h. 杨波 余彩霞 辛渝 许晓燕 谭晓晶 卢戌 喻堃 武翠玲 孟延发关键词:尿酸酶 发酵 朊圆酵母尿酸酶的基本特性研究 被引量:6 2006年 研究了尿酸酶分离纯化条件和pH、温度、底物浓度、一些有机和无机试剂对尿酸酶酶促反应速度的影响.研究结果表明,用Triton X-100及巯基乙醇处理细胞悬液(pH8.5),再用超声波处理破碎细胞效果最佳.硫酸铵沉淀尿酸酶的最佳浓度为75%.用Phenyl-Sepharose CL-4B疏水层析和Xamhine-agarose亲和层析两步纯化步骤可获得理想纯度的酶制剂.在一定的条件下,尿酸酶的最适pH和酸破稳定pH范围分别为8.5和5.0~12.最适温度为37℃;热稳定性较好,在50℃处理30min时活性保持90%,在60℃处理30min时活性仍保持80%.在最适条件下,该酶催化尿酸的米氏常数(Km)为3.34×10^-5mol/L.一些金属离子和有机化合物对酶活性的影响也进行了研究. 孟尧 辛渝 谭晓晶 许晓燕 余彩霞 杨波 孟延发关键词:尿酸酶 动力学特性 产朊圆酵母尿酸酶的分离纯化及其部分性质研究 被引量:1 2005年 产朊圆酵母Y0401经尿酸诱导培养,菌体采用超声波处理,依次经过DEAE-Sepharose离子交换层析、Phenyl Sepharose CL-4B疏水层析和Xanthine-agarose亲和层析,尿酸酶比活力达到18U/mg,纯化倍数为409倍,回收率为19.2%.纯化后的酶经还原、非还原SDS-PAGE分析为单一蛋白染色带,HPLC显示纯度为98%以上.用HPLC和Superdex 200分子筛层析两种方法测得该酶的相对分子质量为127kDa,在还原条件下进行SDS-PAGE,测得表观分子质量为33kDa,综上结果推测该酶是由分子量相同的4个亚基组成的四聚体蛋白.等电聚焦显示其等电点在6.8~7.5之间.该酶具有较强的酸碱稳定性和热稳定性.最适pH为8.5,最适温度为40.0℃.在最适pH和温度条件下测得该酶Km值为3.34×10-5 mol/L.对某些金属离子和有机物对酶活性的影响也进行了研究. 辛渝 潭晓晶 杨波 卢戌 余彩霞 许晓燕 孟延发关键词:尿酸酶 胆固醇氧化酶的发酵条件及酶学性质研究 被引量:3 2006年 Brevibacterium sp.可以发酵生产胆固醇氧化酶,实验中对该菌种进行了底物诱导及发酵条件的优化, 确定其最适培养基为(%):蔗糖0.3,酵母膏0.2,蛋白胨0.3,牛内膏0.3,K_2PO_4 0.1,MgSO_4 0.05,pH6.8。最适培养条件为:接种量5%,24℃培养20h,通气量为50mL 培养基/250mL 三角瓶,200r/min。在最适培养基及最适条件下,胆固醇氧化酶的酶活力可达到24.01U/mg,比未优化前1.71U/mg 提高了14倍。该酶具有较强的酸碱稳定性和热稳定性,最适 pH 为6.5,最适温度为54℃。在最适 pH 和温度条件下测得该酶 km 值为7.1 ×10^(-5)mol/L。 许晓燕 张锐 谭晓晶 余彩霞 辛渝 杨波 孟延发关键词:BREVIBACTERIUM 发酵 正交实验 酵母菌产甘油激酶的发酵条件优化 被引量:1 2006年 筛选得到产甘油激酶(GK,EC2.7.1.30)德巴利酵母菌,对其发酵条件进行了优化,确定其最适培养基配方为葡萄糖0.1%,KCl0.18%,酵母膏0.3%,柠檬酸0.6%,甘油0.5%。最适培养条件为接种量6%,装液量为120mL/250mL,160r/min、31℃培养25h。在最适培养基及最适条件下,甘油激酶的酶活力可达1.19U/mg。 许晓燕 谭晓晶 余彩霞 辛渝 孟延发关键词:酵母 发酵 红毛五加多糖的基本性质研究 被引量:15 2004年 本文从红毛五加中分离得到了三种多糖 ,并对它们的基本性质进行了研究。红毛五加经热水浸提 ,用Sevag法脱蛋白 ,经DEAE cellulose 32离子交换层析和SephacrylS 2 0 0HR凝胶层析纯化得到三个主要多糖组分 :AHP I、AHP II和AHP III。HPLC测定AHP I、AHP II和AHP III的表观分子质量分别为 7.0kD、5 9.5kD和 12 .9kD。红外光谱分析三种多糖具有多糖类物质的一般特征。经纸层析和GC结果综合分析得知 ,AHP I含有阿拉伯糖、岩藻糖、甘露糖、葡萄糖、半乳糖 ,其摩尔比为 1.0 0∶1.4 0∶0 .6 4∶3.13∶2 .0 9;AHP II含有鼠李糖、阿拉伯糖、甘露糖、葡萄糖和半乳糖 ,其摩尔比为 0 .36∶1.0 0∶0 .15∶0 .2 0∶1.10 ;AHP III含有鼠李糖、阿拉伯糖、岩藻糖、甘露糖、葡萄糖和半乳糖 ,其摩尔比为 1.2 2∶1.0 0∶0 .4 0∶0 .2 8∶0 .2 6∶1.0 3。咔唑 硫酸法测得AHP II、AHP III的糖醛酸含量分别为 6 .7%和 6 .0 % ;AHP I不含糖醛酸。体内试验表明 ,红毛五加粗多糖对小鼠S180 肉瘤有明显抑制作用。 陈永 李强 谭晓晶 卢戌 许晓燕 辛俞 杨波 余彩霞 孟延发关键词:红毛五加多糖 甘露糖 S180肉瘤 糖醛酸 鼠李糖 硫酸法 产朊圆酵母(Torula utilis Henn 2.281)尿酸酶快速提取法的研究 被引量:1 2005年 The combination of ultrasonic and Triton X-100 and β-ME made it easy to release Uricase from Torula utilis Henneb 2.281 quickly when the pH of cell suspending mixture varied from 7 to 11.The results of our researches were obtained as follow : the cell suspending mixture obtained the highest enzyme activity(20.4U/mL),after being treated with by Triton X-100 and β-ME(5%,v/v) and ultrasonic.The enzyme activity obtained by this method was obviously higher than by single treating method,e.g.ultrasonic(7.6U/mL) or Triton X-100 and β-ME(15.2U/mL). 余彩霞 杨波 辛俞 谭晓晶 许晓燕 孟延发关键词:尿酸酶 细胞壁 产磷酸甘油氧化酶菌种的筛选、鉴定及酶的分离纯化与性质研究 磷酸甘油氧化酶(GPO,E.C.1.1.3.21)是用偶联酶法测定甘油三酯含量的关键酶之一,以其特有的高特异性和高灵敏度现已被广泛地应用到心脏病和高血脂的临床诊断中。
由于不同菌种所需的营养与培养条件不同,不同... 余彩霞关键词:磷酸甘油氧化酶 菌种筛选 发酵条件 分离纯化 文献传递