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抗βhCG蛋白疫苗的抗肿瘤作用被引量：4: 2010年; 以人绒毛膜促性腺激素β亚基（βhCG）的羧基端109~118的6段串联重复表位为靶点、热休克蛋白65（HSP65）为载体,设计一种新型的蛋白疫苗HSP65-X6-βhCGCTP37,探讨其能否抑制小鼠前列腺癌,并且对其抗肿瘤的作用机理进行部分探讨。以制备的HSP65-X6-βhCGCTP37免疫C57BL/6小鼠,分别检测体液免疫应答和细胞免疫应答。通过ELISA法,从血清中检测到高滴度的抗βhCGIgG类抗体。Western blot实验证明小鼠血清中的抗体能够特异性识别βhCG表位。淋巴细胞增殖实验的结果显示,HSP65-X6-βhCGCTP37的免疫能够有效的刺激脾淋巴细胞的增殖。预防性实验的结果显示,HSP65-X6-βhCGCTP37激发的免疫应答对于RM-1肿瘤攻击起到有效的保护作用,与PBS阴性对照组比较,平均肿瘤重显著降低（P〈0.05）。同时有效地减少了小鼠的肺转移（P〈0.01）;抑制了小鼠皮内肿瘤模型中的血管新生（P〈0.01）。HSP65-X6-βhCGCTP37蛋白疫苗能有效地抑制小鼠前列腺癌的生长。; 叶嘉燕胡向兵邢芸侯景李飞张帆金亮李泰明刘景晶曹荣月; 关键词：蛋白疫苗前列腺癌

菊欧氏杆菌β-1,4-内切葡聚糖酶celY基因在大肠杆菌中的克隆、表达及活性分析被引量：2: 2012年; 以菊欧氏杆菌(Erwinia chrysanthemi)基因组DNA为模板,通过PCR方法扩增了该菌的β-1,4-内切葡聚糖酶celY基因及其调控元件并克隆至pUC19载体。测序结果经分析,该基因编码的蛋白序列与菊欧氏杆菌Ech586的β-1,4-内切葡聚糖酶同源性达到98%。将celY的开放阅读框基因插入到表达载体pET-28a中,转化大肠杆菌E.coli BL21(DE3),采用LB-CMC平板刚果红染色筛选含celY基因的转化子。12%SDS-PAGE显示,重组菌经IPTG诱导后表达了目的蛋白,其相对分子质量与预期结果相符。CMCase活力测定显示重组pET-28a-celY阳性菌分泌到培养基中的CelY酶活力为84.4 U/L,周质中的酶活力为12.7 U/L。β-1,4-内切葡聚糖酶CelY工程菌的获得,为研究菊欧氏杆菌纤维素酶基因在菊欧氏杆菌同源转化中的表达及工程菌的酶学特性提供了重要的资料。; 黄潇王泽宇邢芸侯景李泰明刘景晶; 关键词：Β-1,4-内切葡聚糖酶

肿瘤细胞裂解物抗小鼠B16F10黑色素瘤的作用研究被引量：3: 2012年; 反复冻融B16F10肿瘤细胞制备裂解物,以白喉毒素(Diphtheria toxin,DT)为载体,OK432和来源于结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis)热休克蛋白70(HSP70)第407-426(mHSP70407～426,M)的两段串联重复序列M2为佐剂,制备了肿瘤细胞疫苗B16F10-DT-M2-OK432(BDTMOK),探讨其能否抑制小鼠B16黑色素瘤,并且对其抗肿瘤的作用机理进行部分探讨。以制备的BDTMOK免疫C57BL/6小鼠,分别检测体液免疫应答和细胞免疫应答。通过ELISA法,从血清中检测到高滴度的抗B16肿瘤细胞裂解物(B16 tumor cell lysate,B16TCL)类抗体。淋巴细胞增殖实验的结果显示,BDTMOK的免疫能够有效的刺激脾淋巴细胞的增殖。预防结合治疗性实验的结果显示,BDTMOK激发的免疫应答对于B16肿瘤攻击起到有效的保护作用,与PBS阴性对照组比较,皮下注射BDTMOK可以延长皮下移植瘤发生的潜伏期(P<0.05),并且平均瘤重显著降低(P<0.05);抑制了小鼠皮内肿瘤模型中的血管新生(P<0.01)。疫苗BDTMOK能有效的抑制小鼠B16黑色素瘤的生长。; 路蕾陈科刘彬王泽宇葛驰宇侯景金亮邢芸曹荣月刘景晶; 关键词：肿瘤细胞疫苗

一种肽及其应用、制备方法: 本发明提供了一种能用于预防和治疗糖尿病的肽。针对抗原多肽的弱免疫原性，将源于人HSP60的一段抗原表位多肽(IPALDSLTPANED)插入胰岛素相关蛋白2(insulinoma associated protein2)...; 刘景晶马艳君吴洁李泰明曹荣月金亮董元楷侯景黄文睿; 文献传递

一种新型肽及其应用、制备方法: 本发明提供了一种能用于预防和治疗糖尿病的肽。针对抗原多肽的弱免疫原性，将源于人HSP60的一段抗原表位多肽(IPALDSLTPANED)插入胰岛素相关蛋白2(insulinoma associated protein 2...; 刘景晶马艳君吴洁李泰明曹荣月金亮董元楷侯景黄文睿

S-腺苷蛋氨酸抗小鼠H22肝癌作用研究: 2011年; 探讨S-腺苷蛋氨酸(SAM)能否抑制小鼠H22肝癌。通过建立H22小鼠肝癌模型,SAM预防及治疗,检测皮下抑瘤率、皮内肿瘤微血管新成、肺转移等指标对其抗肿瘤作用机理进行部分探讨。结果显示,SAM对H22肿瘤攻击起到有效地保护作用,与PBS阴性对照组相比,预防组和治疗组肿瘤生长缓慢,平均瘤重显著降低(P<0.01),抑瘤率达到70%以上;有效地抑制了小鼠皮内模型中的微血管新生(P<0.01);同时在一定程度上减少了小鼠的肺转移(P<0.05)。SAM通过抑制肿瘤血管生长表现出有效的抑制小鼠H22肝癌作用。; 姚毅张宇张帆侯景罗新龙曹荣月金亮吴洁刘景晶; 关键词：S-腺苷蛋氨酸 H22肝癌抑制血管生成肺转移

重组HSP65-6P277乳酸乳球菌疫苗对链脲佐菌素诱导的1型糖尿病小鼠的降糖作用被引量：2: 2014年; 探讨表达HSP65-6P277蛋白的乳酸乳球菌活载体疫苗对链脲佐菌素(STZ)诱导的1型糖尿病小鼠的降糖作用及可能的作用机制。采用多次小剂量腹腔注射STZ建立1型糖尿病模型。将诱导型表达菌株Lactococcus lactis NZ9000pCYT∶HSP65-6P277和组成型表达菌株L.lactis NZ9000 pHJ∶HSP65-6P277及无关蛋白对照菌株L.lactis NZ9000 pCYT∶Nuc灌胃1型糖尿病小鼠(2×109CFU,200μL),每天灌胃1次,连续7 d,之后每周灌胃1次,持续16周。每月从小鼠眼眶静脉丛取血1次,血糖检测仪检测STZ造模小鼠血糖水平并称体重。4个月后将小鼠处死,取小鼠脾脏做脾细胞增殖实验,采用ELISA试剂盒分别检测脾细胞上清液中的IL-10和IFN-γ细胞因子水平以及血清IgG抗体水平。结果显示,与对照组相比,pCYT∶HSP65-6P277组和pHJ∶HSP65-6P277组可以一定程度上降低STZ造模小鼠血糖水平(P<0.05),并能维持其正常体重稳定,降低脾细胞针对HSP65和P277的增殖(P<0.05),脾细胞上清液中IFN-γ细胞因子水平明显降低(P<0.05),血清IgG抗体水平无明显差异(P>0.05)。; 吴洁刘晓锐杨雪侯景徐茂磊申丽丽黄东成刘坤锋; 关键词：乳酸乳球菌疫苗黏膜免疫 1型糖尿病

不同调控元件驱动下菊欧氏杆菌纤维素酶celY基因在大肠杆菌中表达的研究被引量：7: 2012年; 目的:以菊欧氏杆菌(Erwinia chrysanthemi)基因组DNA为模板,通过PCR方法找到了该菌的β-1,4-内切葡聚糖酶celY基因及其调控元件并克隆至pUC19载体。为提高纤维素酶celY基因在原核细胞中的分泌表达量,比较了由不同启动子和信号肽调控的celY基因在大肠杆菌中的表达水平。方法:分别构建了由脂蛋白启动子、T7启动子、果胶酶信号肽调控的多种表达载体与由纤维素酶celY基因自身的启动子和信号肽调控的表达载体相比较。结果:由脂蛋白启动子、T7启动子、果胶酶信号肽调控的表达载体都不同程度提高了celY基因的分泌表达量。结论:脂蛋白启动子、T7启动子、果胶酶信号肽都不失为构建强分泌表达载体的可选元件。; 陈科黄潇路蕾邢芸侯景吴洁刘景晶; 关键词：纤维素酶启动子信号肽分泌表达

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侯景