张秀霞
- 作品数：30 被引量：51H指数：5
- 供职机构：长春生物制品研究所有限责任公司更多>>
- 发文基金：吉林省科技发展计划基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学化学工程农业科学更多>>
- SARS病毒刺突蛋白片段在大肠杆菌中的表达和纯化被引量：2
- 2005年
- 目的获得SARS病毒表面刺突蛋白片段。方法用PCR方法克隆SARSS2片段基因,并在大肠杆菌中进行表达。表达产物经SDSPAGE及Westernblot鉴定,阴离子交换层析纯化。结果SARS病毒S2片段基因在大肠杆菌中获得了高表达,表达量占总蛋白的50%以上;得到纯度大于90%的SARS蛋白样品。结论获得了能够应用于SARS疫苗研究的SARS蛋白样品。
- 方勇张秀霞王宣军王志武李洋盛军
- 关键词：大肠杆菌片段SARS病毒BLOT层析纯化S蛋白
- 精制胸腺活性肽药效学研究被引量：1
- 2003年
- 目的 考察精制胸腺活性肽免疫学活性。方法 建立BALB/c小鼠肝细胞肿瘤(腹水型)模型,经腹腔连续注射肝肿瘤细胞15d,检测各种生命指标,以观察抗肿瘤效果。同时用E-玫瑰花环实验及淋巴细胞转化实验评价其生物学活性。结果 抗肿瘤实验表明,生命各项指标均优于盐水对照组,用药组10d、15d的存活率明显高于对照组;E-玫瑰花环及淋巴细胞转化实验均显示精制胸腺活性肽组明显高于对照组。结论 精制胸腺活性肽具有明显的免疫增强作用。
- 王志武白春杰关晓峰夏天瑶李光谱张秀霞迟春萍
- 关键词：肝癌细胞免疫学活性药效学
- 冻干重组rhGM-CSF的稳定性被引量：3
- 2000年
- 目的 观察冻干重组ｒｈＧＭ－ＣＳＦ的稳定性。方法采用ＸＴＴ法，ＴＦ－１细胞为依赖细胞株，对重组人 粒细胞－巨噬细胞集落刺激因子（ｒｈＧＭ－ＣＳＦ）进行了稳定性观察。结果重组ｒｈＧＭ－ＣＳＦ在３７℃保存３个月，２２℃５个 月，４℃４８个月生物学活性未降低。结论 重组ｒｈＧＭ－ＣＳＦ稳定性好。
- 王妍张秀霞隋宝真金铎迟春萍李秀芝
- 关键词：RHGM-CSF稳定性保存温度生物活性
- 大肠杆菌表达SARS-S1大片段与SARS敏感细胞的结合
- 2005年
- 目的研究大肠杆菌表达的SARS-S1大片段和SARS敏感细胞的可能相互作用。方法使用纯化的S1蛋白和制备的抗S1抗体对不同的细胞进行免疫荧光染色,并用FACS进行分析。结果不同细胞和S1蛋白孵育后,对抗S1抗体介导的荧光染色呈现不同的反应。结论制备的S1蛋白片段可以和SARS敏感的VERO细胞发生特异性结合。
- 郝淑美王宣军吉海滨张秀霞王志武迟春萍
- 关键词：SARS-COV免疫荧光
- 抗瘤酮A_(10)、5Fu、GM-CSF和IL-2的抗癌效果
- 2004年
- 目的 比较A1 0 、5Fu、GM CSF和IL 2的抗癌效果。方法 选取NIH小鼠 ,分别腹腔接种肝腹水HeP A 2 2细胞、骨肉瘤S180细胞及胃癌MFC细胞 ,10d后将注射每种细胞的小鼠分为 3组 ,每组 12只 ,分别于小鼠腹腔注射A1 0 、5Fu、GM CSF和IL 2 ,每日 1次 ,每次 1ml 只 ,连续给药 8d后改为每 3d给药 1次 ,观察小鼠生存时间及抑瘤效果。结果 A1 0 、5Fu、GM CSF及IL 2均能延长小鼠生存时间 ,A1 0 抑制肝HeP A 2 2肿瘤效果显著。结论 A1 0 、5Fu、GM CSF和IL
- 刘淑玲张秀霞迟春萍王妍刘哲屈阿妮孙妍红佟祥山
- 关键词：抗癌药物癌细胞抗瘤酮
- 百日咳毒素S1亚基片段在大肠杆菌中的表达
- 2009年
- 目的构建百日咳毒素(PT)S1亚基片段原核表达质粒,并在大肠杆菌中表达重组蛋白。方法根据GenBank中登录的百日咳毒素S1亚基基因序列,人工合成密码子优化的S1基因,利用重叠PCR技术将S1基因上的两段DNA序列拼接在一起,形成一个新的基因序列S1′。将该序列与7ZTS表达载体连接,构建重组原核表达质粒7ZTS-S1′,转化大肠杆菌JM109(DE3),IPTG诱导表达。表达产物经SDS-PAGE和Western blot进行鉴定。结果S1′基因经PCR鉴定及测序证明与预期相符;重组表达质粒经双酶切鉴定证明构建正确;表达蛋白的相对分子质量约17400,表达量约占菌体总蛋白的8%,且具有良好的反应原性。结论已成功构建百日咳毒素S1亚基片段重组原核表达质粒,并在大肠杆菌中表达了重组蛋白,为PT单抗及其检测试剂盒的研制奠定了基础。
- 时成波曹玉锋张秀霞吴晓娟李雨桐徐光磊尹晓东
- 关键词：百日咳毒素原核表达重叠PCR
- 纯化胸腺肽抗白色念珠菌的效果
- 2007年
- 目的观察纯化胸腺肽抗小鼠感染白色念珠菌的效果。方法选取昆明小鼠,建立白色念珠菌感染模型,感染浓度为0·5×106个/ml,实验分纯化胸腺肽组、胸腺肽组及空白对照组,实验组给药剂量为1·5mg/kg,对照组接种0·5ml生理盐水,感染前后10d,隔天肌肉注射,观察小鼠各项生命指标及抗感染效果。在最后一次注射后第8天,检测各组小鼠血清溶菌酶含量。结果纯化胸腺肽组各项生命指标均优于胸腺肽组及空白对照组,小鼠血清溶菌酶含量均显著高于空白对照组和胸腺肽组。结论纯化胸腺肽抗白色念珠菌感染的效果优于胸腺肽。
- 迟春萍王志武代淑艳杨琳张秀霞白春杰王殿军冷梅盛军
- 关键词：白色念珠菌存活率溶菌酶
- 抗SARS刺突蛋白单克隆抗体的制备和鉴定
- 目的：获得抗SARS病毒表面刺突蛋白单克隆抗体用于SARS研究.
方法：用经过纯化的在大肠杆菌中表达的SARS-S2蛋白免疫小鼠,进行细胞融合制备单克隆抗体.对获得的抗体进行ELISA和免疫印迹鉴定
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- 张秀霞王宣军吉海滨方勇李洋王志武盛军
- 关键词：SARS病毒ELISA
- 文献传递
- 分泌型rhGM-CSF中试产品的质量分析
- 2001年
- 参照 2 0 0 0版《中国生物制品规程》对 3批粒细胞 巨噬细胞集落刺激因子 (rhGM CSF)原液及半成品进行理化及生物学活性检定 ,结果显示 3批rhGM CSF原液及半成品均符合 2 0 0 0版生物制品规程的各项检定标准。对 3批rhGM CSF中试产品质量分析 ,说明rhGM CSF的生产工艺合理 ,产品质量稳定 。
- 迟春萍王妍刘淑玲张秀霞刘冬梅李健平金铎李云富
- 关键词：RHGM-CSF分泌中试产品粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子生物制品
- 抗卵巢癌相关抗原CA125单抗及其磁酶诊断试剂的制备
- 2014年
- 目的制备卵巢癌相关抗原CA125（cancer antigen 125）磁酶检测试剂,并进行验证及初步应用。方法应用CA125抗原免疫BALB/c小鼠,通过细胞融合,筛选效价高、稳定性分泌抗体的杂交瘤细胞株后,接种小鼠腹腔,收集腹水,制备抗CA125单抗,并对其亚型、特异性、相对亲和力、抗原结合位点及抗原决定簇进行鉴定。通优化反应条件制备CA125抗原磁酶检测试剂,并进行验证后,将其应用于50份女性健康体检者及100份卵巢癌患者血清的检测。结果共获得3株阳性杂交瘤细胞株,分别命名为4B6、2G10、1C2;1C2、4B6和2G10单抗的抗体亚型分别为Ig G2a、Ig G1和Ig G1,轻链均为κ链,相对亲和力依次为2G10〉4B6〉1C2,与AFP、CA50、CEA、CA199、CRP、CA242和小牛血清未发生交叉反应,1C2单抗识别位点与2G10和4B6不同,且3株单抗的抗原决定簇均在CA125蛋白部分上。确定该磁酶检测的反应条件为：包被抗体按100μg/ml,37℃包被1 h;20%小牛血清37℃封闭1 h或4℃封闭过夜;酶标抗体最佳反应时间为45 min。当CA125浓度在10~500 U/ml时,与对应的A450值线性关系良好,R2=0.992;该检测试剂最低检测极限约10 U/ml,灵敏度高;与人血清白蛋白、小牛血清、CA50、CEA、AFP、CRP、CA199和CA242均未发生反应,特异性高;于37℃放置4 d的CA125 A450值与2~8℃相比,差异无统计学意义（P〈0.05）;批内及批间变异系数均〈10%,重复性较好;高、中、低3个浓度的CA125抗原的回收率在94.45%~105.21%之间,准确性高。50份健康体检者血清中CA125阳性率为4%,100份卵巢癌患者血清中CA125阳性率为88%。结论已成功制备了卵巢癌相关抗原CA125磁酶检测试剂,该试剂具有应用于卵巢癌患者的诊断价值。
- 李雨桐王甲男韩顺子于爱东吴业红张秀霞
- 关键词：CA125抗原单克隆抗体磁珠
