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石墨烯及氧化石墨烯在蛋白质检测中的应用被引量：1: 2013年; 近年来,随着石墨烯的问世,石墨烯及其氧化物——氧化石墨烯在生命科学领域,尤其是蛋白质检测研究中的应用日趋增多。石墨烯以其大的比表面积、优异的生化性能使其发挥了传统材料不可替代的作用。综述石墨烯及氧化石墨烯在电免疫检测、生物质谱分析以及western blotting分析中的应用,并对其应用前景做一展望。; 张爱红张姣林虹君; 关键词：石墨烯氧化石墨烯蛋白质检测

18O同位素标记定量肽段串联体蛋白质结合同位素稀释-多反应监测质谱的蛋白质绝对定量新方法被引量：2: 2013年; 建立了定量肽段串联体蛋白质(concatamers of Q peptides,QconCATs)结合18O同位素标记-多反应监测质谱的蛋白质绝对定量新方法。首先对QconCAT重组蛋白质进行了纯度表征,十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)表征结果表明重组蛋白质的纯度在99%以上,相对分子质量约为63.4 kDa。对QconCAT重组蛋白质酶切后的肽段混合物进行质谱分析,并经pFind和pLabel软件处理,验证了目标肽段。还考察了QconCAT重组蛋白质的酶切效率和18O标记效率,并对QconCAT蛋白质结合18O标记-同位素稀释-多反应监测质谱方法进行了评价。实验结果表明,采用该方法对腾冲嗜热厌氧菌(Thermoanaerobacter tengcongensis,TTE)中选定蛋白质的肽段进行绝对含量测定时,相对标准偏差小于20%,准确度较高,说明该方法可用于复杂生物样本中蛋白质的绝对定量。更重要的是所建方法不仅解决了细胞培养氨基酸稳定同位素标记(SILAC)技术的重标试剂价格昂贵的问题,也为定量蛋白质组学提供了一种新的方法。; 李楠楠周廉淇毛心丽张姣卫军营林虹君李佳斌田芳张养军钱小红; 关键词：同位素稀释

一种两维短梯度高效蛋白质组分离鉴定方法: 本发明公开了一种两维短梯度高效蛋白质组分离鉴定技术。本发明的蛋白质组分离鉴定方法，包括以下步骤：1）从离体的细胞或组织中提取蛋白质混合物；2）采用蛋白酶将待分离鉴定的蛋白质混合物酶切成肽段混合物；3）将酶切获得的肽段混合...; 秦钧钱小红丁琛应万涛张养军卫军营宋雷江静张姣贺福初; 文献传递

原子转移自由基聚合修饰银丝固定化酶反应器的制备及在蛋白质组鉴定中的应用: 2013年; 针对传统溶液酶解存在的酶解时间较长、酶自切物干扰以及蛋白酶不能重复使用等缺陷,通过电子转移生成催化剂的原子转移自由基聚合法修饰银丝,并以其为载体制备了一种新型的固定化酶反应器。用质谱考察了银丝固定化酶反应器(SW-Trypsin)的酶解效率、重复性和回收率。结果表明:绒毛状聚合物修饰的SW-Trypsin的酶解效率较高,酶解标准蛋白牛血清白蛋白(BSA)20 min后,肽段的氨基酸序列覆盖率可达93%,高于传统溶液酶解方法酶解16 h所得79%的覆盖率。使用该固定化酶反应器于一个月内8次酶解BSA所得的氨基酸序列覆盖率在89%到97%之间,平均覆盖率为94%,显示出良好的稳定性。另外,该固定化酶反应器酶解马心肌红蛋白(MYO)的回收率为87.67%。最后,用SW-Trypsin酶解腾冲嗜热菌全蛋白20 min,所鉴定到的氨基酸序列覆盖率和蛋白数量与同样条件下溶液酶解16 h的结果接近,且零漏切位点肽段的比例更高。加之容易分离的优点,SW-Trypsin在蛋白质组学的应用中具有良好的前景。; 周廉淇张姣田芳张养军钱小红; 关键词：蛋白质组学质谱银丝

纳米材料在蛋白质分析中的应用被引量：4: 2013年; 纳米材料因具有易与蛋白质结合而不影响其生化性质,可用于多种中间体的合成,可与酶、抗体结合而提高其性能等独特的优势而在蛋白质分析中得到了广泛的应用,尤其是与生物技术结合后,对纳米材料在蛋白质分离、富集和检测等方面的作用的研究已成为当前的热点。本文综述了纳米金、石墨烯、碳纳米管和碳纳米球在蛋白质分析中的应用,并对其未来的发展前景进行了展望。; 林虹君张爱红田芳张姣张养军钱小红; 关键词：纳米金石墨烯碳纳米管蛋白质分析

采用磁性载体制备的固定化酶反应器的载体粒径对蛋白质酶解性能的影响被引量：5: 2013年; 研究了以不同粒径的磁性颗粒为载体的固定化酶反应器在蛋白质酶解过程中,其粒径大小对团聚、酶解效率和漏切位点等的影响。实验结果表明,纳米级颗粒的酶负载量为亚微米级的3.5倍左右。但当酶固定量相同时,酶解效率基本相当。而在一定程度上加大磁性颗粒的粒径后,团聚现象得到明显改善。选择磁性载体粒径为20nm的固定化酶反应器,对其性能进一步考察。结果显示胰蛋白酶与牛血清白蛋白(BSA)的质量比为1∶1时,即能于1 min内实现快速酶解;当酶解10 min时,其零漏切位点肽段数和蛋白质序列覆盖率基本达到稳定,并明显优于溶液酶解水平。通过对漏切位点的统计分析比较,发现固定化酶解与溶液酶解时的漏切位点规律基本类似。因此,采用不同粒径磁性载体制备的固定化酶反应器均可在蛋白质组学研究中提供快速、高效的酶解。; 张姣周廉淇田芳张养军钱小红; 关键词：磁性颗粒蛋白质组学

一种两维短梯度高效蛋白质组分离鉴定方法: 本发明公开了一种两维短梯度高效蛋白质组分离鉴定技术。本发明的蛋白质组分离鉴定方法，包括以下步骤：1）从离体的细胞或组织中提取蛋白质混合物；2）采用蛋白酶将待分离鉴定的蛋白质混合物酶切成肽段混合物；3）将酶切获得的肽段混合...; 秦钧钱小红丁琛应万涛张养军卫军营宋雷江静张姣贺福初; 文献传递

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张姣