张立霞
- 作品数：2 被引量：1H指数：1
- 供职机构：中国科学院遗传与发育生物学研究所更多>>
- 发文基金：天津市科技发展战略研究计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 联合转移人HT和DAF基因对模拟异种移植超急性排斥反应的抑制作用被引量：1
- 2007年
- 目的探讨联合转移人α1,2-岩藻糖苷转移酶(HT)和衰变加速因子(DAF)基因对模拟异种移植超急性排斥反应的抑制作用。方法通过显微注射制备转人HT及DAF基因的子代小鼠,以聚合酶链反应和流式细胞仪筛选出人HT和(或)DAF基因整合与表达阳性的子代转基因小鼠。以同时表达人HT和DAF基因的小鼠为实验组,单一表达人HT或DAF基因的小鼠为HT对照组和DAF对照组,取其心脏,采用改良的Langendorff心脏灌注装置灌注心脏,先以KH液逆向灌注,30 min后再以含15%(体积分数)人AB血清的Krebs-Henseleit液(KH液)灌注。记录不同灌注时间的心率、左心室收缩压及左心室舒张末压,计算左心室获得压,以心率与左心室获得压的乘积作为心脏左心室收缩功能的指标,免疫组化法观察灌注后的心脏血管内皮细胞和组织中IgM与C3c的沉积情况。结果KH液灌注过程中,各组间心脏做功能力的差异无统计学意义;KH液中加入人血清后,HT对照组和DAF对照组的心脏做功能力明显下降,在灌注60 min时心脏做功分别为最大值的27%和23%,平均做功时间分别为118 min和89 min,普通小鼠心脏在灌注后50 min时停止搏动,而实验组的心脏做功能力下降缓慢,至60 min时心脏做功维持在最大值的67%以上,平均做功时间为225 min,其心脏做功能力与搏动时间高于HT对照组和DAF对照组(P<0.05)。免疫组化染色显示,实验组小鼠心脏血管内皮细胞与组织中未见IgM和C3c沉积,HT对照组可见C3c少量沉积,DAF对照组可见IgM沉积和C3c少量沉积,普通小鼠心脏可见IgM和C3c沉积。结论小鼠联合转移人HT和DAF基因后,其心脏在人血清灌注下的免疫损伤明显减轻,这可能对抵御异种移植超急性排斥反应有一定帮助。
- 刘秉乾王广有李胜芝张志宏李光三张立霞马腾骧
- 关键词：转基因
- 人α1，2-岩藻糖苷转移酶和衰变加速因子基因转移克服异种移植急性血管排斥反应的研究
- 2009年
- 目的观察人α1，2-岩藻糖苷转移酶（HT）和衰变加速因子（DAF）基因转移对抑制血管内皮细胞激活从而克服异种移植急性血管排斥反应的能力。方法通过显微注射建立转基因小鼠动物模型，Southern印迹杂交和流式细胞计数筛选出人HT和／或DAF基因整合与表达阳性的子代转基因小鼠。研究表达不同目的基因的转基因小鼠血管内皮细胞与15％人血清孵育后溶破细胞的百分数，免疫细胞化学染色检测细胞核因子（NF）-KB的激活，流式细胞计数检测细胞表面血管细胞黏附分子（VCAM）-1的表达。结果子代小鼠血管内皮细胞人HT／DAF共基因表达7只，人HT与DAF单基因表达分别为6只和8只。与15％人血清孵育后，人HT／DAF共表达组细胞的溶破细胞百分数（4±2）％低于人HT表达组细胞（25±10）％、人DAF表达组细胞（31±11）％及正常组细胞（76±24）％（P均〈0．05）。转双基因抑制细胞NF—KB激活的能力强于转人HT或DAF单基因，且转双基因细胞表面VCAM-1的表达较转单基因细胞显著降低，差异有统计学意义（P〈0．05）。结论人HT／DAF基因联合转移具有部分抑制血管内皮细胞激活从而克服异种移植急性血管排斥反应的能力。
- 刘秉乾武玉东魏金星李沛寰李光三张立霞李胜芝张志宏马腾骧
- 关键词：异种移植急性排斥反应衰变加速因子
