吴莉英
- 作品数：5 被引量：13H指数：2
- 供职机构：华中科技大学同济医学院更多>>
- 发文基金：湖北省自然科学基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- Livin基因短发夹状RNA对子宫颈癌Siha细胞增殖迁移的影响被引量：7
- 2012年
- Livin基因作为近年来发现的一种人类凋亡抑制蛋白（inhibitorofapoptosisprotein，IAP），低表达于健康成人组织和胚胎组织中，而高表达于包括黑色素瘤、淋巴瘤、结肠癌、前列腺癌、宫颈癌、乳腺癌等^[1-3]多种类型的肿瘤组织中。
- 于利利吴莉英蔡晶黄在菊王泽华
- 关键词：LIVIN基因短发夹状RNASIHA迁移胚胎组织
- Livin基因为靶向的RNA干扰技术对宫颈癌SiHa细胞的化疗增敏作用被引量：4
- 2012年
- 目的:研究凋亡抑制基因Livin为靶向的RNA干扰技术(RNAi)对增加人宫颈癌细胞系SiHa化疗敏感性的作用及价值。方法:用已经构建好的针对Livin基因的短发夹RNA真核表达载体(shLivin),转染宫颈癌SiHa细胞,分为空白对照组(SiHa组)、SiHa-shLivin组和转染空载体的SiHa-shVector组。选用顺铂、紫杉醇、多柔比星作为化疗药物,采用四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测加药后3组细胞的增殖情况,得出半数抑制浓度(IC50)值,用流式细胞术检测3组细胞在shLivinIC50的凋亡率进行比较。结果:shLivin重组质粒稳定转染SiHa细胞后,SiHa-shLivin组对顺铂、紫杉醇、多柔比星的IC50值明显低于SiHa组和SiHa-shVector组,差异有高度统计学意义(P<0.001),SiHa组与SiHa-shVector组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。用shLivinIC50药物浓度处理细胞,SiHa-shLivin组凋亡率明显高于SiHa-shVector组和SiHa组,差异有高度统计学意义(P<0.001),Si-Ha组与SiHa-shVector组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论:以Livin基因为靶向的RNA干扰技术可增加化疗药物的敏感性,作为宫颈癌细胞化疗增敏的分子靶点,其基因沉默有望成为宫颈癌基因治疗新手段。
- 吴莉英于利利蔡晶黄在菊王泽华
- 关键词：LIVIN基因沉默宫颈癌化疗
- EZH2 shRNA真核表达载体的构建及其在卵巢癌A2780细胞系的稳定表达被引量：1
- 2010年
- 目的采用基因工程技术,构建EZH2 shRNA的真核表达载体,获得稳定表达干扰质粒的卵巢癌A2780细胞系。方法合成特异性干扰EZH2的shRNA片段并定向克隆插入Supersilencing shRNA质粒表达载体pGPU6/GFP/Neo,获得表达载体pGPU6/GFP/Neo-shEZH2。脂质体介导重组质粒转染A2780细胞,经G418加压筛选获得稳定转染细胞株,Real time RT-PCR和Western blot检测转染后细胞系EZH2的表达。结果测序结果证实重组载体构建成功,稳定转染shEZH2的A2780细胞EZH2的mRNA和蛋白水平下降(90.20±1.66)%和(73.80±5.49)%,P<0.01,差异有统计学意义。结论成功构建EZH2 shRNA表达载体,获得EZH2基因稳定沉默的A2780细胞系,为进一步研究以EZH2为靶点的卵巢癌治疗奠定实验基础。
- 胡沙于利利李智敏韩方吴莉英黄在菊王泽华
- 关键词：EZH2卵巢癌RNA干扰
- 抑制卵巢癌A2780/Taxol细胞hsa-miR-27a表达对紫杉醇敏感性影响的研究被引量：1
- 2010年
- 目的:研究抑制卵巢癌A2780/Taxol细胞hsa-miR-27a表达对紫杉醇敏感性的影响。方法:用浓度递增法建立卵巢癌耐紫杉醇细胞系A2780/Taxol;Stem-loop real-time PCR技术检测A2780/Taxol及亲本细胞A2780中hsa-miR-27a表达水平;利用脂质体Lipofectamine2000将化学合成的miR-27a抑制物及阴性对照(Negative Control,NC)转染A2780/Taxol细胞;分别用Real-time PCR和蛋白印迹法技术检测MDR1mRNA和P-glyco-protein(P-gp)蛋白表达;MTT检测A2780/Taxol对紫杉醇敏感性的变化;流式细胞术检测细胞内P-gp荧光底物罗丹明123(Rh-123)的荧光强度。结果:(1)成功建立了卵巢癌耐紫杉醇细胞系A2780/Taxol;(2)miR-27a在A2780/Taxol细胞中高表达,与A2780细胞相比,表达增高2.2倍。(3)P-gp蛋白在A2780/Taxol细胞中高表达,在A2780细胞中未检测出其表达;(4)转染miR-27a抑制物后,A2780/Taxol细胞的MDR1mRNA和P-gp表达下降,与转染NC组相比,P-gp表达降低36%;对紫杉醇的敏感性增加,IC50为0.53μmol/L,与转染NC组IC506.8μmol/L相比,有明显差异;(5)流式细胞仪结果显示,细胞内Rh-123荧光强度在转染抑制物的A2780/Taxol细胞为5.10±0.35,与A2780/Taxol细胞的2.95±0.39和转染NC的A2780/Taxol细胞的3.30±0.45相比,差异均有统计学意义。结论:hsa-miR-27a在卵巢癌耐紫杉醇A2780/Taxol细胞中高表达,可能通过间接调节P-gp的表达和功能,参与耐药。抑制miR-27a表达后,可以增加A2780/Taxol细胞对紫杉醇的敏感性,部分逆转耐药。
- 李智敏王静胡沙吴莉英蔡晶于利利王泽华
- 关键词：细胞株P-糖蛋白药物耐受多药耐药相关蛋白紫杉醇
- Livin shRNA对宫颈癌siha细胞增殖迁移的影响及化疗增敏作用
- 本研究分为两部分。
第一部分，目的：研究Livin shRNA对人宫颈癌细胞系siha细胞增殖、迁移的影响。
方法：
1、 脂质体法将靶向沉默Livin基因短发夹状RNA（shRNA）的真核表达载体转染...
- 吴莉英
- 关键词：LIVIN基因宫颈癌
