杨春虎
- 作品数：5 被引量：17H指数：2
- 供职机构：浙江大学医学院浙江省生物电磁学重点研究实验室更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金浙江省卫生高层次创新人才培养工程项目国家教育部博士点基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 自体骨髓CD34^+干细胞移植治疗严重肢体缺血的实验研究被引量：13
- 2005年
- 目的探讨自体骨髓干细胞移植是否能增加缺血肢体的新生血管形成。方法抽取5只犬骨髓20ml,经Ficoll分离单核细胞,免疫磁珠分离CD34+细胞,在体外经血管内皮细胞生长因子诱导分化为内皮细胞,并经vWF抗染色鉴定。建立犬双侧肢体缺血动物模型,将Dil荧光标记的内皮细胞植入缺血肢体中。结果CD34+干细胞移植4周后,激光共聚焦显微镜证实缺血肢体中移植的自体骨髓干细胞参与了新生血管形成;动脉造影见干细胞移植的肢体侧枝循环明显增加,微血管密度检测移植组也明显高于对照组(12.0±2.8vs.5.0±1.6/每高倍镜视野,t=4.17,P<0.05);干细胞移植的肢体ABI平均为0.58±0.14,对照肢体ABI平均为0.32±0.11,差异有统计学意义(t=2.95,P<0.05)。结论自体骨髓干细胞移植能有效的促进缺血组织内的新生血管形成。
- 张鸿坤张楠吴丽花金炜李鸣封华赵海格陈旭东杨春虎
- 关键词：骨髓自体骨髓干细胞移植CD34^+细胞肢体缺血
- Bid蛋白在内质网和线粒体相关的凋亡过程中的作用被引量：3
- 2007年
- 目的研究 Bid 蛋白在内质网和线粒体相关的凋亡过程中的作用。方法以高三尖杉酯碱(HHT)诱导人骨髓增生异常综合征(MDS)细胞系 MUTZ-1细胞凋亡,用流式细胞术检测细胞凋亡率,RT-PCR 及 Western blot 法检测线粒体和内质网凋亡途径的相关基因及蛋白表达,激光共聚焦显微镜观察用药前后钙离子浓度和线粒体膜电位的改变以及凋亡相关蛋白 Bid 的转位。结果 0.05μg/ml HHT 作用后4 h胞质内 Ca^(2+)浓度增高,12 h达高峰,其后开始下降。HHT 作用后线粒体膜电位持续下降。内质网应激相关因子基因及蛋白表达增强,12 h达到高峰,其后开始下降。激光共聚焦显微镜观察发现 Bid 蛋白用药前位于内质网,用药12 h后转位至线粒体。结论 HHT 可以诱导 MDS 细胞凋亡,内质网和线粒体相关的凋亡途径在其中发挥了重要的作用,Bid 蛋白可能是两种凋亡途径的交叉点。
- 胡洁何冬花高良杨春虎蔡真
- 关键词：线粒体细胞凋亡MUTZ-1细胞
- 过氧化氢对人晶状体上皮细胞内细胞质膜微囊蛋白的影响
- 2007年
- 目的探讨过氧化氢（H2O2）对人晶状体上皮细胞的细胞质膜微囊蛋白（CP）及磷酸化CP-1分布与表达的影响。方法给予人晶状体上皮细胞（SRA01／04）不同浓度及不同时间点的H2O2刺激。用激光共聚焦显微镜和免疫荧光显微镜观察CP及磷酸化CP-1的分布。通过免疫印迹试验观察CP表达水平的变化以及磷酸化CP—1的表达。结果通过激光共聚焦显微镜和荧光显微镜，观察到人晶状体上皮细胞的质膜和细胞质内含有丰富的CP；当给予细胞H2O2刺激后，细胞质内CP的分布增多；当刺激时间达到1h，细胞膜被破坏，但仍可观察到CP的分布情况。此外，H2O2的刺激可以使CP-1发生磷酸化。免疫印迹试验发现，随着H2O2作用时间的延长和刺激浓度的升高，细胞质膜和细胞总蛋白质的CP表达水平呈下调趋势。结论H2O2刺激人晶状体上皮细胞后，CP重新分布并可能破坏了细胞质膜微囊（caveolae）的结构，使得细胞的CP表达下调。细胞质膜微囊和CP可能在人晶状体上皮细胞中具有重要作用。
- 金红颖姚克马进李宏武汤霞靖杨春虎
- 关键词：白内障上皮细胞细胞质膜微囊蛋白过氧化氢
- H_2O_2对小窝蛋白在人晶状体上皮细胞中分布与表达的影响被引量：1
- 2007年
- 目的观察以H_2O_2刺激晶状体上皮细胞(LECs)后对细胞活性的影响及小窝蛋白(caveolin)在LECs膜及胞浆内的分布和表达量的改变。方法用1mmol/LH2O2刺激LECs不同时间,MTT法观察细胞活性;激光共聚焦显微镜观察caveolin在细胞膜和胞浆内的分布;Western-blot法检测caveolin表达量的变化。结果H2O2作用时间越长,细胞活性越低;对照组与试验组的差异有显著统计学意义。激光共聚焦显微镜观察到人LECs有丰富的caveolin;无刺激时主要分布在膜上;刺激后在膜及胞浆内的分布增多。Western-blot法发现H2O2作用后,caveolin的表达量减少。结论H2O2对人LECs的活性产生影响,并导致细胞caveolin重新分布、表达量减少。
- 金红颖姚克马进杨春虎李宏武汤霞靖
- 关键词：白内障晶状体上皮细胞小窝蛋白H2O2
