刘庆海
- 作品数：7 被引量：13H指数：3
- 供职机构：长春生物制品研究所更多>>
- 相关领域：医药卫生化学工程轻工技术与工程更多>>
- HPLC检测蛋白质纯度时流动相组成的对比研究
- 1997年
- 应用高效液相体积排阻色谱法检测生物蛋白质纯度时，常常出现一“干扰峰”，严重地困扰了样品纯度的检测和判定。实验中发现，外源注射流动相本身时，在相同的保留体积处也出现此吸收峰。证明“干扰峰”非样品蛋白组分所致。经流动相组分的对比研究，证明EDTA对“干扰峰”的出现起主要作用。
- 刘晓宇杨秀刘庆海李俊植
- 关键词：高效液相色谱流动相组成蛋白纯度
- 微柱凝胶抗球蛋白试验中液体和凝胶两相介质的作用被引量：3
- 2005年
- 目的:探讨微柱凝胶抗球蛋白试验中液体和凝胶两相介质的作用,分析该试验不需洗涤步骤的原因。方法:将甲基兰溶液加入微柱凝胶管的上部宽腔中,观察其扩散至微管下部窄腔的凝胶介质中的时间。将甲基兰溶液加入传统Coombs试验的试管腔反应液中,观察其在反应液中扩散的时间。结果:MG Coombs试剂卡反应腔中加入的甲基兰长时间不扩散到凝胶中,能够保持两相状况长达6小时,远远长于常规的红细胞血清血型学的抗原抗体反应所需时间。甲基兰溶液完全扩散到凝胶中,两相混合需30小时。传统的试管Coombs试验加入人血清、红细胞和抗球蛋白试剂,再加入甲基兰溶液后即刻全部呈兰色。结论:证明在微柱凝胶抗球蛋白试验中不需洗涤而简化了程序,有两个原因。原因之一是试剂卡中的反应液存在两相状况,即抗球蛋白试剂存在于微管下部窄腔的凝胶介质中;红细胞,被检人血清位于微柱凝胶管上部宽腔中。原因之二是凝胶介质不仅仅是分离凝集红细胞和散在的红细胞的介质,还是促进抗球蛋白与IgG致敏红细胞反应的介质。
- 胡永红李勇刘庆海王玉华
- 关键词：COOMBS试验
- 重组人α<,2b>干扰素高效表达载体的构建
- ＰｓｔＩ－ＥｃｏＲＩ双酶切得α〈，２ｂ〉干扰素基因片断，Ｍｕｎｇ－ｂｅａｎ酶处理成平端；同时ＮｃｏＩ单酶切ＰＪＬＡ５０２载体，Ｍｕｎｇ－ｂｅａｎ酶处理成平端。用Ｔ〈，４〉ＤＮＡ连接酶进行平端连接，经转化大肠杆菌ＤＨＩ中，...
- 刘庆海
- 关键词：干扰素基因表达
- 人白细胞介素-6成熟肽基因重组及其在大肠杆菌中的表达被引量：5
- 1995年
- 将PCR扩增的人白细胞介素-6（hIL-6）成熟肽基因与PJLA502表达载体重组，在大肠杆菌中高效表达出rhIL－6。经SDS－PAGE分析，rhIL－6表达量占菌体可溶性蛋白的40％以上。经免疫印迹证实，rhIL－6具有良好的抗原特异性。复性后，用MTT法测定IL－6依赖株7TD1细胞增殖活性，rhIL－6比活性达2．5×10~6u／mg蛋白。
- 李俊植刘庆海刘铸王玲邸丽莹袁志宏肖青汪革非
- 关键词：成熟肽基因重组大肠杆菌
- 基因工程人白介素-6中试工艺研究
- 1998年
- 本研究对基因工程人白介素－6成熟肽在大肠杆菌中的表达、纯化及检定做了一系列的研究，建立了一套罐培养诱导表达，乙酸裂解包涵体，复性及纯化的中试工艺，并制备3批半成品，经检定各项指标已接近国家基因工程产品质控标准。
- 李俊植刘庆海魏洪杰华勐志袁志宏邸丽莹汪革非刘晓宇杨秀肖青曹广强冷梅
- 关键词：RHIL-6中试工艺纯化工艺
- 国产免疫磁珠与溴化氢活化Sepharose 4B亲和层析分离羊抗人IgG的比较被引量：3
- 2006年
- 目的比较国产免疫磁珠与溴化氢活化Sepharose 4B两种不同介质偶联人免疫球蛋白纯化羊抗人IgG的差别。方法采用亲和层析的方法纯化羊抗人IgG,通过血凝实验检测不同介质纯化产物的效价和特异性。通过SDS-PAGE检测其纯度。通过计算偶联率及蛋白回收率,比较两种介质纯化效率。结果两种不同介质纯化的羊抗人IgG特异性良好,效价均为1∶512,SDS-PAGE检测均为单一条带。采用两种介质纯化羊抗人IgG,蛋白回收率分别为10·03%和17·45%。结论两种不同介质采用亲和层析方法纯化均可获得纯度较高的羊抗人IgG。
- 童军李勇陈亚光刘庆海杨文冲刘颖
- 关键词：免疫磁珠
- 应用XTT法检测白细胞介素-6的生物学活性被引量：2
- 1999年
- 应用XTT比色分析法检测IL - 6的活性 ,并与MTT法和3H掺入法进行了比较 ,结果XTT法较之上述两法简便易行 ,结果稳定 ,重复性好。
- 汪革非邸丽莹袁志宏刘庆海杨秀肖青魏洪杰华勐志李俊植
- 关键词：IL-6XTT生物学活性白细胞介素-6
