张健锋
- 作品数：60 被引量：105H指数：5
- 供职机构：南通大学附属医院更多>>
- 发文基金：南通市科技局社会发展科技计划项目中国博士后科学基金江苏省社会发展科技计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 胃癌患者外周血中鸟苷酸环化酶C信使RNA的表达及其临床意义被引量：4
- 2012年
- 目的探讨胃癌患者外周血中鸟苷酸环化酶C信使RNA（GC-CmRNA）的表达及其与外周血微转移及病情判断的关系。方法实时荧光定量PCR（RFQ-PCR）检测2009年11月至2010年8月在南通大学附属医院住院的60例胃癌患者和门诊21例异型增生、15例肠上皮化生患者及20名健康体检者外周血中GC．CmRNA的表达，同时检测在这60例胃癌患者手术切除胃癌组织中GC-CmRNA的表达。对数据进行Wilcoxon秩和检验、x。检验或Fisher确切概率法分析，外周血和胃癌组织中GC-CmRNA表达的相关性分析采用Spearman秩相关分析。结果在健康体检者外周血中未检测到GC-CmRNA表达，肠上皮化生和异型增生患者外周血中分别检测到2例和3例阳性，胃癌患者外周血中检测到GC-CmRNA高表达，其表达阳性率为48．3％（29／60），与健康体检者（0）、肠上皮化生（9．5％，2／21）和异型增生（20．0％，3／15）比较，差异均有统计学意义（均P〈0．05），且其表达与Lauren分型、临床分期、分化程度、浸润深度和淋巴结转移等因素均有关（均P〈0．05）。相关性分析显示外周血和胃癌组织中GC-CmRNA的表达呈正相关（r=0．4009，P=0．0015）。结论胃癌患者外周血中存在GC-CmRNA表达，且其表达与患者病情进展有关，有望成为胃癌预后判断新的标志物。
- 张健锋薛世民张弘孟海朱惠君毛振彪
- 关键词：胃肿瘤鸟苷酸环化酶
- CDX2和SOX4在胃癌组织中的表达及临床意义被引量：4
- 2019年
- 目的:探讨尾型同源盒转录因子2(caudal type homeobox transcription factor 2, CDX2)和Y 染色体上的性别决定区相关高迁移率族盒蛋白4(sex-dertermining region of Y chromosome related high mobility group box 4, SOX4)在胃癌组织中的表达及其临床意义。方法:采用Western Blot法检测CDX2 蛋白和SOX4 蛋白在50 例胃癌及其远癌胃组织中的表达,分析两者与胃癌临床病理特征之间的关系,Pearson 相关系数分析CDX2 蛋白、SOX4 蛋白在胃癌组织中表达的相关性;免疫荧光法检测蛋白细胞内定位。结果:免疫荧光通过镜下观察,CDX2 阳性信号在胃癌组织中主要位于细胞核,SOX4 阳性信号也见于细胞核。Western Blot 结果提示,CDX2 蛋白、SOX4 蛋白在胃癌组织中高表达,在远癌胃组织中低表达(P<0.05)。CDX2 蛋白表达与胃癌浸润深度、胃癌的TNM 分期、有无淋巴转移有关(均P<0. 05),与肿瘤分化程度、肿块大小、年龄和性别等无关(P>0.05)。SOX4 蛋白表达与胃癌有无淋巴转移和TMN分期有关(P<0. 05),与肿瘤分化程度、浸润深度、肿块大小、年龄和性别等无关(P>0.05)。Pearson 相关性分析提示在胃癌组织中CDX2 和SOX4 蛋白表达呈负相关(r=-0.476, P<0.05)。结论:CDX2 低表达和SOX4 高表达与胃癌病情进展有关,CDX2 和SOX4 在胃癌组织中表达呈负相关。联合检测CDX2和SOX4 的表达可作为反映胃癌临床病理学特点新的分子病理标志物。
- 张健锋胡学群丁伟峰张曙毛振彪
- 关键词：胃癌临床病理特征
- 重组戊型肝炎病毒抗原ELISA检测方法的建立被引量：4
- 2011年
- 目的建立重组戊型肝炎病毒(Hepatitis E virus,HEV)抗原双抗体夹心ELISA定量检测方法,用于HE疫苗中HEV抗原含量的检测。方法以重组HEV病毒样颗粒作为免疫原,免疫母鸡,制备抗HEV-IgY多克隆抗体,纯化后作为包被抗体,HRP标记的抗HEV单克隆抗体作为检测抗体,建立HEV抗原双抗体夹心ELISA定量检测方法,并对其进行验证。用建立的方法检测3批HE疫苗成品的HEV抗原含量,计算HEV抗原对氢氧化铝的吸附率。结果建立的ELISA方法线性范围为2～128 ng/ml,最低定量限为2 ng/ml;该方法检测冻干甲肝减毒活疫苗、重组人白介素-2(IL-2)、乙型肝炎表面抗原(HBsAg)、人血白蛋白、小牛血清及健康人血清均无交叉反应;该方法检测3个浓度的HEV抗原内部参考品的回收率在95.13%～104.50%之间,试验内及试验间变异系数均<15%;包被抗HEV-IgY的酶标板于37℃放置5 d,其检测HEV抗原内部参考品的A450值及敏感性均未发生显著变化;3批HE疫苗成品中HEV抗原对氢氧化铝的吸附率均大于95%,符合相关质控要求。结论已成功建立了HEV抗原双抗体夹心ELISA定量检测方法,可用于HEV抗原含量的检测。
- 陈子杨吴业红张健锋常军亮时成波贾媛郭立君李春晖
- 关键词：肝炎病毒戊型病毒样颗粒IGY酶联免疫吸附测定
- 南通市社区人群861例不同年龄段上消化道出血病因构成分析被引量：2
- 2013年
- 目的：分析南通地区社区人群上消化道出血的常见原因，为社区医师早期干预提供依据。方法：回顾南通大学附属医院消化内科近3年来861例社区初发病的上消化道出血患者住院资料，按不同年龄段进行分组，对其进行分析。结果：总体上引起上消化道出血前4位的病因分别为：十二指肠溃疡（duodenal ulcer，DU）348例（40.42%）、食管胃底静脉曲张（esophageal gastric varices，EGV）144例（16.72%）、胃溃疡（gastric ulcer，GU）126例（14.63%）、上消化道肿瘤78例（9.06%）。不同年龄阶段上消化道出血的病因构成不同，≤40岁社区人群以DU和急性胃黏膜病变（acute gastric mucosa lesion，AGML）为主要病因；〉40～60岁以 DU、EGV 和 GU 所致出血为主要病因；〉60岁人群以上消化道肿瘤、GU 和AGML所致出血构成比较前者明显增多。本组社区人群发生上消化道大出血186例，占全部上消化道出血病例21.6%，其中，肝硬化伴EGV出血构成比最高（47.2%），其次为Mallory-Weiss综合征、上消化道肿瘤和复合溃疡分别为30.8%、26.9%和23.4%。结论：南通社区人群发生上消化道出血主要病因构成为DU、EGV、GU和上消化道肿瘤。随着年龄的递增，DU的构成比逐渐下降，而GU和上消化道肿瘤的构成比逐渐上升，且AGML在高龄人群中构成比较高，而EGV在中年人群中构成比较高，后者病情凶险，社区医师需要引起足够的重视。
- 陆新华张健锋俞智华
- 关键词：上消化道出血病因构成比
- 鸟苷酸环化酶C及其内生性配体在人胃癌和癌前病变组织中的表达及临床意义
- 2015年
- 目的 :研究鸟苷酸环化酶C(guanylyl cyclase C,GC-C)和两个配体内生性肽类激素鸟苷素(guanylin,GN)和尿鸟苷素(uroguanylin,UGN)在胃癌、肠上皮化生和异型增生组织中的表达及与胃癌生物学行为之间的关系,并探讨其临床意义。方法:采用实时荧光定量聚合酶链反应法(real-time quantitative polymerase chain reaction,q RT-PCR)检测胃癌(60例)、肠上皮化生(23例)、异型增生(25例)和远癌胃(30例)组织中GC-C、GN和UGN m RNA的表达。进一步对三者与临床病理参数的关系及三者间的相关性进行分析。结果:q RT-PCR显示,GC-C和GN m RNA在肠上皮化生、异型增生及胃癌中高表达,而远癌胃组织中则不表达(均P=0.000 0)。GC-C和GN m RNA在肠型胃癌中的表达高于弥漫型(P=0.000 4和0.000 8),与年龄、性别、病灶大小、临床病理分期、分化程度、淋巴结转移和浸润深度等因素无关(均P>0.05)。在肠上皮化生、异型增生和胃癌组织中GC-C和GN的表达呈正相关(r=0.682 9、0.495 4和0.777 4,P=0.000 3、0.011 8和0.000 0)。而UGN在远癌胃组织、肠上皮化生、异型增生及胃癌组织中都有表达,差异无统计学意义(均P>0.05)。结论:胃黏膜癌变过程中GC-C的异位表达与其内生性配体GN的表达有关,检测两者的变化将有助于胃癌高危人群监测和胃癌早期诊断。
- 蒋伟张健锋张弘朱惠君倪润洲毛振彪
- 关键词：胃癌癌前病变鸟苷酸环化酶C
- 一种铜锌超氧化物歧化酶突变体的原核表达、纯化及酶活性测定
- 2020年
- 目的原核表达、纯化一种铜锌超氧化物歧化酶(Cu,Zn-SOD)突变体,并检测其酶活性。方法将经热力学优化的Cu,Zn-SOD突变体基因亚克隆至pET-28a载体中,构建重组表达质粒SOD1-pET-28a,转化入大肠埃希菌BL21(DE3)中,IPTG诱导表达;在500 mL摇瓶培养条件下,通过改变加入Cu、Zn离子的量优化诱导表达条件;表达的重组蛋白经初步纯化后,测定酶活性。结果重组表达质粒SOD-pET-28a经双酶切及测序证明构建正确;表达的重组蛋白相对分子质量约为15000,主要以可溶性形式表达;工程菌株在500 mL摇瓶培养条件下培养至10 h左右,A600至3.5左右时加入终浓度为0.1 mmol/L IPTG、0.2 mmol/L ZnCl2、0.5 mmol/L CuSO4,可获得最佳表达量(29.2%);初步纯化获得的重组蛋白纯度为97.32%,比活为5.08×103U/mg。结论成功利用大肠埃希菌表达系统表达了一种经热力学优化的Cu,Zn-SOD突变体,初步纯化的突变体具有较好的酶活性,为进一步摸索大规模生产工艺及实际应用奠定了基础。
- 唐剑光张健锋常东英曹玉锋乔宏雷高洪喜迟春萍
- 关键词：铜锌超氧化物歧化酶原核表达层析酶活性
- 全基因组筛选与鉴定泛癌非编码RNA246作为一种新的泛癌抑制非编码RNA
- 2021年
- 目的通过生物信息学与功能研究,探讨新的抑癌非编码RNA(ncRNA)及确定其功能。方法通过对癌症基因组图谱(TCGA)数据库泛癌RNA-seq数据中ncRNA进行全基因组meta分析,筛选出新的下调表达泛癌ncRNA。以细胞增殖、迁移、侵袭、凋亡等体外功能实验确证该ncRNA的泛癌抑制功能。组间比较采用双侧t检验。结果全基因组meta分析发现1615种差异表达ncRNA,其中由ENSG00000231246编码的ncRNA未见报道,我们将其命名为泛癌非编码RNA246(PANC246)。相对于未转染组和转染pcDNA3.1空质粒组,过表达PANC246质粒转染的食管癌、肝癌、胃癌、结直肠癌等癌细胞株,其细胞增殖(t=7.252,P<0.01)、迁移(t=15.073,P<0.01)和侵袭能力(t=11.003,P<0.01)显著降低,而细胞凋亡显著增加(t=23.293,P<0.01)。与未转染组和空质粒组比较,PANC246高表达可显著抑制CDK2(t=19.301,P<0.01)、KRAS(t=14.682,P<0.01)、MUC16(t=22.581,P<0.01)等原癌基因mRNA表达。结论PANC246是一种新的泛癌抑制ncRNA,有望作为广谱抗癌治疗的新靶点。
- 常仁安曹桂莲张健锋叶敬新郭士成丁伟峰
- 关键词：非编码RNA表观遗传学肿瘤抑制
- 结直肠癌抑癌基因及其启动子区高DNA甲基化的验证方法
- 本发明提供一种结直肠癌抑癌基因，为CPEB1基因。本发明还提供一种结直肠癌抑癌基因的启动子区高DNA甲基化的验证方法，通过DNA甲基化靶向测序技术检测甲基化程度、荧光定量PCR技术检测基因mRNA表达、Western印迹...
- 丁伟峰濮伟霖邵可可张健锋鞠少卿马彦云
- 结直肠癌DNA甲基化标志物
- 本发明提供一种用于预测结直肠癌(CRC)风险的DNA甲基化标志物集，所述标志物集包括ESR1、ZNF132、ZNF229、ZNF542和ZNF677；本发明还提供一种用于测定DNA甲基化标志物集的试剂盒；本发明还提供一种...
- 丁伟峰濮伟霖鞠少卿钱飞马彦云张健锋邵可可肖峰靳钦
- 转录因子CEBPB结合CPEB1基因启动子区调节CPEB1基因表达的方法
- 本发明提供一种转录因子CEBPB和TFCP2竞争结合CPEB1基因启动子区调节CPEB1基因表达的方法，包括如下步骤：S1、通过实验验证转录因子CEBPB可结合CPEB1基因启动子区，而当CPEB1基因启动子区高甲基化状...
- 丁伟峰濮伟霖邵可可张健锋鞠少卿马彦云
