唐东红 作品数:109 被引量:143 H指数:6 供职机构: 中国医学科学院北京协和医学院医学生物学研究所 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 国家科技重大专项 云南省自然科学基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 农业科学 更多>>
猕猴不同组织器官中黄嘌呤脱氢酶/氧化酶基因的mRNA表达的半定量RT-PCR检测方法的建立 被引量:1 2015年 目的建立半定量RT-PCR检测方法检测猕猴体内肝脏组织、上皮组织、睾丸组织、心肌组织,肾脏组织中黄嘌呤氧化脱氢酶(XDH/XO)的mRNA的表达。方法分别提取健康猕猴新鲜肝脏组织、上皮组织、睾丸组织、心肌组织,肾脏组织中总RNA,用RT-PCR二步法进行XDH/XO基因片段扩增,内参基因选用管家基因GAPDH,对获得的目的片段进行序列测定以鉴定其特异性,在凝胶影像分析仪Quantity one软件得出其电泳条带的灰度值(IOD),计算目的基因与内参基因比值得到猕猴不同组织XDH/XO的mRNA的相对表达量。结果建立了半定量RT-PCR检测方法,猕猴不同组织XDH/XO的mRNA表达在肝脏组织中表达水平最高,其次为心肌,肾脏,睾丸,皮肤。结论本研究所建立的半定量RT-PCR检测方法可应用于检测猕猴各组织器官组中的XDH/XO的mRNA的表达差异。 李哲丽 叶尤松 彭波 李桂珍 李润萍 杨光蕊 唐东红关键词:猕猴 不同年龄段雌性Wistar大鼠不同骨骼区域骨密度值的测定与比较 目的 提供不同年龄段雌性Wistar大鼠不同骨骼区域骨密度参考值.方法 选取30只SPF级雌性Wistar大鼠,分别在6月龄、10月龄、12月龄、24月龄和30月龄时,采用双能X线骨密度仪依次测量大鼠头部、上肢、大腿、躯... 叶尤松 王陈芸 李哲丽 马开利 唐东红关键词:WISTAR大鼠 骨密度 非人灵长类动物临床症状与疾病初步诊断的探讨 2010年 临床症状是诊断疾病的基础资料,可以作为疾病诊断的出发点和重要根据。在兽医临床中,由于非人灵长类动物不能用语言表达自身感觉,需要根据客观的临床症状观察来发现。所以兽医给动物诊断疾病,必须熟练掌握其各种常见临床症状与疾病的关系,以便根据症状的提示对疾病做出初步诊断。本文根据多年从事非人灵长类动物兽医临床工作的实践经验,从循环、呼吸、消化、泌尿、生殖、神经、造血、肌肉、骨骼、皮肤、代谢及中毒等方面,总结了非人灵长类实验动物常见的临床症状和相应疾病初步诊断的联系。 匡德宣 唐东红 叶尤松 江勤芳 李春花 代解杰关键词:非人灵长类 临床症状 疾病诊断 RT-qPCR检测猕猴肝脏嘌呤核苷磷酸酶PNP基因转录水平的引物、试剂盒及方法 本发明涉及RT‑qPCR检测猕猴肝脏嘌呤核苷磷酸酶PNP基因转录水平的引物、试剂盒及方法,属于分子生物技术领域。本发明方法以猕猴新鲜肝脏组织提取的总RNA逆转录合成得到的cDNA为模板,利用PCR引物组合进行实时荧光定量... 唐东红 王陈芸 叶尤松 李哲丽 马开利 鲁帅尧 易红昆 黄璋琼文献传递 全身性过表达人源α-Syn-NLS转基因鼠的构建方法 本发明公开一种全身性过表达人源α‑Syn‑NLS转基因鼠的构建方法,本发明方法首先通过PCR方法获取人源α‑Syn编码序列和SV40核易位信号序列,再通过BP反应构建含有目的序列的入门克隆载体,酶切后,通过LR反应将入门... 黄璋琼 唐东红 叶尤松 马开利 李哲丽 龙维虎 王陈芸 韦梦晨 李国祥 吴正存 胡鹏一种过表达SNCA的腺相关病毒载体AAV-SNCA、制备方法及其应用 本发明公开一种过表达SNCA的腺相关病毒载体AAV‑SNCA、制备方法及其应用,属于生物技术和医药领域,其技术方案包括构建过表达SNCA的腺相关病毒载体AAV‑SNCA和高滴度的AAV‑SNCA病毒滴度包装制备,将过表达... 马开利 吴正存 黄璋琼 唐东红 高家红 易红昆文献传递 浅谈兽医在非人灵长类动物实验福利中的作用 被引量:4 2007年 非人灵长类实验动物作为人类的“替身”,在生理学、病理学、病毒学、药物动力学、毒理学、生殖生理学、免疫学、遗传学、基因工程药和生物医药等科学研究领域具有无可替代的重要作用。因此,在其实验过程中的动物福利问题应当引起人们的足够重视。本文根据工作实践和动物福利的要求,从疾病的监视、诊断、治疗、预防、实验操作技术、猴类捕捉、保定、镇静、止痛、麻醉和安乐死术等方面,总结了兽医及其护理在灵长类实验动物福利中的作用。 匡德宣 叶尤松 唐东红 代解杰关键词:兽医 非人灵长类 动物福利 一株猴泡沫病毒野毒Pol基因的cDNA的直接测序 被引量:2 2000年 本研究对一株来源于医学灵长类中心 (CentreforMedicalPrimates)大笼饲养的恒河猴的原代猴肾细胞 (RhesusMonkeykidney ,RMK) ,377细胞株 ,经细胞培养三周后 ,具有典型泡沫样病变 ,即CPE( + )的细胞 ,进行Pol基因 ( 5898- 6362 )的cDNA的Nested -PCR扩增 ,对产物位置 5898- 6343区域进行直接测序。结果证明 :该株细胞所带的SFV与GENEBANK中的SFV - 1在该区域有 48个核苷酸存在差异 ( 1 0 .78% ) ,与SFVmac在该区域有 45个核苷酸存在差异 ( 1 0 .1 1 % )。VspⅠ酶切实验结果与之吻合 ,显示出该前病毒株的PCR产物与SFV - 1在该片段的第 69核苷酸有变异 ,碱基由T→A。 唐东红 江勤芳 匡德宣 代解杰关键词:直接测序 灵长类 碱基 PCR产物 利用恒河婴猴模型对肠道病毒71型传播感染特征的生物学分析 被引量:4 2011年 本文在前期工作基础上,进一步对肠道病毒71型(EV71)从恒河婴猴的感染个体向其他未感染个体传播的可能性及相关生物学特性做了初步分析。通过喷雾形式经呼吸道感染1~2月龄恒河婴猴(A组);在观察临床症状同时,于感染后第7天,取该组动物粪便处理后,将上清液以喷雾形式经呼吸道感染新的婴猴个体(B组),随后对该次代感染个体进行同样临床观察;并对哺乳B组婴猴的母猴(C组)也进行全面观察和分析。同时,将A组动物粪便处理后的上清液经血液感染的婴猴作为对照。分析临床症状,血液、粪便及咽拭子病毒载量,中和抗体效价,组织病理学改变。结果提示,恒河婴猴作为EV71感染动物模型,能反映病毒在个体间传播的基本生物学特征。依据实验结果,可以初步推断,EV71在易感人群中的主要传播途径是呼吸道;同时,病毒也可从低龄个体向成年个体传播。这些资料为进一步探讨EV71在儿童群体中的发病规律提供了一定的理论依据。 王晶晶 李薇 赵红玲 刘龙丁 唐东红 杨丽仙 董承红 纳锐雄 王丽春 张莹 梁燕 廖芸 李琦涵关键词:肠道病毒71型 恒河猴 动物模型 建立检测猕猴三磷酸腺苷结合盒转运蛋白G2的mRNA相对表达水平的RT-qPCR方法 2024年 目的本研究旨在建立一种实时荧光定量PCR方法,用于检测猕猴三磷酸腺苷结合盒转运蛋白G2(adenosine triphosphate-binding cassette transporter protein G2,ABCG2)mRNA的基因转录水平。方法使用NCBI上GenBank数据库猕猴(Macaca mulatta)的ABCG2核苷酸序列号NM_001032919.1及内参GAPDH核苷酸序列号NM_001195426.1,借助Primer premier 5.0软件设计PCR引物。提取猕猴新鲜肾组织的总RNA,并反转录合成cDNA。接着,利用PCR引物进行实时荧光定量PCR扩增,并根据反应体系中荧光的变化情况定量分析ABCG2的mRNA相对表达水平。结果PCR产物测序结果显示,扩增的ABCG2和GAPDH核苷酸序列与NCBI上猕猴的序列同源性分别为90.91%和91.14%。ABCG2和GAPDH的扩增效率均达到80%~120%,实时荧光定量PCR标准曲线的熔解曲线为单峰,R2接近1。结论本研究建立的检测猕猴ABCG2 mRNA实时荧光定量检测方法,为研究高尿酸血症的发病机制以及新药开发奠定基础。 林小瑞 张铭润 王陈芸 周玮 叶尤松 龙维虎 李哲丽 唐东红关键词:猕猴 实时荧光定量PCR