廖翔
- 作品数：22 被引量：123H指数：5
- 供职机构：内蒙古农业大学兽医学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 考马斯亮蓝染色双向电泳凝胶胶内酶切方法的改进被引量：33
- 2003年
- 介绍一种简便高效的从考马斯亮蓝染色的双向电泳凝胶切取蛋白质点,通过胶内酶切制备基质辅助激光解吸 电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)样品的方法。该方法操作简便,样品的质谱鉴定结果经网上数据库检索检出率 可高达80％以上,适于我国目前小规模蛋白质组学研究的国情,便于推广应用。
- 廖翔应天翼王恒樑王杰魏开华黄留玉黄培堂
- 关键词：双向电泳考马斯亮蓝基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱
- 双向BN/SDS-PAGE分离鉴定痢疾杆菌福氏5型M90T株毒力相关膜蛋白复合物被引量：5
- 2011年
- 通过蓝色非变性凝胶电泳(BN-PAGE)比较痢疾杆菌福氏5型野生株M90T和大质粒缺失株M90TΔT的膜蛋白复合物,发现一个野生株特有的复合物,其分子量约为290 kD,命名为M90T-290。通过第二向SDS-PAGE分离M90T-290得到6个蛋白亚基,质谱鉴定为:一个由大质粒编码的毒力蛋白Apyrase(ATP-二磷酸水解酶)和5个染色体编码的蛋白,这些蛋白可能以膜复合物的形式影响毒力蛋白IcsA的单极性分布和痢疾杆菌在细胞间的扩散。这个新发现的毒力相关膜复合物在痢疾杆菌的致病过程中可能发挥重要作用。
- 龚益熊廖翔朱力吴兰周晓巍梁龙黄培堂
- 关键词：痢疾杆菌膜蛋白复合物毒力
- 福氏志贺杆菌2a 2457T免疫蛋白质组学方法的建立被引量：4
- 2005年
- 目的:建立福氏志贺杆菌2a2457T的免疫蛋白质组学研究方法.方法:提取福氏志贺杆菌2a2457T全菌蛋白进行不同pH梯度的双向电泳,结合westernBlotting技术寻找发生免疫反应的蛋白质.结果:蛋白经胶内酶切后使用基质辅助激光解析/电离飞行时间(MALDI-TOF)质谱鉴定了19个免疫反应蛋白点,对应于10种蛋白质.结论:该文成功建立了福氏志贺杆菌2a2457T的免疫蛋白质组学研究方法。
- 应天翼廖翔冯尔玲王恒樑黄留玉黄翠芬
- 关键词：BLOTTINGWESTERN保护性抗原双向电泳质谱鉴定飞行时间
- 表达CtxB的非抗生素标记载体的构建
- 2001年
- 目的构建用于表达CtxB的非抗生素基因作为选择标记的载体。方法用PCR从质粒pMT999中,扩增获得2.9kb的汞抗性基因与pBR322的复制起始区ori相连得到重组质粒pBRH02。然后将含有β-内酰胺酶启动子的CtxB基因插入pBRH02中,构建表达质粒pBRC09。结果pBRC09经转化大肠杆菌、痢疾杆菌,用GM1-ELISA均检测到CtxB在上述菌株中的有效表达。结论利用汞抗性基因和pBR322的复制起始区,成功地构建成以非抗生素为选择标记的表达CtxB的重组质粒。
- 王恒樑冯尔玲刘梅廖翔史兆兴姚潇黄留玉苏国富
- 关键词：霍乱毒素
- 痢疾菌体内诱导基因表达文库的构建被引量：1
- 2001年
- 目的构建筛选痢疾菌福氏2a体内诱导基因的融合基因表达文库。方法以自杀载体pGP704为骨架,用氯霉素乙酰转移酶基因作为报告基因,构建了用于筛选体内诱导基因的载体pGP-cat。把痢疾菌福氏2a基因组DNA的随机酶切片段0.6-1kb亚克隆到pGPcat载体报告基因上游的BglⅡ位点,构建了融合基因文库。结果与痢疾菌福氏2a2457T结合转移后,获得融合基因表达文库。以氯霉素为选择标记,经过体外初步筛选,得到3.2%的具有氯霉素抗性的菌株。结论构建的融合基因表达文库适用于筛选福氏2a痢疾菌的体内诱导基因。
- 史兆兴王恒樑冯尔玲姚潇廖翔黄留玉苏国富黄翠芬
- 驱除痢疾杆菌侵袭大质粒的新方法被引量：4
- 2003年
- 用质粒不相容性原理驱除痢疾杆菌福氏 2a 2 4 5 7T和宋内S7的侵袭大质粒 ,先从福氏2a侵袭大质粒分别扩增ori和inc基因 ,将它们克隆至 pMD18 T载体 ,得重组质粒pMDori和 pMDinc ,然后转化 2 4 5 7T和S7,不管是pMDori还是 pMDinc都能竞争驱除痢疾杆菌福氏 2a 2 4 5
- 冯尔玲廖翔王恒樑史兆兴苏国富黄留玉
- 关键词：痢疾杆菌
- 福氏志贺菌5a型M90T株GAPDH蛋白多克隆抗体的制备和鉴定被引量：6
- 2014年
- 目的制备高效的福氏志贺菌5a M90T3-磷酸甘油醛脱氢酶(GAPDH)的多克隆抗体,并对其特异性进行评价。方法提取M90T的全基因组,采用PCR法扩增M90T中的基因gapA克隆到原核表达载体pET-24中,重组质粒转入到大肠杆菌BL21(DE3)中进行诱导表达,条件优化后纯化GAPDH-His融合蛋白。以纯化的融合蛋白作为抗原免疫BALB/c小鼠,制备该蛋白的多克隆抗体。Western blot法、ELISA鉴定获得的抗血清。结果成功构建了原核表达载体pET24a-gapA,通过一系列诱导条件的优化,确定可溶性条件为30℃、1 mmol/L IPTG诱导2 h。用纯化的融合蛋白GAPDH-His作为抗原免疫小鼠制备多克隆抗体,Western blot法、ELISA证明多克隆抗体制备成功。结论成功制备了福氏志贺菌5a M90T特异性的小鼠多克隆抗体。
- 王羽廖翔岳俊杰周围梁龙呼和巴特尔
- 关键词：3-磷酸甘油醛脱氢酶多克隆抗体
- 蛋白质组学研究中的双向电泳技术被引量：45
- 2003年
- 蛋白质组学研究已经成为后基因组时代的研究热点,其两大支柱是双向凝胶电泳技术和生物质谱技术。尽管双向电泳技术近几年已经取得了突破性进展,是当前蛋白质分离的最常用技术,但其本身还有一些难以克服的问题。随着质谱技术的快速发展,双向电泳逐渐成为蛋白质组学研究的瓶颈。本文综述双向电泳主要技术步骤的现状、存在问题及其改进方向。
- 廖翔应天翼黄留玉黄培堂
- 关键词：蛋白质组学双向电泳生物质谱技术生物信息学
- 霍乱毒素突变体和福氏2a asd基因缺失突变体的构建
- 1999年
- 廖翔王恒梁冯尔玲苏国富
- 关键词：缺失突变体霍乱毒素福氏2A痢疾疫苗同源重组染色体
- 弗氏志贺菌M90T株毒力相关膜蛋白复合物组成基因缺失突变体的构建被引量：1
- 2012年
- 目的:构建弗氏志贺菌M90T株毒力相关膜蛋白复合物组成蛋白基因的缺失突变株。方法:分别扩增目的基因的上、下游同源臂和卡那霉素抗性基因片段,利用重叠延伸PCR技术将这3个片段融合为打靶片段,电击转化M90T/pKD46感受态细胞,在λRed重组系统的作用下,通过同源重组将目的基因置换为卡那霉素抗性基因,之后在辅助质粒pCP20的作用下切除FRT位点之间的卡那霉素抗性基因,得到基因缺失突变体。结果与结论:分别构建了M90T株毒力相关膜蛋白复合物4个组成蛋白Apy、DnaK、ClpB、YdgA的基因缺失突变体,为进一步研究各基因的功能提供了突变体。
- 冉金宝廖翔周围王羽魏波高原岳俊杰梁龙王纯洁
- 关键词：膜蛋白复合物缺失突变株重叠延伸PCR
