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刘睿洋: 作品数：11 被引量：66H指数：6; 供职机构：湖南农业大学农学院更多>>; 发文基金：国家重点基础研究发展计划湖南省科技厅重大专项湖南省教育厅优秀青年基金更多>>; 相关领域：农业科学生物学更多>>

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甘蓝型油菜磷脂二酰甘油酰基转移酶(BnPDAT1)表达特性研究被引量：2: 2019年; 为探究甘蓝型油菜中BnaPDAT1基因表达特性与油脂合成之间的关系。选用2个含油量具有显著差异的甘蓝型油菜双低品系855(49. 72%)和868(35. 06%),以qRT-PCR方法检测BnaPDAT1各拷贝在两品系油菜中的表达规律,同时以薄层层析(TLC)和气相色谱(GC)检测两品系油菜中TAG的积累规律。结果表明:授粉后种子中BnaPDAT1基因及其3个拷贝表达量均呈先升高后降低的趋势,花、叶片中均有BnaPDAT1表达,三拷贝表达存在差异,但表现整体调控的特点。两品系油菜叶(Bna A10. PDAT1除外)和授粉后20 d的种子中BnaPDAT1及其3个拷贝表达量具有极显著差异,其余各时期两品系间表达差异规律不明显,BnaPDAT1在高含油量品系855中授粉后20 d表达量为全生育期最高值(11. 100 9),是868的5. 07倍;叶中表达量8. 858 6,为868的7. 34倍,表达特性与Bna C09. PDAT1相似。两品系油菜种子TAG含量变化均呈S型,授粉20 d后油脂合成进入快速增长阶段,授粉后35 d进入缓慢增长期;授粉后30 d以前TAG含量品系间差异不大,授粉后35 d开始出现差异,授粉后40 d差异进一步扩大并趋于稳定。BnaPDAT1基因表达和种子TAG含量变化没有明显的直接关系,但高含油品系中BnaPDAT1基因表达值明显高于低含油品系。; 谭太龙冯韬罗海燕彭烨刘睿洋官春云; 关键词：甘蓝型油菜基因

甘蓝型油菜BnFAD2-C1基因全长序列的克隆、表达及转录调控元件分析被引量：7: 2015年; 脂肪酸去饱和酶基因(FAD2)是控制植物体中油酸含量的关键基因,在甘蓝型油菜中有4个FAD2基因的拷贝,分别定位在A1、C1、A5、C5染色体上。本文克隆了1个FAD2拷贝基因,依据油菜基因组数据库信息,将其定位到C1染色体上,命名为Bn FAD2-C1,其开放阅读框为1155 bp。采用RACE(rapid-amplification of c DNA ends)技术获得了175 bp的5?UTR序列和212 bp的3?UTR序列。采用荧光定量PCR技术研究发现,Bn FAD2-C1在根、花和角果皮中仅保持本底水平的表达,在种子发育中期呈现高效表达,具有种子特异性诱导表达的特征。根据甘蓝和油菜基因组数据库信息,同源克隆到Bn FAD2-C1基因的启动子(promoter)和内含子(intron)序列,并通过PLACE和Plant CARE网站分析,初步预测到调控该基因转录的潜在顺式作用元件。通过茉莉酸诱导处理,Bn FAD2-C1基因表达量发生变化,推断茉莉酸在Bn FAD2-C1基因的表达过程中可能发挥一定的调控作用。; 刘芳刘睿洋彭烨官春云; 关键词：甘蓝型油菜 RACE 生物信息学分析茉莉酸

湘油15 PGIP9蛋白基因的克隆和蛋白序列结构分析及原核表达被引量：2: 2012年; 运用生物信息学软件对湘油15 PGIP9基因的核苷酸、蛋白氨基酸序列进行分析,并对其蛋白结构进行预测。结果表明:湘油15 PGIP9编码区CDS长1 011 bp,编码336个氨基酸的开放阅读框,分子量为37.5kDa,等电点为7.9。N端1～22个氨基酸是信号肽,且这一区域疏水性较强,具有5个潜在的N-糖基化位点。N端和C端还各具有4个参与二硫键形成的半胱氨酸残基。二级结构显示有11个α-螺旋,14个β-延伸和25个无规则卷曲。中心LRR结构域由6个串联的LRR基序组成。随后将PGIP9的CDS序列亚克隆到原核表达载体pET-32a(+)中,构建pET-32a-PGIP9重组表达质粒,并转化E.coil BL21(DE3),25℃,终浓度为0.2 mmol/L和0.5 mmol/L的IPTG诱导2 h,都成功的表达了融合蛋白pET-32a-PGIP9,其分子量约为52kDa,发现主要以包涵体形式存在,没有可溶形式的蛋白表达。; 刘睿洋皇甫海燕靳芙蓉官春云; 关键词：甘蓝型油菜多聚半乳糖醛酸酶抑制蛋白原核表达

甘蓝型油菜FAD2、FAD3、FATB基因共干扰载体的构建及其遗传转化: 油酸因其特有的生物学特性,而极具经济价值,成为当前油菜育种热点。目前“双低”油菜品种已广泛种植。在“双低”油菜种子中,以油酸为前体的碳链延长途径经多年的常规育种选择已经被逐步切断,而去脂肪酸去饱和途径所形成亚油酸、亚麻酸...; 刘睿洋; 关键词：甘蓝型油菜转基因; 文献传递

BnFAD2、BnFAD3和BnFATB基因的共干扰对油菜种子脂肪酸组分的影响被引量：6: 2017年; 甘蓝型油菜是一种重要的油料作物,为了改良其种子脂肪酸组分,提升其经济价值,本研究分析了油菜种子发育时期脂肪酸合成积累模式及BnFAD2、BnFAD3、BnFATB基因的表达规律,认为这3个基因在种子发育中后期(授粉后25d起)的高效表达对油酸合成积累有着重要影响。通过Napin启动子诱导对油菜植株中BnFAD2、BnFAD3、BnFATB基因进行RNAi共干扰抑制,以达到提升油酸含量的目的。试验结果表明,转基因油菜种子中BnFAD2、BnFAD3、BnFATB基因的表达受到强烈抑制,种子中油酸含量由66.76%提升至82.98%,且油脂合成的相关基因同步出现表达上调。; 刘芳刘睿洋官春云; 关键词：油菜种子油酸

甘蓝型油菜早熟品种比较试验被引量：7: 2012年; 为筛选适合湖南双季稻区冬季种植的双低早熟油菜品种,2010～2011年在长沙引进12个油菜品种进行比较试验。结果表明:青杂3号和青杂7号生育期最短,为195 d,比对照(杂1613)早4 d,但产量较低,而G-11产量最高,达3 122.55 kg/hm2,比对照增产18.76%,生育期比对照短2 d。通过对12个参试品种的综合考察,2010-14、早0902、G-7和G-11产量优势明显,早熟性强,适宜在湖南地区种植。; 靳芙蓉刘睿洋皇甫海燕官春云; 关键词：油菜早熟

甘蓝型油菜BnFAD2基因的克隆、表达及功能分析被引量：5: 2016年; 高油酸油具备较高的营养价值,在甘蓝型油菜中,脂肪酸去饱和酶基因(FAD2)是控制油酸含量的关键基因。本研究克隆了甘蓝型油菜A5、C5、A1连锁群上3个BnFAD2基因的全长c DNA序列,分别命名为BnFAD2-A5、BnFAD2-C5和BnFAD2-A1,各自编码384、384、136个氨基酸。分别使用TMHMM、Clust X软件分析FAD2基因的跨膜结构域和酶活中心表明,BnFAD2-A1不具备脱氢酶活性。采用酵母功能互补实验对4个基因(含已发表的BnFAD2-C1)进行功能验证,发现BnFAD2-A5和BnFAD2-C5基因去饱和能力接近,均大于BnFAD2-C1基因。采用qRT-PCR分析4个基因在甘蓝型油菜不同组织中的表达规律,并用血凝素标签法分析BnFAD2-C1、BnFAD2-A5和BnFAD2-C5的蛋白稳定性,表明BnFAD2-A5和BnFAD2-C5是影响油菜种子油酸积累的主效基因。; 刘睿洋刘芳官春云; 关键词：甘蓝型油菜生物信息学

甘蓝型油菜磷脂二酰甘油酰基转移酶(BnPDAT1)cDNA的克隆和功能鉴定被引量：12: 2016年; 磷脂二酰甘油酰基转移酶（phospholipids：diacylglycerol acyltransferase,PDAT1）是植物三酰甘油（triacylglycerol,TAG）合成的关键酶。本文在甘蓝型油菜湘油15号c DNA中克隆到3个PDAT1全长编码序列（coding sequence,CDS）,经比对分别定位于A02、A10、C09染色体,分别命名为Bn PDAT1-A02、Bn PDAT1-A10和Bn PDAT1-C09,其序列长分别为1998、2002和2005 bp,各自编码665、666、667个氨基酸。预测Bn PDAT1基因编码蛋白定位于细胞质膜,具有典型的PDAT1保守结构域。多序列比对和进化分析表明,Bn PDAT1基因编码蛋白与甘蓝、拟南芥、亚麻芥PDAT1蛋白具有较高的同源性。酵母互补实验证实,该基因编码蛋白具有PDAT1酶活性。Bn PDAT1基因在湘油15号中的表达现先上升后降低趋势,在开花后25~30 d达最大值,但3个拷贝的表达变化规律存在差异。; 谭太龙冯韬罗海燕彭烨刘睿洋官春云; 关键词：甘蓝型油菜基因克隆

油菜钙依赖蛋白激酶BnCDPK1的克隆和表达分析被引量：10: 2014年; 根据转录组测序获得的钙依赖蛋白激酶基因的EST序列设计特异引物,利用RT-PCR和RACE技术从油菜中克隆获得Bn CDPK1基因全长序列,NCBI登录号为KF740477,其c DNA和g DNA全长分别为2115 bp和2857 bp,含有11个内含子和12个外显子。生物信息学分析表明其开放阅读框为1581 bp,编码527个氨基酸,具有CDPKs家族典型的特征,含有1个激酶区域和4个钙离子手型结构域,与拟南芥At CDPK28同源性最高,属于第Ⅳ亚家族。Bn CDPK1在油菜的根、茎、叶、花、种子中均有表达,但表达丰度存在差异,叶片中表达量最高,其次为茎、根和种子,花中的表达量最低;在高抗和高感油菜品种中,菌核菌胁迫均能够诱导Bn CDPK1上调表达,但是高抗品种比高感品种反应更迅速,表达量更高。接种前、接种后12 h、接种后24 h,高抗品种的表达量相比高感品种分别提高1.4倍、4倍和3倍,推测其可能参与油菜的生长发育以及油菜对菌核菌侵染的应答和防御反应。; 张秋平文李王峰廖志强李慧刘睿洋官春云; 关键词：油菜钙依赖蛋白激酶基因克隆基因表达抗病

油菜早熟品种比较试验初报被引量：12: 2011年; 为了考察早熟品种在稻-稻-油三熟栽培地区的适应性及其特征特性,采取直播方式,对不同来源的10个早熟材料进行了早熟性、产量和抗性等的比较。结果表明:从早熟性来看,G-7和德油早1号成熟期最早,杂1062、早0902和早0904成熟期较早;从产量来看,早0902、早0904和G-7均比对照增产10%以上。通过对综合性状的考察,初步得出以下结论:早0902、早0904和G-7三个品种可以作为湖南省境内稻-稻-油三熟制栽培的早熟油菜品种。; 靳芙蓉何激光刘睿洋官春云; 关键词：油菜栽培早熟性

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