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徐青元: 作品数：71 被引量：68H指数：5; 供职机构：中国农业科学院哈尔滨兽医研究所更多>>; 发文基金：国家高技术研究发展计划公益性行业(农业)科研专项国家自然科学基金更多>>; 相关领域：农业科学生物学医药卫生自动化与计算机技术更多>>

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西尼罗病毒NS1与E基因重组腺病毒的构建及免疫原性研究被引量：1: 2014年; 为构建串联表达西尼罗病毒(WNV)NS1和E基因的重组腺病毒,本研究利用口蹄疫病毒具有自我切割功能的2A蛋白的编码序列将NS1和E基因串联,构建穿梭载体p Shuttle-WNV-NS1-2A-E,通过细菌内同源重组获得重组腺病毒DNA,经脂质体转染AD293细胞,在细胞内完成病毒粒子的组装制备重组腺病毒。通过间接免疫荧光和western blot检测表明:重组腺病毒中的外源基因表达的融合蛋白NS1-2A-E可以自我裂解为NS1和E蛋白。将构建的重组腺病毒免疫小鼠,结果表明该重组病毒可以诱导机体产生良好的体液免疫应答。本实验为WNV重组腺病毒活载体疫苗的研制奠定了基础。; 刘二战赵国辉孙恩成崔焕忠杨涛徐青元孙晶孙亮席娜魏天吴东来; 关键词：西尼罗病毒 NS1 重组腺病毒体液免疫

抗蓝舌病病毒血清1型VP2蛋白的单克隆抗体BTV1-4B6及其识别的B细胞表位多肽与应用: 本发明涉及一种抗蓝舌病病毒血清1型VP2蛋白的单克隆抗体BTV1-4B6及其识别的B细胞表位多肽与应用，属于蓝舌病防治领域。本发明还涉及分泌该单克隆抗体的杂交瘤细胞株。由本发明的杂交瘤细胞株分泌的抗BTV1-VP2蛋白的...; 吴东来徐青元刘霓红杨涛; 文献传递

蓝舌病病毒4型VP5蛋白单克隆抗体的制备: 目的：对中国BTV4型VP5蛋白制备型特异性单克隆抗体(MAbs)，为BTV4的型特异性检测方法的建立以及VP5蛋白功能研究奠定基础。方法:提取BTV4的RNA，设计特异性引物对目的基因SS进行反转录-PCR;利用pMA...; 孙亮孙恩成徐青元杨涛吴东来; 关键词：动物医学蓝舌病蛋白表达单克隆抗体; 文献传递

西尼罗病毒prM基因可溶性表达与抗原性鉴定: 为进行西尼罗病毒(WNV)NY99株prM蛋白的免疫学研究,通过PCR方法扩增WNV NY99株prM基因,并将其克隆至原核表达载体pMALTM-c2X上,构建重组表达质粒pMALTM-c2X-prM,经IPTG诱导后得...; 赵晶秦永丽孙恩成杨涛徐青元耿宏伟王凌凤蔡绪禹魏鹏王文世步志高吴东来; 文献传递

西尼罗病毒NS1基因的原核表达与抗原性鉴定: 通过PCR方法扩增西尼罗病毒(WNV)NY99株NS1基因,并将其克隆至原核表达载体pMAL-c2X上,构建出重组表达质粒pc2X-NS1,经IPTG诱导得到可溶性的麦芽糖结合蛋白(MBP)-NS1融合蛋白(MBP-NS...; 马健男吴东来杨涛王群张维军徐青元田野林燕宋红梅步志高; 关键词：西尼罗病毒原核表达融合蛋白; 文献传递

蓝舌病病毒1型衣壳蛋白VP2、VP5、VP7酵母双杂交诱饵质粒的构建及鉴定: 研究目的:蓝舌病(Bluetongue,BT)是由呼肠孤病毒科环状病毒属蓝舌病病毒引起的反刍动物虫媒(如库蠓、伊蚊等)传染病。蓝舌病病毒基因组由10个大小不同的双股RNA组成,分别编码7种结构蛋白(VP1P7)和4种非结...; 张继凯孙恩成杨涛徐青元吴东来

猪繁殖与呼吸综合征病毒M蛋白在重组牛痘病毒中的表达与鉴定被引量：2: 2010年; 为重组表达猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)M蛋白,本研究将RT-PCR获得的PRRSV CH-1a株M蛋白基因,克隆于pMD18-T载体中,经测序鉴定正确后,亚克隆至牛痘病毒重组转移质粒pSC11中,构建了转移重组质粒pSC11-PRRSV-M。将pSC11-PRRSV-M在脂质体的介导下转染WR株牛痘病毒感染的TK-143细胞,在含有X-gal的琼脂培养基上通过蓝斑筛选含有PRRSV M基因的重组病毒rWR-PRRSV-M。Western blot与IFA检测表明,重组病毒成功表达了PRRSV M蛋白,而且所表达的蛋白保持了良好的免疫原性。动物实验表明,rWR-PRRSV-M所表达的PRRSV M蛋白在免疫小鼠体内诱生了抗PRRSV的抗体。rWR-PRRSV-M的构建,为进一步探讨PRRSV M蛋白免疫原性提供了基础数据,也为PRRS重组活载体疫苗的研究奠定了基础。; 张维军田野林燕王群徐青元孙庆歌刘霓红杨涛田志军步志高童光志李文京吴东来; 关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒 M蛋白

抗蓝舌病病毒血清1型VP2蛋白的单克隆抗体BTV1-3E8及其识别的B细胞表位多肽与应用: 本发明涉及一种抗蓝舌病病毒血清1型VP2蛋白的单克隆抗体BTV1-3E8及其识别的B细胞表位多肽与应用，属于蓝舌病防治领域。本发明还涉及分泌该单克隆抗体的杂交瘤细胞株。由本发明的杂交瘤细胞株分泌的抗BTV1-VP2蛋白的...; 吴东来徐青元刘霓红杨涛; 文献传递

西尼罗病毒NS1基因的原核表达与抗原性鉴定被引量：2: 2009年; 为进行西尼罗病毒(WNV)NY99株NS1蛋白的免疫学研究,通过PCR方法扩增WNV NY99株NS1基因,并将其克隆至原核表达载体pMAL-c2X上,构建出重组表达质粒pc2X-NS1,经IPTG诱导得到可溶性的麦芽糖结合蛋白(MBP)-NS1融合蛋白(MBP-NS1),其分子质量约为90ku,约占可溶性菌体蛋白质量的50%。利用直链淀粉树脂柱对MBP-NS1纯化后的重组蛋白的纯度达到60%,western blot和间接ELISA检测证明纯化的MBP-NS1具有良好的抗原性和特异性,为进一步开展关于WNV NS1蛋白的研究奠定了基础。; 马健男杨涛王群张维军徐青元田野林燕宋红梅步志高吴东来; 关键词：西尼罗病毒 NS1基因原核表达