李春
- 作品数：8 被引量：24H指数：3
- 供职机构：华中农业大学动物医学院更多>>
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- H1N1亚型猪流感病毒的拯救被引量：11
- 2008年
- 利用8质粒拯救系统成功拯救出了猪流感病毒毒株A/Swine/TianJin/01/2004(H1N1)(A/S/TJ/04)。将猪流感病毒8个基因节段经RT-PCR合成cDNA后,分别克隆到RNA聚合酶I/II双向表达载体PHW2000中,构建成8个重组质粒。用8个重组质粒共转染COS-1细胞,30h后加入TPCK-胰酶至终浓度0.5μg/mL。共转染48小时后收获COS-1细胞及其上清,经尿囊腔接种9日龄SPF鸡胚。收获死亡鸡胚尿囊液并继续用SPF鸡胚传3代,得到有感染性的病毒。经血凝、血凝抑制验、测序分析、电镜观察等均证实了A/S/TJ/04猪流感病毒的成功拯救。这是目前国内首次报道拯救出H1N1亚型猪流感病毒,为进一步研究猪流感病毒基因组结构与功能的关系、流感跨种传播的机制以及构建新型猪流感疫苗株奠定了基础。
- 彭亚平周红波李春金梅林
- 关键词：猪流感病毒拯救共转染
- H1N1亚型猪流感病毒的拯救
- 目的:利用8质粒拯救系统拯救猪流感病毒毒株 A/Swine/TianJin/01/ 2004(H1N1)(A/S/TJ/04)。方法:将猪流感病毒8个基因节段经 RT-PCR 合成 cDNA 后,分别克隆到 RNA 聚合...
- 彭亚平周红波李春金梅林
- 关键词：猪流感病毒拯救共转染
- 文献传递
- 猪流感病毒HA基因的原核表达及其ELISA检测方法的建立被引量：8
- 2007年
- 根据H1N1亚型猪流感病毒血凝素基因序列设计并合成特异性引物,从本室保存的H1N1亚型猪流感病毒中扩增信号肽和跨膜区缺失的血凝素基因,并将其克隆到原核表达载体pET-28a中,在大肠埃希菌中诱导表达。对表达蛋白进行SDS-PAGE和Western blot的结果表明,HA基因在大肠埃希菌中获得表达,产物具有免疫学活性,表达蛋白分子质量约为55 ku。表达产物经过纯化作为包被抗原建立了检测H1亚型猪流感抗体的间接ELISA方法。该方法具有较高的特异性和敏感性,重复性良好。应用该方法对2006年2 584份临床猪血清进行检测,结果显示多个地区检测猪流感抗体出现阳性,平均为20.5%。在6月、7月和12月分别出现抗体水平高峰,分别高达25.4%、25.0%和35.5%。
- 李春宋云峰金梅林陈焕春
- 关键词：猪流感病毒H1N1亚型血凝素基因间接ELISA
- 猪流感病毒间接ELISA检测方法的建立与运用
- 根据本室2004年分离的H1N1亚型猪SIV血凝素基因序列设计并合成特异性引物,以该病毒为模板扩增缺失信号肽和跨膜区的血凝素基因,将其克隆到原核表达载体pET-28a中。在大肠杆菌中获得高效。通过Western Blot...
- 李春郭学波张安定金梅林陈焕春
- 关键词：猪流感病毒间接ELISA方法血清学调查
- 文献传递
- 马源H3N8猪流感病毒的分离及分子特征
- 本研究在安徽和赤壁两个不同猪场分离到两株H3N8亚型猪流感病毒：A/swine/Chibi/01/2005(H3N8)和A/swine/Anhui/01/2006(H3N8)。2005年Science和2008年Emer...
- 涂加钢周红波蒋桃珍李春张安定郭学波邹威陈焕春金梅林
- 关键词：猪流感病毒基因测序分子特征
- 文献传递
- 猪流感病毒的分离鉴定和猪流感血清流行病学调查
- 猪流感(Swine Influenza，SI)是由猪流感病毒(Swine Influenza virus，SIV)引起猪的一种急性、高度接触性的呼吸道传染病。1918年美国首次报道了SI的爆发，而直到二十世纪二十年代末才...
- 李春
- 关键词：血凝素基因神经氨酸酶基因遗传进化树间接ELISA方法血清流行病学
- 文献传递
- 猪流感病毒H1亚型ELISA抗体检测方法在血清学调查中的应用
- 对2008年1～7月湖北、江西等地37个规模化猪场送检的2,143份种公猪、后备和经产母猪血清,采用猪流感病毒H1亚型ELISA抗体检测方法与血凝抑制试验(HI)进行检测。结果表明:所检测猪血清中存在H1亚型SIV抗体,...
- 郭学波李春张安定金梅林陈焕春
- 关键词：猪流感病毒抗体检测ELISA方法
- 文献传递
- H1N1亚型猪流感血凝素基因的克隆与序列分析
- 猪流感病毒(Swine Influenza virus,SIV)可引起猪流感(Swine Influenza, SI),是猪呼吸道综合征的原发性致病原,对猪群危害严重。SIV 的血清型目前已发现的有 H1N1、H1N2、...
- 李春金梅林宋云峰张安定周洪波陈焕春
- 关键词：猪流感血凝素克隆
- 文献传递
