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疑患EMS/AHPNS对虾中检出黄头病毒的一种新株型被引量：8: 2014年; 对2012—2013年从河北、福建和广东3个对虾养殖场采集的12份发生疑似早期死亡综合征/急性肝胰腺坏死综合征(EMS/AHPNS)的样品,采用组织病理学方法、套式RT-PCR检测方法以及快速灵敏检测试剂盒进行了检测。三地来源的养殖对虾样品症状均表现为肝胰腺颜色变淡,部分出现萎缩,空肠空胃,腹节肌肉略微白浊;组织病理切片结果表明,患病对虾肝胰腺血细胞浸润,肝胰腺盲管上皮细胞脱落,继发性细菌感染,淋巴器官和血淋巴细胞内存在核固缩、破裂和细胞质包涵体。按世界动物卫生组织(OIE)手册的套式RT-PCR方法检测,结果显示,黄头病毒(Yellow head virus,YHV)目的产物的阳性样品检出率为66.7%,该方法对这些样品的灵敏度可能很低。目的产物测序后经NCBI Blast,与已报道的YHV相似性为76.5%—89%;系统发育树显示这3个来源的样品位于同一个分支,与已知的YHV/鳃联病毒(gill-associated virus,GAV)株均不相同,其亲缘关系与YHV较近,而与GAV较远。用新研发的YHV快速高灵敏检测试剂盒检测,结果表明,所有样品均为YHV强阳性。以上表明患AHPNS的养殖对虾中存在一种YHV的新株型的感染,这也是我国首次检测到YHV的感染。; 刘群黄倢杨昊霖杨冰刘笋王海亮王勤涛刘飞张庆利; 关键词：新株型 NESTED-PCR

虾类偷死野田村病毒现场快速检测引物组及试剂盒: 本发明涉及一种对虾偷死野田村病毒的现场快速检测引物组及高灵敏检测试剂盒。本发明的引物组包括6条引物，本发明的高灵敏检测试剂盒包括：采样管、内装蒸馏水的漂洗管、内装TE缓冲液的核酸变性管、内装扩增反应液和染料的扩增检测管、...; 张庆利黄倢杨昊霖刘爽; 文献传递

对虾肝胰腺细小病毒滚环扩增检测方法的建立: 2014年; 根据对虾肝胰腺细小病毒(HPV)保守基因序列,设计特异性的锁式探针及其扩增引物,优化反应条件,建立了肝胰腺细小病毒超分支滚环扩增检测方法。实验中采用一步法连接,探针在Taq DNA连接酶作用下,58℃连接40 min、62℃扩增30 min便可以扩增出明显条带。反应特异性验证实验表明,该体系能够特异性地检测出HPV,而不与供试的其他对虾病原发生交叉反应;灵敏度分析结果显示该方法的检测极限为105 copies/μl,与PCR检测方法相比,一步法连接的滚环扩增的灵敏度低两个数量级。该方法反应过程中温度变化次数少,基本都在等温条件下进行,不需要PCR仪,可发展成为在简便实验条件下使用的简易检测方法。; 王勤涛张庆利杨昊霖刘天齐刘笋杨冰黄倢; 关键词：对虾肝胰腺细小病毒滚环扩增

异育银鲫鱼卵致病性水霉的形态及ITS区分子鉴定: 鱼类人工繁殖孵化过程中,水霉病危害很严重,常常造成重大经济损失。在患有水霉病的鲫卵上分离一株致病性菌株YHL,通过形态学和分子生物学形结合的方法对其进行了鉴定。结果显示,菌株YHL菌丝为透明管状结构,中间无横隔,分枝较少...; 杨昊霖欧仁建曹海鹏杨先乐; 关键词：水霉病 ITS序列; 文献传递

对虾白斑综合征病毒和黄头病毒等温扩增检测方法的建立及应用: 近年来，水产业迅猛发展，已逐渐成为中国农业中发展较快的产业之一，在全球水产总量中占有举足轻重的地位。但在我国水产养殖规模不断壮大的同时，各种病害也随之而来。对虾养殖业作为我国海水养殖业的支柱产业之一，也深受多种病害困扰，...; 杨昊霖; 关键词：对虾白斑综合征病毒环介导等温扩增技术流行病学调查; 文献传递

黄颡鱼卵致病性绵霉的分离鉴定与系统发育分析: 从湖北省仙桃市沙湖水产技术推广站患水霉病的黄颡鱼卵上分离了一株致病性丝状真菌ORJ,并对菌株ORJ的分类地位进行了分析。实验结果表明,菌株ORJ游动孢子囊棍棒状,侧生,呈聚伞形排列；游动孢子从孢子囊中释放后立即成团聚集停...; 杨昊霖欧仁建曹海鹏许佳露杨先乐; 关键词：水霉病系统发育

一种简易高效水霉病原菌的保藏方法: 本试验建立了一种简易高效的致病性寄生水霉和绵霉保藏方法,即先将诱生菌丝的油菜籽放入灭菌的10mL离心管,接着在离心管中加入9.8mL的无菌蒸馏水,或加入8.8mL的无菌蒸馏水和1ml的液体沙氏培养基,最后置于4℃保藏。实...; 欧仁建曹海鹏杨昊霖叶鑫杨先乐; 关键词：水霉保藏; 文献传递

黄颡鱼卵致病性绵霉的分离鉴定与系统发育分析: 从湖北省仙桃市沙湖水产技术推广站患水霉病的黄颡鱼卵上分离了一株致病性丝状真菌ORJ,并对菌株ORJ的分类地位进行了分析。实验结果表明,菌株ORJ游动孢子囊棍棒状,侧生,呈聚伞形排列;游动孢子从孢子囊中释放后立即成团聚集停...; 欧仁建曹海鹏杨昊霖杨先乐许佳露; 关键词：水霉病系统发育; 文献传递

一种简易高效水霉病原菌的保藏方法: 本试验建立了一种简易高效的致病性寄生水霉和绵霉保藏方法，即先将诱生菌丝的油菜籽放入灭菌的10mL离心管，接着在离心管中加入9.8mL的无菌蒸馏水，或加入8.8 mL的无菌蒸馏水和1ml的液体沙氏培养基，最后置于4℃保藏....; 杨昊霖欧仁建曹海鹏叶鑫杨先乐; 关键词：水霉保藏

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杨昊霖