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血清叶酸室间质量评价允许总误差的设定研究: 2021年; 目的设定符合当前我国血清叶酸分析质量水平的室间质量评价(EQA)允许总误差(TEa)。方法收集2016年北京医院检验科血清叶酸检测数据,使用Stata SE 15软件进行蒙特卡洛模拟,得到不同偏倚和不精密度条件下假阴性率的大小,并使用Origin Pro 9.1软件作等值线图,根据可接受的假阴性率标准导出血清叶酸检测方法的TEa。收集2020年全国血清叶酸EQA数据,分别计算基于分析性能对临床结果的影响、基于生物学变异以及我国EQA评价标准导出的5种TEa下,参与实验室及格率和各水平质控品的实验室通过率。结果基于分析性能对临床结果的影响导出的TEa为10%,在此TEa下,2020年第一次EQA血清叶酸实验室及格率>80%,第2次及格率为73.1%。在基于生物学变异导出的最低(46.57%)、适当(31.05%)和最佳水平TEa(15.52%)和我国EQA评价标准下,2020年2次EQA计划血清叶酸实验室及格率均>85%。结论我国实验室血清叶酸检测水平尚不能满足基于分析性能对临床结果的影响导出的TEa要求,建议使用基于生物学变异导出的最佳TEa水平(15.52%)作为血清叶酸TEa的推荐标准。; 易喜连张江涛周伟燕张天娇龙琪琛曾洁张传宝; 关键词：允许总误差生物学变异血清叶酸

三种相同原理的糖化血红蛋白分析仪检测结果的初步比对被引量：12: 2012年; 目的比较3种常用的基于离子交换高效液相色谱原理的糖化血红蛋白(HbA1c)分析仪[TOSOH HLC-723 G7全自动HbA1c分析仪(简称HLC-723 G7)、Bio-Rad D-10全自动HbA1c分析仪(简称D-10)和ArkrayADAMSTMA1c HA-8160全自动HbA1c分析仪(简称HA-8160)]测定商品质控品和临床患者样本的结果,以评价不同仪器测定结果间的偏差。方法于13 d内分别使用3种仪器测定高、低浓度HbA1c质控品,合格后测定58份临床患者新鲜样本。使用Levene's检验对3种仪器测定质控品和临床样本的结果进行方差齐性检验;认定方差相等后,对其进行单因素方差分析,观察3种仪器结果间的差异;根据临床样本结果,分别作散点图及偏差图用以观察3种仪器之间测定结果的相关性及偏差;分别计算每2个仪器间的线性回归方程,并对患者样本HbA1c结果进行预期偏差估计。结果 3种仪器测定低值质控品的结果差异有统计学意义(P<0.05),测定高值质控品的结果差异无统计学意义(P>0.05)。3种仪器临床样本的测定结果之间相关性较好(P>0.05)。在4.9%～11.4%HbA1c范围内,HA-8160、D-10的线性回归方程为Y=0.963X+0.179,r=0.988,r2=0.976;测定HbA1c的相对偏差为-0.37%～0.72%。HLC-723 G7、D-10的线性回归方程为Y=0.968X+0.523,r=0.991,r2=0.982;测定HbA1c的相对偏差为-0.1%～0.8%。HLC-723 G7、HA-8160的线性回归方程为Y=0.987X+0.480,r=0.984,r2=0.969;测定HbA1c的相对偏差为-0.13%～1.12%。结论在常见的生理及病理范围内,HLC-723G7、D-10和HA-8160 3种仪器的测定结果之间没有明显偏差。; 闫颖张传宝张江涛马嵘王冬环张天娇曾洁周伟燕陈文祥; 关键词：糖化血红蛋白

电感耦合等离子体质谱法测定血清镁被引量：2: 2013年; 目的建立一种应用电感耦合等离子体质谱（ICP—MS）测定血清中镁（Mg）含量的候选参考方法。方法验证性研究。以铝（Al）作为Mg的内标，用重量法加入到标准溶液和血清中，样品经过硝酸消解、稀释，以ICP—MS测定其^27Mg/^27Al同位素比值，选择与样品相邻的一对标准溶液校准样品中Mg的浓度，采用包括法定量。对方法的线性范围、精密度、回收率以及正确度进行验证，并计算测量不确定度，参加国际比对。结果该方法的线性范围为0～0．5¨g／g（R。=0．99998），测定2份血清中Mg的分析回收率分别为100．22％和100．11％（n=3），测定3份血清的重复性CV分别为0．35％、0．36％和0．41％（n=9）。正确度验证显示测定标准参考物质SRM909b和SRM956b的结果均在认定值范围内，SRM909b两水平血清测定总变异系数分别为0．54％、0．53％，SRM956b三水平血清测定总变异系数分别为0．30％、0．50％和0．47％。参加国际参考实验室间比对结果理想。结论本研究建立了ICP—MS测定血清Mg的测量程序，具有良好的线性范围、精密度和回收率，且此法操作简单快速，有望成为血清Mg测定的候选参考方法。; 闫颖汪静赵海舰胡翠华马嵘张江涛陈文祥张传宝; 关键词：镁质谱分析法分光光度法原子

血清雌二醇和睾酮标准物质候选物同步稳定性研究被引量：2: 2015年; 目的按照GB/T 15000.3-2008/ISO Guide35(2006)的说明,用同步稳定性实验设计对血清雌二醇和睾酮标准物质候选物在不同保存条件下的稳定性进行研究。方法以实验初始时间为时间零点,-196℃液氮保存为参比温度条件,共设计13种温度时间点计划。将标准物质候选物混合人血清置于-70℃、-20℃、4℃和室温的环境下分别保存1周至28个月。全部储存和转移工作完成后,用常规方法在一个工作日内完成所有样本的测定。结果血清睾酮和雌二醇在-70℃至少稳定保存28个月,在-20℃可稳定保存12个月。在室温保存1个月,4℃下保存2个月,血清中两个项目的浓度存在下降的趋势,经统计学检验该变化具有显著性。结论血清雌二醇和睾酮标准物质候选物长期稳定贮存的条件为-70℃冰冻保存。; 张天娇汪静曾洁张江涛赵海建王冬环马嵘胡翠华王默张传宝; 关键词：雌二醇睾酮稳定性

同位素稀释液相色谱串联质谱测定血清糖化白蛋白被引量：2: 2020年; 目的建立一种基于同位素稀释液相色谱串联质谱法(ID-LC/MS/MS)检测血清糖化白蛋白(GA)的准确定量方法。方法本研究在日本临床化学学会(JSCC)推荐的ID-LC/MS方法上进行优化,采用阴离子交换色谱柱提纯白蛋白(Alb),使用重量法准确称量提纯标本、赖氨酸(Lys)和糖化赖氨酸(DOF-Lys)的标准溶液及两种的混合内标,将Alb酸水解为氨基酸,检测Lys和DOF-Lys从而定值GA。根据C62-A文件对建立的方法进行方法学评价并与常规方法进行比对研究。结果蛋白电泳鉴定标本Alb纯度结果为100%。Lys和DOF-Lys线性标准曲线R2范围分别为0.9978~0.9999、0.9994~1.0000。血清GA测定的批内、批间和总的变异系数(CV)分别为0.69%~1.97%、1.13%~2.33%、1.37%~2.54%。正确度评价中三个浓度参考物质测定结果与认定值偏差分别为-2.56%、-1.87%、-2.94%。Lys和DOF-Lys的基质效应分别为89.92%、109.98%,携带污染率分别为-1.13%、-3.27%。Lys的检测限和定量限分别为0.075、0.248 nmol/g,DOF-Lys的检测限和定量限分别为0.007、0.024 nmol/g。方法的相对扩展不确定度为1.60%~2.03%。与常规方法的拟合回归曲线R2为0.9707。结论建立了一种基于ID-LC/MS/MS法检测血清GA的方法,方法学评价准确可靠,有望作为血清GA检测的候选参考方法。; 周慧娟张天娇龙琪琛曾洁张江涛周伟燕张超张传宝

同位素稀释气相色谱质谱法测定血清总甘油: 胡翠华张天骄董军张传宝国汉邦李红霞张江涛周伟燕陈文祥

叶酸检测标准化现状及挑战: 2020年; 叶酸是人体所必需的一类水溶性维生素,在新陈代谢中发挥着重要作用。临床上总叶酸的检测主要采用竞争性蛋白结合法,但不同检测系统间的检测结果可比性不佳。液相色谱串联质谱法(LC-MS/MS)更为灵敏和特异,但该方法检测蝶酰谷氨酸时,存在不同实验室间结果差异较大的问题。标准化的实施有助于改进叶酸不同检测系统间结果可比性。叶酸化学性质不稳定,代谢物种类繁多,结构和功能各异,因此,实现叶酸检测的标准化存在一定的挑战。; 易喜连张江涛张传宝; 关键词：叶酸溯源性

血清半胱氨酸蛋白酶抑制剂C室间质量评价被引量：2: 2018年; 目的了解我国血清半胱氨酸蛋白酶抑制剂C(Cys C)的检测质量现状。方法通过网络平台收集2017年参加Cys C室间质量评价用户检测数据,按试剂分8组(n≥18)并根据ISO13528统计各组稳健均值(Robust Mean)和稳健变异系数(Robust CV),设Robust Mean为靶值,以生物学变异导出的总误差3.8%(优)、7.6%(中)、11.4%(低)分别评价及格率。将用户数量不少于50的试剂组再按仪器分组,形成"试剂-仪器"组,计算各组中位数以及值最大组和值最小组之间的极差。结果2017年共710家实验室回报了Cys C检测结果,按3.8%、7.6%和11.4%来评价合格率分别为25.9%(184/710)、55.5%(394/710)、75.2%(534/710)。一种试剂与不同仪器组成的分析系统检测结果差异在1.62%~12.27%。结论我国Cys C检测质量尚需进一步提高。; 曾洁赵海建张天娇周伟燕闫颖张江涛汪静胡翠华马嵘张传宝; 关键词：半胱氨酸蛋白酶抑制剂C 肾小球滤过率

肾素前体和成熟肾素的原核表达及纯化: 2023年; 目的原核表达及纯化肾素前体(renin,REN)和成熟肾素(REN-340),并检测其浓度。方法根据NCBI中检索获得的人REN基因序列(5972),经E.coli密码子优化后,人工合成REN及REN-340基因片段,克隆至载体p ET-28a(+),构建重组表达质粒6×His-REN-p ET和6×His-REN-340-p ET。转化至感受态E.coli BL21(DE3),于不同诱导温度(20、25、30、37℃)及不同终浓度(0.1、0.2、0.4、0.5 mmol/L)IPTG条件下进行诱导表达。采用最佳诱导条件诱导表达重组REN和REN-340,经Ni-NTA镍离子亲和层析后,ELISA法检测其浓度。结果经双酶切及测序鉴定,重组表达质粒6×His-REN-p ET和6×His-REN-340-p ET构建正确。重组REN和REN-340的最佳诱导温度分别为37和20℃,最佳IPTG终浓度分别为0.1和0.2 mmol/L。纯化的重组REN和RNE-340浓度分别为9148.21和15115.31 m IU/m L。结论制备的重组REN和REN-340蛋白浓度较高,且生产周期较短,有望用于制备室间质量评价(external quality assessment,EQA)的候选质控品和标准物质。; 张超汪静李小鹏张江涛张传宝; 关键词：基因重组原核表达

血清总甘油测定基质效应的研究被引量：14: 2008年; 目的评价28种质控血清或校准物在8种总甘油常规检测系统下的基质效应，并评价常规系统校准的准确性。方法以同位素稀释液相色谱串联质谱测定血清总甘油的方法为对比方法，用甘油氧化酶法的8种常规测定系统为待评价方法，测定20份人新鲜血清和28种制备物中的总甘油。将两法测定人新鲜血清的结果作直线回归，求得y值双侧95％的预测区间，评价制备物的基质效应。通过分析新鲜血清样本的测定结果评价常规系统校准的准确性。结果制备物在进口A、B、C系统和国产D系统中表现正基质效应，进口D系统正、负基质效应均有以正效应为主，国产A、B系统正、负基质效应均以负效应为主，只有1个制备物对国产C系统有较弱的基质效应。同对比方法相比，国产A、D系统存在正校准偏差，进口A、B、C、D和国产B系统存在负偏差，国产C系统不存在校准偏差。结论我国血清总甘油的部分常规检测系统存在校准偏差，部分质控物和校准物存在基质效应。为实现检验结果的准确性和实验室间的可比性，临床标准化工作势在必行。; 周伟燕赵海舰张江涛张天娇汪静谢洁红马嵘胡翠华王冬环陈文祥张传宝; 关键词：甘油色谱法液相光谱分析

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张江涛

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