侯贤宏
- 作品数：8 被引量：6H指数：2
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- 相关领域：农业科学生物学医药卫生更多>>
- IBDV VP2/4/3与ChIL-18融合和共表达真核表达质粒的构建及其免疫原性研究
- 传染性法氏囊病（IBD）是由传染性法氏囊病病毒（IBDV）引起的急性接触性传染病,是危害世界养禽业的主要传染病之一。IBDV主要侵害雏鸡的中枢免疫器官-法氏囊,导致免疫抑制。用弱毒苗和灭活苗免疫鸡群是目前防治IBD的主要...
- 侯贤宏
- 关键词：鸡白细胞介素18基因融合基因共表达
- 文献传递
- 红色荧光特异性标记线粒体细胞系的建立及应用
- 本发明提供一种红色荧光特异性标记线粒体的Vero细胞系V-Mito，通过在脂质体LipofectamineTM2000介导下将超纯质粒pDsRed2-Mito转染Vero细胞，经含G418的培养基进行阳性克隆筛选，挑取阳...
- 于涟魏永伟章晓栋侯贤宏
- 文献传递
- IBDV VP2/4/3、ChIL-18共表达载体的构建及在Vero细胞上的表达被引量：3
- 2010年
- 为提高传染性法氏囊病病毒(IBDV)多聚蛋白(VP2/4/3)DNA疫苗的免疫效果,应用重叠延伸剪切技术(splicing by overlapping extension)将IBDV VP2/4/3基因与鸡白细胞介素18(ChIL-18)基因分别经3次PCR获得融合基因片段VP2/4/3-ChIL-18和ChIL-18-VP2/4/3,将融合基因片段定向插入真核表达载体pCI中,获得重组质粒pCI-VP2/4/3-ChIL-18和pCI-ChIL-18-VP2/4/3;应用PCR法,在本实验室已成功构建的重组真核表达载体pCI-VP2/4/3和pCI-ChIL-18的基础上,构建VP2/4/3基因和ChIL-18基因的共表达载体co-pCI-VP2/4/3-ChIL-18。在脂质体介导下将上述重组真核表达载体转染Vero细胞,间接免疫荧光证实重组质粒能正常表达目的蛋白,表达的蛋白具有免疫反应性。这为进一步研究ChIL-18的分子免疫佐剂作用及研制高效、价廉的IBDV DNA疫苗提供了实验依据。
- 侯贤宏魏永伟章晓栋于涟
- 关键词：IBDV基因融合共表达间接免疫荧光
- 红色荧光特异性标记线粒体细胞系的建立及应用
- 本发明提供一种红色荧光特异性标记线粒体的Vero细胞系V－Mito，通过在脂质体LipofectamineTM2000介导下将超纯质粒pDsRed2－Mito转染Vero细胞，经含G418的培养基进行阳性克隆筛选，挑取阳...
- 于涟魏永伟章晓栋侯贤宏
- 文献传递
- IBDV VP2/4/3与ChIL-18融合基因真核表达质粒和基因共表达质粒的免疫原性比较被引量：3
- 2010年
- 为比较已构建的鸡传染性法氏囊病病毒(IBDV)重组质粒的免疫原性、进一步研究ChIL-18的分子免疫佐剂作用,本研究将2周龄SPF鸡随机分为6组,以200μg/羽剂量首免:A组免疫重组真核表达重组质粒pCI-VP2/4/3-ChIL-18,B组免疫pCI-ChIL-18-VP2/4/3,C组免疫pCI-co-VP2/4/3-ChIL-18,D组免疫pCI-VP2/4/3,E组免疫pCI-ChIL-18和pCI-VP2/4/3,F组为空白对照,2周后以相同剂量二免,通过观察外周血淋巴细胞增殖效果,测定血清IBDV中和抗体水平、血清ELISA抗体水平和攻毒保护试验等,比较各试验组IBDV DNA疫苗的免疫原性。试验发现:重组质粒pCI-co-VP2/4/3-ChIL-18的保护效果最好,保护率达93.3%;pCI-VP2/4/3-ChIL-18免疫效果次之,保护率达80.0%;pCI-ChIL-18-VP2/4/3与pCI-ChIL-18和pCI-VP2/4/3的免疫效果无显著差异,保护率均为73.3%;但均优于单独使用重组质粒pCI-VP2/4/3组,保护率为60.0%。本实验为进一步研究ChIL-18的分子免疫佐剂作用及研制高效、价廉的IBDV DNA疫苗提供了实验依据。
- 侯贤宏魏永伟章晓栋于涟
- 关键词：真核表达载体DNA疫苗免疫原性
- 白细胞白介素2的应用
- 细胞白介素2(Interleukin-2,IL-2)主要是由 T 淋巴细胞或 T 淋巴细胞系产生的一类最有利的 T 细胞生长因子,属于 Th1型细胞因子,在抗肿瘤、抗毒素免疫调节及感染性疾病的治疗中具有重要作用。它能够有...
- 侯贤宏于涟
- 关键词：IL-2亚单位疫苗免疫增强剂免疫佐剂
- 文献传递
- 基于RNA聚合酶Ⅱ的传染性法氏囊病病毒反向遗传系统的建立
- 2008年
- 应用重叠PCR法在鸡传染性法氏囊病病毒基因组A、B两节段的5'末端和3'末端分别引入具有自我剪切功能的核酶HamRz和HDV序列,然后分别将含有核酶序列的A、B节段构建到pCI真核载体当中,构建真核载体pCI-ma核pCI-mb。在脂质体介导下,将pCI-ma和pCI-mb共转染Vero细胞。细胞病变观测、间接免疫荧光试验和分子标记检测证实成功实现了鸡传染性法氏囊病病毒的遗传拯救。
- 魏永伟侯贤宏章晓栋徐弘吕冬梅于涟
- 关键词：IBDV
- 基于T7 RNA聚合酶的传染性法氏囊病病毒反向遗传系统的建立
- 2008年
- 为了建立传染性法氏囊病病毒反向遗传系统,应用PCR法在鸡传染性法氏囊病病毒基因组A、B两节段的5末端和3末端分别引入T7启动子和核酶HDV序列,然后分别将含有T7启动子和核酶HDV序列的A、B节段构建到载体PT-Pluc当中,构建感染性载体PT-mA和PT-mB.在脂质体介导下将PT-mA和PT-mB共转染经痘病毒vTF7-3(含T7 RNA聚合酶基因,能稳定表达T7 RNA聚合酶)预先感染1 h的vero细胞.细胞病变观测、间接免疫荧光试验、电镜观察和分子标记检测证实成功实现了鸡传染性法氏囊病病毒的遗传拯救.
- 魏永伟章晓栋侯贤宏徐弘于涟
- 关键词：IBDVT7RNA聚合酶
