刘欢欢
- 作品数：10 被引量：18H指数：2
- 供职机构：四川农业大学更多>>
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- 相关领域：农业科学生物学医药卫生更多>>
- 视黄醇对仔猪睾丸支持细胞体外生物学特性的影响
- 视黄醇及其代谢产物是雄性动物睾丸发育和精子发生所必需的物质。支持细胞是睾丸内视黄醇作用的靶细胞，为生精细胞发育和成熟提供特有的微环境。本试验以分离自3-5周龄仔猪睾丸的支持细胞为材料，采用RT-PCR、CCK-8、ELI...
- 刘欢欢
- 关键词：仔猪睾丸视黄醇支持细胞体外生物学特性
- 文献传递
- 仔猪睾丸支持细胞的体外生物学特性研究被引量：7
- 2015年
- 为研究仔猪睾丸支持细胞生物学特性,以3~5周龄仔猪睾丸为材料,优化消化和差异贴壁方法,分离纯化支持细胞,研究其体外培养特性包括增殖活力、标志分子和细胞因子的表达。结果显示,先以0.25%胶原酶IV和0.1%透明质酸酶消化60 min,再以0.25%胰蛋白酶和0.1%DNase I消化20 min,有利于获得支持细胞;支持细胞接种后贴壁时间主要集中在3~5 h;纯化后细胞胞体宽大,呈梭形或不规则形;GATA4染色呈阳性,碱性磷酸酶染色呈阴性;RT-PCR结果表明,细胞表达GATA4、SOX9和INHB,不表达CYP17、3β-HSD和α-SMA;ELISA结果表明,细胞表达GDNF、LIF、CSF-1、EGF和FGF2,符合支持细胞的基本特征。
- 刘欢欢余树民夏娟孙成亮沈留红曹随忠左之才马晓平
- 关键词：支持细胞体外培养细胞因子
- 哺乳动物精原干细胞体外分离培养研究进展被引量：2
- 2014年
- 精原干细胞(spermatogonial stem cells,SSCs)作为成体干细胞的一种,具有高度自我更新和分化潜能。近几年研究发现,SSCs的体外培养是表观遗传基础研究、精子发生机制深入探索以及治疗雄性不育的基础条件。本文根据国内外SSCs相关研究,对哺乳动物SSCs的生物学特性、体外分离培养和鉴定等作一综述,以期为哺乳动物SSCs和其他干细胞的长期体外培养以及建系提供一定的借鉴。
- 刘丹夏娟刘欢欢余树民
- 关键词：精原干细胞生物学特性体外培养
- 雅安地区鸭沙门杆菌分离鉴定及耐药性分析被引量：1
- 2011年
- 为了研究雅安地区鸭沙门杆菌的耐药性,试验对部分鸭场鸭所发生的疾病调查、采样,并进行生化鉴定和耐药性分析。结果表明:从200份样本中共分离出13株沙门杆菌;分离所得的沙门杆菌对丁胺卡那霉素、氟哌酸、新霉素、阿奇霉素、氟苯尼考等13种药物高度敏感,对青霉素、痢特灵、庆大霉素等5种药物较为敏感,对强力霉素和头孢氨苄这2种药物中度敏感,对氨苄西林、利福平、氯洁霉素、大观霉素等7种药物已产生了较强的耐药性。
- 桂明星贾仁勇陈婧瑶范斌曹羽刘欢欢王卉余晓龙景波
- 关键词：沙门杆菌耐药性
- 以GDNF为核心的哺乳动物精原干细胞调控网络被引量：4
- 2015年
- 睾丸中的胶质细胞源神经营养因子由支持细胞、管周细胞、精母细胞和球形精子合成和分泌,是调节精原干细胞自我更新和分化的关键因子;GDNF通过与SSCs膜上受体GFRα1结合形成GDNF-GFRα1复合物,再结合并活化RET,最后激活MAPK、SFK和PI3K-AKT信号通路并达到调控SSCs自我更新和分化的目的。
- 刘欢欢陈曦余树民宋品沈留红曹随忠左之才马晓平
- 关键词：精原干细胞自我更新哺乳动物
- 维生素A对体外培养人脐带间充质干细胞生长的影响被引量：1
- 2014年
- 该实验以人脐带间充质干细胞(human umbilical cord mesenchymal stem cells,hUCMSCs)为研究对象,探讨维生素A对其体外培养的影响。结果显示,添加维生素A培养后,hUCMSCs仍维持其本身生物学特性,表达其标记基因CD29、CD44和干细胞标记基因Oct4、Sox2、Nanog。维生素A促进hUCMSCs的体外增殖,上调增殖基因PCNA、C-myc和干细胞标记基因Nanog的表达,下调凋亡基因Bcl-x的表达。该研究证明了维生素A具有促进hUCMSCs增殖和维持其干细胞特性的作用,对继续探索hUCMSCs的体外快速增殖和维生素A对hUCMSCs增殖调控的机理具有重要意义。
- 刘丹余树民刘欢欢宋品曹随忠沈留红张坤左之才邓俊良任志华王娅马晓平
- 关键词：维生素A增殖
- 视黄醇对仔猪睾丸支持细胞体外生物学特性的影响
- 2019年
- 支持细胞是构成曲细精管上皮的重要组成细胞,视黄醇及其衍生物是雄性动物睾丸发育和精子发生中所必须的物质,支持细胞是睾丸内视黄醇及其衍生物作用的靶细胞。本研究以3~5周龄仔猪睾丸支持细胞为材料,通过分析视黄醇对体外支持细胞活力、增殖和凋亡相关基因表达、相关细胞因子转录及合成的影响,评价视黄醇对支持细胞体外生物学特性的影响。结果显示,与对照组相比,视黄醇添加浓度达到5.000、0.125μmol·L-1时,显著抑制培养24h和72h的细胞活性(P<0.05);添加1.250μmol·L-1视黄醇组和对照组相比,增殖相关基因PCNA、BCL-2和C-MYC显著下调(P<0.05),凋亡相关基因BAX显著上调(P<0.05),且支持细胞内GDNF、CSF-1和EGF在基因表达和蛋白质水平上均显著降低(P<0.05)。体外培养条件下,添加视黄醇抑制支持细胞活性,促进细胞凋亡。
- 邓嘉强钟丽君刘欢欢曹随忠沈留红余树民
- 关键词：视黄醇仔猪睾丸支持细胞
- 干细胞标志分子在猪脐带组织中的表达
- 2014年
- 【目的】研究干细胞标志分子,如干细胞"干性"调控关键基因及胚胎阶段特异性抗原(Stage-specific embryonic antigen,SSEA)在猪脐带组织中的表达状况,为猪脐带来源细胞的利用提供参考。【方法】以猪脐带为研究材料,利用反转录聚合酶链反应(RT-PCR)和免疫组化方法,分析干细胞"干性"调控关键基因Oct4、Nanog、Sox2、Rex1以及SSEA-1、SSEA-3和SSEA-4在猪脐带组织中的表达。【结果】RT-PCR分析显示,干细胞"干性"调控关键基因Oct4、Nanog、Sox2、Rex1在所有猪脐带样品中阳性转录,但Nanog mRNA的相对表达量显著低于Oct4mRNA、Sox2mRNA和Rex1mRNA,而后三者之间无显著差异;免疫组化分析显示,Oct4、Nanog、Sox2、SSEA-1、SSEA-3和SSEA-4在猪脐带组织中呈阳性染色,表达这些蛋白抗原的阳性细胞主要分布于脐带华通氏胶,且多集中于血管附近。【结论】从基因转录和蛋白水平证实猪脐带组织表达干细胞标志分子,SSEAs表达谱与猪胚胎生殖细胞相符,提示脐带组织中含有早期未分化的多潜能细胞。
- 余树民凌占业刘丹刘欢欢夏娟沈留红曹随忠左之才邓俊良任志华马晓平王娅胡延春
- 关键词：脐带干细胞
- 四川省柑橘炭疽病病原鉴定和遗传多样性分析
- 柑橘（Citrus）是一类重要的水果,在世界各地均有栽培,四川省是国内柑橘种植面积较大的省份之一。炭疽病（Anthracnose）是由炭疽属（Colletotrichum）真菌引起的在柑橘生长过程中危害严重的病害之一,本...
- 刘欢欢
- 关键词：炭疽菌柑橘属系统发育
- 文献传递
- 犬前松弛素原基因的克隆与生物信息学分析被引量：1
- 2016年
- [目的]本试验通过对犬前松弛素原基因的分析推导获得犬松弛素基因序列,为犬松弛素多克隆抗体的制备及临床应用提供理论基础。[方法]以北京犬和吉娃娃新生胎盘、贵宾犬卵巢为材料,分别提取总RNA,经RT-PCR扩增,获得犬前松弛素原基因,应用生物信息学方法初步分析犬前松弛素原基因的结构及功能。[结果]完整克隆了从所获样品中扩增到的预期大小目的片段,包含一个534 bp的开放阅读框,编码177个氨基酸。扩增片段序列分析结果显示,与NCBI核酸数据库检索的犬前松弛素原的c DNA序列同源性为99.6%,均有3个核苷酸位点发生改变,从而引起相应氨基酸改变,但并未引起蛋白结构的变化。进化树分析结果显示,所获3条目的片段同为一支,与猫前松弛素原基因的进化距离最近。生物信息分析显示,3条序列等电点、带电荷数、最高(最低)氨基酸、消光系数、半衰期、不稳定系数均一致,相对分子质量、不稳定系数、脂肪系数、总平均疏水指数有细微差异;跨膜区、信号肽、糖基化位点分析结果一致;二级结构组成一致,包含α-螺旋、延伸链、无规则卷曲,比例存在细微差异。[结论]成功克隆了犬前松弛素原基因,可以生物信息学分析为基础进行犬松弛素多克隆抗体的制备。
- 任志华夏娟刘欢欢余树民沈留红曹随忠左之才邓俊良马晓平
- 关键词：松弛素生物信息学分析
