杜昕颖
- 作品数：54 被引量：195H指数：8
- 供职机构：中国人民解放军更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家高技术研究发展计划国家科技重大专项更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学农业科学更多>>
- 羊布鲁氏菌外膜蛋白质的组成鉴定被引量：5
- 2009年
- 目的:通过蛋白质组技术阐明羊布鲁氏菌外膜蛋白的主要组成。方法:提取并纯化羊布鲁氏菌的外膜蛋白,应用双向电泳技术进行分离,选取双向电泳图上主要的蛋白点进行质谱分析,同时主要蛋白质点的肽指纹图谱利用Mascot在NCBInr蛋白数据库中进行检索。结果:共鉴定到67个蛋白点,主要外膜蛋白为Omp25和Omp31,其他外膜蛋白如Imp、Frp、GroEL等,功能涉及物质运输、能量代谢、应激等。结论:对主要外膜蛋白Omp25和Omp31的识别与分析不仅有助于对布鲁氏菌致病机制的研究,而且为布鲁氏菌病的疫苗研制提供靶标蛋白。
- 曲勍王玉飞徐杰钟志军乔凤杜昕颖汪舟佳黄留玉于雅琴陈泽良
- 关键词：布鲁氏菌细菌外膜蛋白质类双向电泳
- 一种便携式标本采集箱
- 本实用新型涉及一种便携式标本采集箱，所述采集箱的主体为采集箱箱体，所述采集箱箱体通过拉链装有箱盖，在所述箱体内置有采集小箱，在所述箱体的正面设有收纳袋，在所述箱体的背面设有拉杆装置和背带，在所述箱体的低部设置有供移动采集...
- 贾雷立宋宏彬郝荣章王立贵邱少富李鹏谢靖杨超杰杜昕颖张传福杨明娟
- 文献传递
- 奇异变形杆菌的核酸标识序列及检测方法
- 本发明公开了奇异变形杆菌特异的核酸标识序列及PCR检测方法与应用。其目的是提供奇异变形杆菌特异的核酸标识序列及奇异变形杆菌的定性、定量PCR检测方法和在制备奇异变形杆菌的定性、定量PCR检测试剂盒中的应用。所述奇异变形杆...
- 陈泽良赵瑾王玉飞杜昕颖乔凤张玲王勇张伶黄留玉
- 文献传递
- 布鲁氏菌GroEL蛋白的应用以及重组表达布鲁氏菌GroEL蛋白的方法
- 本发明布鲁氏菌GroEL蛋白的应用以及重组表达布鲁氏菌GroEL蛋白的方法，公开了布鲁氏菌GroEL蛋白作为保护性抗原在制备布鲁氏菌亚单位疫苗中的应用以及一种重组表达布鲁氏菌保护性抗原GroEL的过程。实验证明布鲁氏菌G...
- 王玉飞陈泽良黄留玉付思美徐杰袁静杜昕颖汪舟佳宋宏彬
- 文献传递
- 基于RNA-Seq的羊种布鲁氏菌新转录本与非编码RNA鉴定被引量：8
- 2015年
- 目的对羊种布鲁氏菌的转录本进行测序,鉴定基因组中新的转录本和非编码RNA。方法提取羊布鲁氏菌的总RNA,去除rRNA后连接接头逆转录成cDNA,PCR扩增后进行测序,以羊布鲁氏菌16M的基因组序列为参照对测序得到的reads进行比对作图,通过生物信息学方法进行新转录本和非编码RNA的鉴定。结果测序数据分析显示,reads在基因组上覆盖度较好。与现有注释基因相比,有773个基因的5′或3′端在基因组的原有位置基础上发生了延伸,并发现了16个新的转录本。根据测序结果,共鉴定出241条候选的非编码RNA(sRNA),进一步的RT-PCR验证结果显示,预测的sRNA在体外条件下有表达。结论布鲁氏菌基因组中存在除了预测以外的新的转录本,布鲁氏菌中存在非编码RNA且在不同条件下有差异表达。
- 郭英飞王玉飞龚春丽杨明娟袁久云庄妤冰柯跃华杜昕颖汪舟佳陈泽良
- 关键词：布鲁氏菌RNA-SEQSRNA
- 奇异变形菌基因组文库的构建及标识序列的发现被引量：2
- 2008年
- 目的：构建用于筛选奇异变形菌的特异序列的基因组文库，并从中筛选变形杆菌特异的标识序列。方法：提取奇异变形菌的基因组DNA，用Sau3AI部分酶切，回收酶切产物，然后与BamHI酶切的pUC19质粒连接，转化JM109，构建奇异变形菌的基因组文库。随机挑取抗性克隆，用位于质粒上的引物进行扩增，确定插入片段的大小及分布情况。DNA测序确定部分克隆中插入的序列，根据序列设计引物，分析这些序列在奇异变形菌临床分离株中的分布，验证序列的特异性。结果：成功构建了奇异变形菌的基因组文库，库容量达到1.1×10^5CFU。阳性克隆的比例为95％，插入片段大小主要分布在200～500bp的范围。对其中14个克隆进行了序列测定，其中5个片段与已知序列有一定的同源性，另外9个与已知序列没有同源性，特异性分析发现了几个较好的标识序列。结论：成功构建了奇异变形菌的基因组文库，利用该文库发现了奇异变形菌特异的序列。
- 赵瑾陈泽良王玉飞乔凤杜昕颖张伶黄留玉
- 关键词：基因组文库
- 布鲁氏菌vjbR突变株的构建及其毒力表型分析被引量：4
- 2010年
- 为分析vjbR在布鲁氏菌毒力中的作用,构建了vjbR的突变株和互补株,并分析了它们在巨噬细胞和小鼠体内的存活能力。利用同源重组的方法,用卡那抗性基因替换了16M的vjbR(BMEII1116)基因,得到了vjbR的缺失突变株16M△vjbR。将vjbR基因的ORF克隆到pMD18-T载体中,然后将其转入到突变株16M△vjbR中得到互补株16M△vjbR-C。用16M、16M△vjbR和16M△vjbR-C侵染巨噬细胞和感染小鼠,比较分析它们在巨噬细胞内的生存能力及小鼠毒力。研究结果表明vjbR突变株在巨噬细胞和小鼠体内的毒力减弱,存活能力下降,说明vjbR基因是布鲁氏菌16M的毒力相关基因,对于布鲁氏菌建立慢性感染是必要的。
- 付思美白耀霞曲勍徐杰王玉飞钟志军于爽王同坤杨毅陈燕芬汪舟佳杜昕颖黄留玉甄清陈泽良
- 关键词：布鲁氏菌毒力
- 布鲁氏菌鞭毛蛋白BMEII1112在制备布鲁氏菌亚单位疫苗中的应用
- 本发明提供了一种布鲁氏菌鞭毛蛋白BMEII1112在制备布鲁氏菌亚单位疫苗中的新用途。实验结果表明BMEII1112重组蛋白和弗氏佐剂联合免疫可诱导产生特异性的抗体，激发细胞免疫，并对布鲁氏菌具有较好的免疫保护效果，可用...
- 王玉飞陈泽良黄留玉袁静宋宏彬杜昕颖汪舟佳柯跃华
- 文献传递
- 布鲁菌进化和分类学研究进展被引量：21
- 2011年
- 布鲁菌属革兰氏阴性兼性胞内寄生菌,能感染多种宿主动物和人。该属可分为6个典型种,包括羊种、牛种、猪种、沙林鼠种、绵羊附睾种以及犬种布鲁菌等。此分类是基于其致病性以及宿主偏好性的差异划分。尽管6个种通过传统表型试验能区分,但布鲁菌种内采用DNA-DNA杂交证明DNA同源性高度一致(相似性大于90%)。因此有人提议布鲁菌由单一种组成,即布鲁菌属中只有羊种布鲁菌,其他种都是羊种菌的生物亚型之一。然而基于其他分子技术的基因分型表明其DNA多态性表现明显,说明目前对这个种的分型还是比较准确。而最近分离的海洋种布鲁氏菌分离株(鳍型和鲸型)采用传统分型标准和一些特异的分子标记也证明这种分型比较正确。本文对目前布鲁菌种属进化和分类学进行综述,希望对研究其进化和分类有所帮助。
- 钟志军于爽徐杰王玉飞白耀霞陈燕芬付思美王同坤汪舟佳杜昕颖彭广能黄克和陈泽良
- 关键词：布鲁氏菌进化分类学
- 基于新型DNA结合染料的实时荧光定量PCR检测方法及其应用
- 本发明公开了一种基于新型DNA结合染料的实时荧光定量PCR检测方法及其应用。该方法是以SYTO为荧光染料进行的实时荧光定量PCR检测方法。实验结果显示，SYTO家族的染料比SYBR Green I更适用于荧光染料实时定量...
- 陈泽良王玉飞钟志军徐杰杜昕颖汪舟佳孙岩松黄留玉
- 文献传递
