李振华
- 作品数：7 被引量：17H指数：2
- 供职机构：华东师范大学生命科学学院更多>>
- 发文基金：上海市科学技术委员会资助项目上海市公共卫生重点学科建设项目更多>>
- 相关领域：医药卫生经济管理更多>>
- 上海市创意阶层休闲消费认同研究
- 随着社会步入后物质时代,经济显然也在经历一场由产业经济到创意经济的变革。社会经济不再是简单的工业经济时代的规模决定一切,也不再是信息革命时代的技术万能,而是以人的创造力、想象力、创意为核心的“创意经济”时代。因为低消耗、...
- 李振华
- 关键词：创意经济创意阶层
- 文献传递
- 同种异基因抗原特异性调节性T细胞的体外扩增被引量：1
- 2012年
- 目的建立用人B淋巴细胞体外获得大量的同种异基因抗原特异性调节性T(Treg)细胞的方法,以此检测扩增细胞的表型及其免疫无能性和免疫抑制性。方法第1轮扩增将免疫磁珠分选的人CD4+CD25+T细胞和人B淋巴细胞按1∶4体外混合培养,并加入外源白介素-2(IL-2)和抗-CD28;将第1轮扩增得到的Treg细胞用抗-CD3/CD28包被的免疫磁珠和IL-2刺激,做第2轮扩增以获得更多数量的抗原特异性Treg细胞,分为添加和或未添加免疫抑制剂雷帕霉素(RAPA)2组(n=3)。结果经过2轮的扩增后,在第2轮扩增中未添加RAPA组扩增1×103倍,纯度>80%;添加RAPA组扩增0.8×103倍,纯度>90%。添加RAPA组得到的Treg细胞的Foxp3、CT-LA4、CD39表达水平高于未添加RAPA组,但是HLA-DR变化不大;未添加RAPA组扩增得到的Treg细胞分泌低水平的IL-2、IL-17、IL-4和IFN-γ,而添加RAPA组得到的Treg细胞几乎不分泌上述各种细胞因子,前者表现出部分免疫反应无能性,后者表现出完全的免疫反应无能性,两者都表现出免疫抑制性功能特征。人B淋巴细胞扩增得到的抗原特异性Treg细胞能够极大地抑制同源抗原引起的免疫反应,而对多克隆刺激的免疫反应抑制能力较弱。结论用人B细胞体外扩增抗原特异性Treg细胞,再通过抗-CD3/CD28包被的免疫磁珠进一步刺激可以体外获得大量的抗原特异性的Treg细胞,加入RAPA后可有效地提高Treg细胞的纯度和免疫抑制力且呈现抗原特异性。
- 曹国番郝俊李振华杨燕杨懿铭杨洁任亚娜谢如峰范华骅钱开诚
- 关键词：TREG细胞抗原特异性体外扩增免疫磁珠
- 可作为细胞治疗制品的CD8调节性T细胞的体外诱导扩增方法
- 2018年
- 目的建立1种可用于细胞治疗制品的CD8调性T细胞（CD8＋Reularory T cell,Treg）的体外诱导扩增方法,并检测所获Treg细胞性质及功能的稳定性。方法通过免疫磁珠从人外周血PBMC中分选出CD8＋T细胞,在抗人-CD3/CD28磁珠与外源性IL-2激活下,联合使用不同组合的诱导因子：转化生长因子1（TGF-β1）、雷帕霉素（Rapamycin,RAPA）和全反式维甲酸（All-trans retinoic acid,ATRA）,多克隆诱导扩增出CD8＋Treg细胞,比较不同诱导组CD8＋Treg细胞扩增能力、表型、细胞内因子分泌、抑制功能等情况,筛选出最合适的诱导组细胞,进行体外多轮重刺激扩增并检测其功能及性质的稳定性。结果对不同组CD8＋Treg细胞扩增数量、表型、细胞内因子分泌情况分析得出：TGF-β1和雷帕霉素联合诱导组细胞高表达Foxp3和CD103,扩增能力强,对同种异基因CD4效应T细胞抑制功能可达90%以上、炎性因子IL-2和IFN-γ分泌细胞比例低、在炎性条件下不分泌IL17A和分泌很低量的IFN-γ。体外进行四轮重刺激,扩增倍数最低可达10000倍,且扩增所获Treg细胞活性高,Foxp3表达稳定,各轮抑制功能无显著差别。对Treg抑制作用机制研究发现,Treg通过竞争性消耗内源性IL-2起到部分抑制功能。结论 CD8＋Treg细胞体外扩增诱导方法的建立将填补了目前CD8＋Treg培养方法上的空白。体外大量扩增的CD8＋Treg细胞具有治疗自身免疫病、GVHD等疾病的应用潜力,可作为1种细胞治疗制品运用于临床。同时,通过利用原本在输血中废弃的PBMC,诱导出功能稳定的CD8＋Treg细胞,在一定程度上提高了血液的利用效率和促进了成份输血的进程。
- 孙娟霍小娜杨懿铭杨懿铭蒋雪玉李振华李振华谢如锋高跞刘李栋范华骅朱永明
- 关键词：成份输血
- 雷帕霉素对人CD4^+CD25^+调节性T细胞体外扩增的影响被引量：2
- 2012年
- 探讨有效的体外扩增人CD4^+CD25^+调节性T细胞(Treg)的方法以及雷帕霉素(rapamycin,RAPA)对人CD4^+CD25^+Treg细胞体外扩增的影响。采用免疫磁珠分离人外周血的CD4^+CD25^+Treg,并将实验分为3组:第1组在CD4^+CD25^+Treg培养体系中加入200 U/ml IL-2和包被CD3/CD28单克隆抗体的磁珠;第2组培养体系中除加入100 nmol/LRAPA以外,其余与第1组相同;第3组是CD4^+CD25^+Treg培养第12天后,将细胞进一步分选获取CD4^+CD25^+CD127^- Treg再继续培养,培养体系与第2组相同。实验结果显示,加RAPA培养的CD4^+CD25^+Treg细胞扩增效率比不加RAPA的低,但细胞的纯度明显提高(92%vs 65%)。而加RAPA培养的第2、3组CD4^+CD25^+Treg细胞在纯度上没有明显的差异。加RAPA培养的CD4^+CD25^+Treg细胞扩增后保持其无能状态。体外抑制实验显示体外扩增的CD4^+CD25^+Treg细胞对CD4^+效应T细胞增殖均有明显的抑制作用,而且加RAPA扩增的Treg细胞表现出更强的抑制功能。另外,与第1组体外扩增的Treg细胞相比,加RAPA扩增的Treg细胞表达低水平的IL-2和IFN-γ。实验证明雷帕霉素抑制了CD4^+ CD25^+Treg细胞中混杂的CD4^+效应T细胞的扩增,使用雷帕霉素可以提高体外扩增CD4^+CD25^+Treg细胞的纯度及其免疫抑制功能。
- 郝俊曹国番杨洁杨懿铭李振华杨燕范华骅
- 关键词：体外扩增雷帕霉素
- 雷帕霉素联合人脐带血CD4^+ CD25^+调节性T细胞治疗胶原诱导性关节炎小鼠的初步研究被引量：3
- 2014年
- 目的:初步探讨雷帕霉素(Rapa)联合人脐带血CD4+CD25+调节性T细胞(Tregs)对胶原诱导性关节炎小鼠的治疗作用。方法:通过体外扩增培养获得人脐带血Tregs;建立牛Ⅱ型胶原诱导的类风湿性关节炎(CIA)小鼠模型;将CIA小鼠随机分为对照组,Tregs治疗组,Rapa治疗组,Tregs与Rapa联合治疗组;小鼠骨关节切片进行Safranin O-fast green染色、甲苯胺蓝染色以及HE染色;ELISA法检测CIA小鼠血浆抗Ⅱ型胶原抗体浓度;流式细胞术检测CIA小鼠脾脏CD4+T细胞亚型;检测Tregs在体外对CIA小鼠Ⅱ型胶原特异性CD4+T细胞增殖的抑制功能;Transwell分隔培养法比较非接触培养与直接接触培养中Tregs对CD4+T细胞增殖抑制作用的差异。结果:Tregs与Rapa联合治疗能够延缓疾病发生,显著降低关节炎评分,减少CIA小鼠关节中软骨的破坏以及炎症细胞浸润,降低CIA小鼠血浆中抗胶原总IgG抗体水平以及脾脏中Th17细胞比例;Tregs在体外能够有效抑制CIA小鼠胶原特异性CD4+T细胞的增殖,这种抑制作用主要可能是通过直接接触抑制途径起作用。结论:雷帕霉素联合人脐带血Tregs治疗能够改善CIA小鼠关节炎症状。
- 杨燕杨懿铭李振华杨洁任亚娜谢如峰范华骅
- 关键词：脐带血雷帕霉素CD4+CD25+调节性T细胞胶原诱导性关节炎
- 转化生长因子对体外扩增调节性T细胞HLA-DR表达的影响
- 调节性T细胞是一种具有免疫抑制功能的T细胞亚群,在免疫调节、维持外周免疫耐受及抑制移植排斥反应方面有重要作用。目前研究较多的为CD4+CD25+Foxp3+调节性T细胞（Tregs）,是来源于胸腺的天然Treg细胞。由于...
- 李振华
- 关键词：调节性T细胞转化生长因子人类白细胞抗原免疫抑制功能
- TGF-β1对CD4＋CD25＋T细胞体外扩增与功能的影响被引量：2
- 2013年
- 本文探讨了提高体外大量扩增调节性T细胞(Treg)及其免疫抑制功能的方法。免疫磁珠分选的人的CD4+CD25+T细胞,用抗-CD3/CD28包被的免疫磁珠刺激,加入外源IL-2和免疫抑制剂雷帕霉素(Rapa),分为对照组(未加TGF-β1)和实验组(加TGF-β1),培养12d。结果显示,实验组表达HLA-DR与Foxp3的细胞百分比高于对照组,实验组的平均荧光强度也高于对照组;实验组的免疫抑制功能强于对照组;实验组分泌的炎症细胞因子显著减少。因此,人CD4+CD25+T细胞在抗CD3/CD28包被的免疫磁珠体外刺激扩增过程中加入TGF-β1可以上调CD4+CD25+T细胞Foxp3和HLA-DR表达量,提高其纯度和免疫抑制功能。
- 李振华杨燕杨懿铭霍小娜孙娟李玮杨洁任亚娜谢如锋范华骅
- 关键词：调节性T细胞转化生长因子人类白细胞抗原免疫抑制功能
