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刘晓东

作品数：2 被引量：3H指数：1
供职机构：北京大学生命科学学院更多>>
发文基金：国家自然科学基金更多>>
相关领域：生物学更多>>

合作作者

文献类型

  • 2篇中文期刊文章

领域

  • 2篇生物学

主题

  • 2篇小鼠
  • 2篇基因
  • 1篇端部
  • 1篇鼠模型
  • 1篇片段
  • 1篇转基因
  • 1篇转基因小鼠
  • 1篇限制性内切酶
  • 1篇小鼠模型
  • 1篇内切
  • 1篇内切酶
  • 1篇克隆
  • 1篇基因克隆
  • 1篇反义
  • 1篇反义RNA
  • 1篇RT-PCR
  • 1篇CDNA
  • 1篇CDNA片段

机构

  • 2篇北京大学

作者

  • 2篇刘晓东
  • 2篇吴鹤龄
  • 1篇孙紫清
  • 1篇张崇本

传媒

  • 1篇北京大学学报...
  • 1篇Journa...

年份

  • 1篇2001
  • 1篇1999
共 2 条 记 录，以下是 1-2
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排序方式：
129小鼠CgA基因cDNA 5′端部分片段及CgA基因的克隆被引量：1
1999年
通过ＲＴＰＣＲ方法，从１２９小鼠脑组织中克隆到ＣｇＡ基因ｃＤＮＡ５′端部分片段，序列分析结果表明，所克隆到的片段序列与文献中完全一致。以此片段为探针，从１２９小鼠基因组库中筛选获得阳性噬菌体１１，克隆了ＣｇＡ基因，并与文献中的小鼠ＣｇＡ基因限制性内切酶图谱进行了比较分析。
刘晓东吴鹤龄
关键词：RT-PCR限制性内切酶基因克隆CDNA
构建转CgA基因反向cDNA片段小鼠模型被引量：2
2001年
为了制作ＣｇＡ基因反义ＲＮＡ转基因小鼠，构建了质粒ｐＣＡＳ２Ｃ，并把ｐＣＡＳ２Ｃ中完整 的反义表达框显微注射入小鼠受精卵的雌原核中，随后将注射过ＤＮＡ的受精卵移植入假 孕鼠的输卵管中。假母所产子一代都用ｐ１和ｐ４引物对鼠尾基因组ＤＮＡ进行ＰＣＲ检测，选 出２只首建鼠（ＰＣＲ阳性）。首建鼠与正常鼠杂交后得到Ｆ１代小鼠，经ＰＣＲ方法筛选出来的 阳性Ｆ１代鼠雌雄自交产生Ｆ２代。为了检测Ｆ２代鼠的基因型，将ＰＣＲ方法鉴定为阳性的 Ｆ２代 小鼠分别与正常小鼠回交。只有回交后所得后代ＰＣＲ检测结果全为阳性的Ｆ２代个体才是 转基因纯合鼠。这样分别得到两只转基因首建鼠的纯合个体。转基因小鼠脑总ＲＮＡ经 ＲＴ－ＰＣＲ反应后可产生３００ｂｐ的产物，证明转基因小鼠中转入的反义基因已经转录。以上结 果说明转入的ｐＣＡＳ２Ｃ反义表达框已经整合到转基因小鼠的基因组中并遗传给后代，而且 已经转录。
刘晓东孙紫清张崇本吴鹤龄
关键词：反义RNA转基因小鼠
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