朱园园
- 作品数：53 被引量：163H指数：8
- 供职机构：安徽省立医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金安徽省自然科学基金安徽省高校省级自然科学研究项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 应用在动物不成熟卵母细胞体外培养成熟中的饲养细胞
- 应用在不成熟卵母细胞体外培养成熟中的饲养细胞，其特征是以雌性小鼠骨髓间充质干细胞MSC作为饲养细胞。该饲养细胞获取容易，能分泌多种细胞因子和生长因子，可以促进体外培养的不成熟卵母细胞90％以上发育成熟，并且促进体外培养的...
- 冯定庆凌斌高婷周颖沈国栋朱园园姚凤球陈峥峥
- 文献传递
- Grim-19对宫颈癌HeLa细胞端粒酶活性及衰老的影响被引量：3
- 2012年
- 目的重组质粒转染HeLa细胞以探讨Grim-19表达水平的变化对HeLa细胞中端粒酶活性的影响。方法将重组质粒p3×flag-myc-cmv-24-Grim-19(简写Grim-19)通过脂质体转染至HeLa细胞,48 h后通过Western blot检测Grim-19、htert、P16、P21的表达情况,同时检测HeLa细胞衰老和端粒酶活性。结果转染后可见flag的表达及htert的表达降低及P16、P21的表达升高,细胞衰老增加,增殖减弱及端粒酶活性的降低。结论在子宫颈癌细胞株HeLa中Grim-19具有调控端粒酶活性和细胞衰老的作用。
- 杨霞王青元朱靖冯定庆朱园园周颖凌斌
- 关键词：GRIM-19子宫颈腺癌HELA细胞端粒酶
- 氨甲蝶呤对映体耐药A549细胞株的建立及其生物学特征被引量：11
- 2009年
- 目的诱导并建立耐氨甲蝶呤对映体的A549细胞株并观察耐药细胞系(L-(+)-MTX/A549、D-(-)-MTX/A549)的生物学特性。方法以MTX对映体为诱导剂,采用浓度递增结合低剂量持续诱导方法诱导A549细胞株,建立MTX不同对映体耐药细胞系;倒置相差显微镜观察细胞形态变化;MTT法绘制细胞生长曲线;MTT法检测耐药细胞株的耐药指数;流式细胞仪检测细胞周期和细胞的分裂增殖能力。结果L-(+)-MTX/A549、D-(-)-MTX/A549耐药指数分别为6.0的和20.2。倒置相差显微镜观察细胞形态发生了改变;细胞生长曲线显示D-(-)-MTX/A549的增殖略慢于亲本细胞,而L-(+)-MTX/A549的增殖最慢;流式细胞仪检测细胞周期结果显示L-(+)-MTX/A549、D-(-)-MTX/A549耐药细胞株S期细胞数量减少(P<0.05),G0/G1期细胞增多(P<0.05);CFSE检测A549、L-(+)-MTX/A549、D-(-)-MTX/A549的MFI分别为(6.08±0.55)、(7.72±0.30)、(6.90±0.18)。两对映体细胞株间有明显手性差异。结论本研究建立了MTX两种对映体耐药细胞株,为进一步研究其耐药机制提供了一种实验模型。
- 陶绍能何晓东董林李明朱园园孙自敏沈佐君
- 关键词：氨甲蝶呤A549细胞对映体
- siRNA靶向EDAG-1基因对K562细胞株生长的影响被引量：2
- 2006年
- 背景与目的:胚胎发育相关基因-1(EDAG-1)是造血系统发育相关的新基因,定位于9q22。本研究探讨抑制EDAG-1基因的表达对白血病细胞株生长的影响及其机制。方法:将靶向EDAG-1基因的特异序列连接到逆转录病毒载体中,脂质体介导的重组质粒转染包装病毒细胞(PT67),收集细胞上清感染K562细胞株,经嘌呤霉素筛选稳定抑制EDAG-1基因表达的细胞株,RT-PCR检测EDAG-1基因的抑制情况,应用MTT、流式细胞仪检测转染细胞的增殖能力及细胞周期。结果:成功构建了靶向EDAG-1基因的逆转录病毒重组质粒,建立了抑制EDAG-1基因表达的K562细胞株。抑制EDAG-1基因表达的细胞株增殖速度、增殖指数(PI)、增殖活性(SPF)相应降低,其G0/G1期细胞比例明显升高。结论:EDAG-1基因的沉默可以抑制白血病细胞株的增殖,使其阻滞在G0/G1期,提示EDAG-1基因可能是白血病治疗的一个有效靶点。
- 周颖凌斌程勇朱园园冯定庆沈国栋程志祥
- 关键词：EDAG-1RNA干扰白血病细胞周期
- 早期诊断子宫颈癌微小转移灶的方法
- 早期诊断子宫颈癌微小转移灶的方法，其特征是将子宫颈癌手术中子宫旁切缘组织、阴道切缘组织和盆腔淋巴结分别制成细胞匀浆并充分混匀，利用HC II检测细胞匀浆中的HPV的亚型及载量、利用RT－PCR方法检测细胞匀浆中的端粒酶活...
- 凌斌周颖许恬怡赵卫东陈峥峥姚凤球沈国栋冯定庆高婷石永云王梅梅陈敏朱园园
- 文献传递
- 子宫内膜异位症模型及模型建立方法
- 子宫内膜异位症模型及模型建立方法，其模型的特征是将早孕人蜕膜组织种植在NOD－SCID鼠腹部皮下建立子宫内膜异位症模型。建膜方法的特征是蜕膜取自行人工流产术的妇女，妇检证实无先兆流产征象，术后见明显绒毛，蜕膜组织新鲜；所...
- 凌斌王群华赵卫东祝怀平陈峥峥陈纲周颖沈国栋朱园园陈敏许恬怡姚凤球
- 文献传递
- 人免疫功能重建鼠子宫内膜异位症模型及建模方法
- 人免疫功能重建鼠子宫内膜异位症模型及建模方法，其特征是将早孕人外周血单个核细胞输入非肥胖性糖尿病严重联合免疫缺陷小鼠体内，重建人的免疫功能；将同一人蜕膜组织种植在所述小鼠体内建立的人免疫功能重建鼠子宫内膜异位症模型。建模...
- 凌斌王群华陈峥峥赵卫东祝怀平周颖沈国栋许恬怡姚凤球朱园园陈敏
- 文献传递
- 一种新型分离宫颈脱落细胞的方法
- 本发明公开了一种新型分离宫颈脱落细胞的方法，其特征是首先取宫颈脱落细胞于PBS磷酸缓冲液中，涡旋混匀得细胞悬液；将细胞悬液加入粘液分离液中；经离心、弃上清液后再次加入PBS磷酸缓冲液，重悬沉淀物，得到重悬的细胞悬液；将重...
- 凌斌周颖李敏许乾乾冯定庆朱园园沈国栋李彩荣卫莹雷蕾王青元朱靖姚凤球
- 文献传递
- 子宫颈癌干细胞的分离培养及生物学特性鉴定被引量：16
- 2010年
- 目的:分离、培养子宫颈癌干细胞,并鉴定其生物学特性。方法:收集19例不同临床分期(ⅠA～ⅡB期)子宫颈癌患者的肿瘤组织,通过机械剪切、酶消化等方法处理后分离获得单个细胞,采用肿瘤细胞球培养液(tumor sphere medium,TSM)培养获得悬浮细胞球。收集悬浮细胞球形成细胞,通过有限稀释法观察该细胞的克隆形成能力,MTT法检测紫杉醇(paclitaxel)和多柔比星(adriamycin)对细胞的抑制率,荧光活性细胞分类仪(fluorescence activated cell sorter,FACS)检测细胞表面标志物,RT-PCR和Western印迹法检测干细胞、耐药基因及相关癌基因表达。裸鼠皮下接种分离获得的干细胞,观察其成瘤能力,并进行病理类型分析。结果:19例原代细胞经过10～15d培养,其中8例有悬浮细胞球形成,形成比例随肿瘤临床分期的提高而增加。细胞球形成细胞具有克隆形成能力。紫杉醇(100nmol/L)和多柔比星(100nmol/L)对其细胞的平均抑制率分别为(77.65±6.46)%和(48.00±7.15)%,差异有统计学意义(P<0.01)。FACS检测结果提示,细胞表面标志为CD34-CD105-CD44+CK17+;RT-PCR检测结果提示,细胞球表达干细胞标志Oct4和Piwil2,耐药基因ABCG2及相关癌基因c-myc、stat3和sox-2也有mRNA水平的表达;Western印迹法检测结果进一步提示,肿瘤细胞球表达干细胞标志Oct4和Piwil2蛋白。裸鼠皮下接种细胞12周后全部成瘤,且病理类型与来源标本一致。结论:成功分离获得子宫颈癌干细胞,为将来研究子宫颈癌个性化治疗及疗效评价提供了很好的研究模型。
- 冯定庆李彩荣朱园园彭程周颖凌斌
- 关键词：肿瘤干细胞致癌性试验
- C-erbB-2特异性siRNA逆转录病毒载体的构建与鉴定
- 2006年
- 目的构建并鉴定C-erbB-2特异性siRNA逆转录病毒载体。方法体外合成含针对C-erbB-2特异基因序列的寡核苷酸,并定向克隆入逆转录病毒载体RNAi-ReadypSIREN-RetroQ。结果构建的重组逆转录病毒载体可以被限制性内切酶MIuI、BamHI、EcoRI切开,电泳可显示相应条带,经测序其序列与设计的一致。结论成功构建了C-erbB-2特异性siRNA逆转录病毒载体pRetroQ/C-erbB-2/siRNA-1、pRetroQ/C-erbB-2/siRNA-2、pSIREN-RetroQ/C-erbB-2/siR-NA-3,为进一步研究p185基因沉默奠定了基础。
- 陈敏祝怀平凌斌周颖朱园园高婷程志祥沈国栋赵卫东冯定庆
- 关键词：C-ERBB-2RNA干扰逆转录病毒载体
