刘金朋
- 作品数：27 被引量：37H指数：5
- 供职机构：河南农业大学牧医工程学院更多>>
- 发文基金：国家科技支撑计划河南省杰出人才创新基金河南省科技攻关计划更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 猪白细胞介素-2基因的克隆及其重组禽痘病毒载体的构建
- 2011年
- 采用RT-PCR技术自豫南黑猪脾淋巴细胞中扩增猪IL-2基因(pIL-2),RT-PCR产物进行T-A克隆并测序,获得了猪IL-2基因序列。将BamHⅠ酶切的猪IL-2基因非定向克隆到BamHⅠ酶切并去磷酸化的pSY538载体上,通过PCR、酶切和测序鉴定,筛选正向插入的重组质粒pSY538/pIL-2。NotⅠ酶切pSY538/pIL-2后,得到含有双启动子LP2和EP2的猪IL-2基因片段,将其亚克隆到含有LacZ基因的pSY681载体上,筛选正向插入的重组禽痘病毒转移质粒pSY681/pIL-2。测序结果表明,克隆的豫南黑猪IL-2基因长482 bp,包含1个完整读码框(465 bp),与GenBank中其他5条猪IL-2基因核苷酸同源性为99.9%。重组质粒pSY681/pIL-2经酶切、测序鉴定,证实含有目的片段,且连接、构建正确。成功构建了重组禽痘病毒转移质粒pSY681/pIL-2,为猪IL-2生物学功能的进一步研究和开发奠定基础。
- 王淑娟陈红英魏战勇刘金朋耿静微崔保安
- 关键词：克隆重组禽痘病毒
- 4株猪圆环病毒2型河南株全基因组的克隆与序列分析
- 将从郑州、南阳、武陟、临颍等地采集疑似PCV2感染的病料研磨、过滤除菌后,接种无PCV1和PCV2污染的PK-15细胞,盲传6代后,分离出4株PCV2(NY、LY、ZZ、WZ)。根据已发表的猪圆环病毒2型基因序列设计1对...
- 王亚丹崔保安陈红英王淑娟刘金朋朱前磊王子馨
- 关键词：猪圆环病毒2型全基因序列克隆
- 文献传递
- 4株猪圆环病毒2型河南株全基因组的克隆与序列分析
- 将从郑州、南阳、武陟、临颍等地采集疑似PCV2感染的病料研磨、过滤除菌后，接种无PCV 1和PCV 2污染的PK-15细胞，盲传6代后，分离出4株PCV2(NY.LY、ZZ、WZ)。根据已发表的猪圆环病毒2型基因序列设计...
- 王亚丹崔保安陈红英王淑娟刘金朋朱前磊王子馨
- 关键词：猪圆环病毒2型全基因序列克隆
- 文献传递
- ILTV Glycoprotein B(gB)与鸡Interleukin-18(IL-18)真核双表达载体的构建及表达
- 2011年
- 将ILTVgB基因和鸡IL-18基因插入到真核双表达载体pIRES中,构建共表达gB和IL-18基因的重组质粒pIRES-gB/IL18和表达gB基因的pIRES-gB质粒。通过脂质体将其转染鸡胚成纤维细胞,利用RT-PCR及间接免疫荧光检测重组质粒在体外的表达。将重组质粒通过腿部肌肉多点注射免疫21日龄雏鸡,应用ELISA和流式细胞仪分别检测免疫鸡的体液免疫及细胞免疫水平。结果显示,pIRES-gB/IL18和pIRES-gB转染细胞中分别含gB/IL-18基因的mRNA和gB基因的mRNA。间接免疫荧光检测表明,pIRES-gB/IL18和pIRES-gB在CEF细胞中有效地转录并表达gB蛋白。pIRES-gB/IL18和pIRES-gB免疫雏鸡后均能促进外周血T淋巴细胞亚群数量和血清中特异性抗体水平的增加,但前者的免疫效果明显优于后者,表明gB基因和鸡IL-18基因均获得了表达,且鸡IL-18能明显增强ILTV DNA疫苗诱发的免疫应答。
- 王淑娟商艳红陈红英邵攀峰刘金朋朱前磊王子馨崔保安
- 关键词：GLYCOPROTEIN
- 鸡传染性喉气管炎病毒的HN1株gB基因和鸡IL-18基因联合核酸疫苗及其制备方法
- 本发明公开了一种鸡传染性喉气管炎病毒的HN1株gB基因和鸡IL-18基因联合核酸疫苗，该疫苗由HN1株gB基因核酸疫苗与鸡IL-18基因核酸疫苗按1∶1配比混合组成。鸡传染性喉气管炎病毒的HN1株gB基因和鸡IL-18基...
- 陈红英魏战勇杨明凡崔保安邵攀峰刘金朋
- 文献传递
- 猪白细胞介素-2基因的克隆及其重组禽痘病毒载体的构建
- 【目的】为研究猪IL-2生物学功能及其应用前景。【方法】本实验采用RT-PCR技术自豫南黑猪脾淋巴细胞中扩增猪IL-2基因(pIL-2)基因,RT-PCR产物进行T-A克隆、测序,获得了猪IL-2基因序列。将BamHⅠ酶...
- 王淑娟崔保安陈红英刘金朋王亚丹朱前磊王子馨
- 关键词：克隆重组禽痘病毒
- 文献传递
- 猪圆环病毒Ⅱ型ORF2基因DNA疫苗的构建与鼠体内免疫效力观察
- 猪圆环病毒（Porcine circovirus, PCV）为圆环病毒科圆环病毒属成员,PCV分为PCV1和PCV2两种基因型。PCV2具有致病性,不仅与近年来在世界各国普遍发生的断奶仔猪多系统衰竭综合征（Postwea...
- 刘金朋
- 关键词：猪圆环病毒DNA疫苗ORF2基因
- 文献传递
- 一种鸡传染性喉气管炎双价核酸疫苗及其制备方法
- 本发明公开了一种鸡传染性喉气管炎双价核酸疫苗，在真核表达载体pIRES的2个多克隆位点中分别插入了ILTV HN1株gB和ChIL-18完整基因，所述双价核酸疫苗共表达鸡传染性喉气管炎病毒gB基因和鸡IL-18基因。本发...
- 陈红英崔保安魏战勇邵攀峰刘金朋王淑娟朱前磊王子馨钞安军
- 文献传递
- 猪圆环病毒2型ORF2基因真核表达载体的构建
- 根据猪圆环病毒2型ORF2基因基因序列设计并合成1对特异性引物,以含猪圆环病毒2型ORF2基因的重组质粒pGEM-ORF2为模板进行PCR扩增,回收的PCR产物和载体质粒pIRES分别用XhoI和MluI做双酶切,然后将...
- 王子馨陈红英崔保安刘金朋王淑娟朱前磊王亚丹
- 关键词：猪圆环病毒2型ORF2基因真核表达载体
- 文献传递
- 一起育肥猪脑炎型链球菌病的诊断与防制被引量：2
- 2009年
- 2008年2月,河南省荥阳市某猪场育肥猪发生一起疑似猪脑炎型链球菌病感染的病例。无菌采集病猪肝脏、脾脏、肾脏和脑组织,分离到链球菌,并进行了生化鉴定。实验室检查结果结合流行病学调查、临床症状和剖检变化,初步诊断为链球菌病,经药敏试验筛选药物治疗结合综合防制,迅速控制了病情。
- 陈红英李新生邵攀峰刘金朋
- 关键词：脑炎型链球菌病防制
