张云云
- 作品数:8 被引量:12H指数:2
- 供职机构:宁波大学海洋学院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金宁波市科技局资助项目国家公益性行业科研专项更多>>
- 相关领域:轻工技术与工程生物学更多>>
- 可口革囊星虫(Phascolosoma esculenta)酵母双杂交文库和铁结合蛋白真核表达载体的构建被引量:1
- 2013年
- 构建了可口革囊星虫(Phascolosoma esculenta)的酵母双杂文库,总克隆数为6.09×106CFU,重组率100%,平均插入片段长度>1kb。随机挑取200个克隆子测序,结果 1个空载,67个无法对应的基因类型,已知的132个基因中线粒体蛋白占29.54%,蚯蚓血红蛋白15.9%,核糖体蛋白10.6%,铁结合蛋白8.3%,肌动蛋白6.1%,其它基因29.56%。这些基因分别为:5-氨基乙酰丙酸合成酶、类博莱霉素水解酶、纤溶蛋白、谷氨酰胺合成酶、热休克蛋白、非特性类碱性磷酸酶、脂肪酶、金属蛋白、线粒体、硫氧还蛋白、蛋白磷酸酶、肌钙蛋白C、泛素。根据已获得的可口革囊星虫铁结合蛋白基因,以EcoRⅠ和KpnⅠ为双酶切位点设计引物,构建了可口革囊星虫铁结合蛋白真核表达载体pPink-HC-fer,经PCR及测序检验,序列完全正确,然后电转化至酵母细胞中诱导表达,经SDS-PAGE检验其融合蛋白分子量大小约为23kDa。
- 张云云周君李晔张春丹蔡江佳陈丽萍李太武苏秀榕
- 关键词:可口革囊星虫铁结合蛋白真核表达
- 一种尺寸可控的金属钯纳米线的制备方法
- 本发明涉及到一种尺寸可控的金属钯纳米线的制备方法,其特征在于包括下述步骤:①氧化钯纳米颗粒的制备:根据需要配制成一定浓度的氯化钯溶液并水解;②蛋白纤维的制备:将胰岛素溶液滴加到云母片上;③氧化钯纳米线的合成:将氧化钯纳米...
- 徐鹏魏余辉王新亚张云云周星飞
- 文献传递
- DSC测定虾青素的氧化稳定性及体外抗氧化研究被引量:1
- 2014年
- 用DSC(差示扫描热量法)分析了虾青素的最适储藏温度和氧化稳定性,并且用红外光谱仪检测了虾青素热处理前后结构的变化,然后通过体内细胞检测了人体对虾青素的最大耐受量以及体外抗氧化比较了不同方法得到的精油清除DPPH的能力,结论:虾青素的最适宜贮藏温度为-25℃左右,贮存条件应为低温、避光,防止与空气接触。同时通过DSC检测精油中虾青素的氧化诱导期实验发现:当精油置于25℃空气中,氧化诱导期为8.5d,当温度为4℃,氧化诱导期为29.89d,当温度为-4℃,氧化诱导期为48.3d。红外光谱分析虾青素热氧化前后结构的变化发现:氧化之后共轭双键、芳香环上C=C,及芳香环上的的C=O、O-H、六元环仲醇C—O键发生变化。虾青素在人体的最大耐受量5×10^-6mol/L,超临界(Scf),微波萃取(Mae),索式抽提(Sox)方法得到的精油清除DPPH能力Mae〉Sef〉Sox。
- 季晓敏王亚男蔡江佳张云云姜春芳苏秀榕
- 关键词:虾青素氧化诱导期抗氧化
- 纽虫重组铁结合蛋白及制备方法
- 本发明公开了纽虫重组铁结合蛋白及制备方法,该纽虫重组铁结合蛋白的氨基酸序列如序列表SEQIDNO.1所示;该纽虫重组铁结合蛋白是从纽虫体壁中,通过RNA提取,cDNA合成,对cDNA的载体扩大培育得到阳性克隆质粒,阳性克...
- 苏秀榕周君李晔张春丹李成华刘艳李振张云云
- 文献传递
- 星虫重组铁结合蛋白及制备方法
- 本发明公开了星虫重组铁结合蛋白及制备方法,该星虫重组铁结合蛋白的氨基酸序列如序列表SEQIDNO.1所示;该星虫重组铁结合蛋白是从星虫体壁中,通过RNA提取,再合成为cDNA,对cDNA的载体扩大培育得到阳性克隆质粒,阳...
- 苏秀榕周君李晔张春丹李成华刘艳张云云
- 文献传递
- 鱿鱼皮胶原蛋白对H_2O_2诱导MC3T3-E1损伤的修复作用被引量:4
- 2015年
- 目的:探究秘鲁鱿鱼皮胶原蛋白增强MC3T3-E1细胞抗自由基损伤的作用机制。方法:将培养的MC3T3-E1细胞分为正常对照组、H2O2损伤组和胶原蛋白干预组;利用MTT法确定H2O2的半数抑制浓度,建立自由基损伤的细胞模型,通过试剂盒测定SOD活性和MDA含量来确定最佳的胶原蛋白添加量;在倒置显微镜下观察各分组的细胞形态;用流氏细胞仪检测细胞凋亡率,并分析细胞增殖周期;实时荧光定量RT-PCR测定HSP70和Bax的表达水平。结果 :与H2O2损伤组相比,胶原蛋白干预组SOD活性升高(P<0.05),MDA含量降低(P<0.05),凋亡率降低(P<0.05),G0-G1期细胞百分率减小(P<0.05),S期细胞百分率增大(P<0.05),Bax表达减弱,HSP70表达增强(P<0.05)。结论:摄入一定剂量的H2O2会导致MC3T3-E1成骨细胞的氧化损伤并促进其凋亡,而胶原蛋白可以改善此类损伤对MC3T3-E1细胞的影响。
- 蔡江佳李晔张云云童茜茜王峰苏秀榕
- 关键词:胶原蛋白H2O2MC3T3-E1抗氧化
- 可口革囊星虫(Phascolosoma esculenta)重组铁蛋白富集Pb^(2+)等重金属特性和功能研究被引量:6
- 2015年
- 利用可口革囊星虫重组铁蛋白富集Pb^(2+)、Fe^(3+)、Cd^(2+)、Cr^(3+)、Cu^(2+)、Mn^(2+)、Sn^(2+)和Zn^(2+)等8种重金属离子后,通过透射显微镜和傅里叶红外光谱测定蛋白的超微结构变化和内部基团特性。以天然的马脾铁蛋白为对照,观察重组铁蛋白与天然铁蛋白的差别。结果显示,重组铁蛋白富集Pb2+和其它7种重金属离子后蛋白体积大小与重金属离子种类直接相关。重组铁蛋白相对天然铁蛋白来说在富集不同种类重金属离子后,除了非特异性酰胺特征峰和蛋白特征峰外,还出现一些专门富集某些重金属离子的特异基团,如:-CH_3、-CH_2-、-CH-、-NH-、-SO_3-、-COOH、-S=S-和-C-S-C等。通过细胞实验进一步验证了铁结合蛋白能够通过富集重金属离子Pb2+来保护小鼠成骨前体细胞MRC3T3-E1,使细胞的死亡率明显降低(P<0.05)。
- 初双双张云云苏倡王颖陈丽萍周君张迪骏司开学苏秀榕
- 关键词:可口革囊星虫超微结构
- 鱿鱼皮胶原蛋白水解肽对镉抑制MC3T3-E1增殖、分化及钙化的影响
- 2015年
- 目的:探究秘鲁鱿鱼皮胶原蛋白水解肽增强MC3T3-E1细胞抗骨质疏松的作用。方法:将培养的MC3T3-E1细胞分为正常对照组、氯化镉损伤组和胶原蛋白水解肽干预组;利用MTT法确定氯化镉的半数抑制浓度,建立细胞损伤模型;根据各组细胞增殖率差异,确定最佳胶原蛋白水解肽的添加量;通过细胞周期、凋亡,碱性磷酸酶活性的测定及Alizarin red染色法分析胶原蛋白水解肽在细胞增殖、分化、钙化阶段拮抗氯化镉的抑制作用。结果:与氯化镉损伤组相比,胶原蛋白水解肽干预组细胞活性升高(P<0.01);处于G1期的细胞数量减小(P<0.05),S期细胞数量增大(P<0.05);凋亡率降低(P<0.05);9,12,15 d时AKP活性升高(P<0.05,P<0.01,P<0.01)。结论 :摄入一定剂量的氯化镉会抑制MC3T3-E1成骨细胞增殖、分化和钙化。胶原蛋白水解肽在一定程度上可改善此类损伤对MC3T3-E1细胞的影响。
- 蔡江佳李晔全晶晶蔺佳良张云云王峰苏秀榕
- 关键词:氯化镉MC3T3-E1抗骨质疏松