杨玲
- 作品数:11 被引量:28H指数:4
- 供职机构:中国科技大学更多>>
- 发文基金:安徽省科技攻关计划安徽省自然科学基金更多>>
- 相关领域:医药卫生化学工程生物学更多>>
- 人α-干扰素单克隆抗体的研制及应用
- 宋礼华刘兢杨玲刘亚萍傅永标
- 单抗亲和层析法纯化α-干扰素是八十件代后期发展起来的生物高技术,其技术原理是用单抗对α-干扰素的高度特异性结合能力,通过特异的免疫吸附,洗脱技术纯化α-干扰素,适合于重组α-干扰素和天然白细胞干扰素的生产,属于细胞生物学...
- 关键词:
- 关键词:单克隆抗体生产技术
- 单克隆抗体亲和层析纯化人白细胞干扰素的研究被引量:2
- 1996年
- 本文报道了一种单克隆抗体亲和层析纯化人白细胞干扰素的方法.我们采用自己研制的α-干扰素单克隆抗体亲和层析柱进行了人白细胞干扰素较大规模纯化的研究,结果表明,其活性回收率平均达106.9%以上,经SDS-PAGE银染法鉴定,白细胞干扰素的大多数活性成分均被吸附和回收,所得的干扰素蛋白成分主要位于分子量15000~21000D的干扰素活性区域,产品的纯度大大提高,比活可达8×106IU/mg;ELISA夹心法测定,每毫升洗脱样品中鼠源IgG含量小于4ng,我们所建立起的亲和层析法操作简便,亲和吸附和洗脱条件温和,可适用于大规模的白细胞干扰素的纯化.
- 宋礼华王荣海付永标杨玲杜贤宇徐键
- 关键词:单克隆抗体人白细胞干扰素
- 抗重组人干扰素-α2b单克隆抗体的制备与应用被引量:8
- 1998年
- 人α型IFN治疗慢性乙型肝炎、丙型肝炎及白血病有显著疗效。rHuIFN-α2b因其副作用小,疗效高,因而更为广泛使用。其生产过程中亲和层析纯化至关重要。为此我们制备了高特异性单克隆抗体3D9McAb用于分离纯化重组人干扰素α-2b(rHuIFN-α2b),现报道如下。1 材料和方法1.1 rHuIFN-α2b抗原制备 本所自制,用亲和层析柱纯化,比活2.0×10~8IU/mg,SDS-PAGE纯度达99%。1.2 单抗的筛选和制备 取8周龄雌Balb/c小鼠,用适当处理过的抗原免疫5次后进行细胞融合。ELISA法筛选,有限稀释法4次克隆后获得3D9细胞扩大培养,诱生腹水。
- 宋礼华杨玲杜贤宇王荣海傅永标
- 关键词:干扰素单克隆抗体
- 三种α-干扰素亚型结构与功能的研究被引量:4
- 2004年
- 目的 利用自制的 6株单克隆抗体对α2a 干扰素、α2b 干扰素和α1b 干扰素的结构与功能进行分析。方法 采用细胞ELISA法、抗增殖活性和抗病毒活性等试验。结果 对干扰素抗病毒活性有影响的单克隆抗体对干扰素抗增殖活性也有影响 ,而对干扰素抗增殖活性有影响的 ,不一定对干扰素抗病毒活性有影响。结论 干扰素表面细胞受体结合位点与单克隆抗体结合位点是分开的。干扰素的抗病毒活性位点也是它的抗增殖活性位点 ,而干扰素的抗增殖活性作用的发挥可能还有其它位点的参与 ;单克隆抗体的中和活性不是通过阻断干扰素分子与细胞表面受体结合造成的。
- 杜贤宇杨玲周业亭徐振山宋礼华
- 关键词:Α-干扰素Α1B-干扰素抗病毒活性蛋白质结构
- 干扰素抗体产生规律性及对疗效影响初探被引量:4
- 2000年
- 李家斌姚阳李旭余鑫之杨玲宋礼华
- 关键词:干扰素抗体产生疗效乙型肝炎
- 干扰素合并氮烯咪胺治疗恶性黑色素瘤被引量:3
- 1999年
- 目的 :评价大剂量干扰素α 2b(IFNα 2b)静脉滴注合并氮烯咪胺 (DTIC)方案治疗 12例恶性黑色素瘤的疗效、毒性反应和干扰素抗体的阳性率。方法 :用IFNα 2b( 18± 3 )MU/d ,DTIC 2 0 0mg/d ,iv ,5d/周 ,用 3周 ;第 4周用IFNα 2b 6MU ,im ,qd ,用 2周。用免疫酶标法 (ELISA)和抗病毒中和法分别检测患者血清中的干扰素结合和中和抗体。结果 :12例中 10例可评价近期疗效 ,获PR 4例 ( 4 0 % ) ,MR 2例 ( 2 0 % ) ,NC 3例 ( 3 0 % ) ,PD 1例( 10 % )。无复发生存期 >2年 1例 ,>1年 4例 ,>0 .5年 2例。 12例患者仅 1例结合抗体阳性 ,余结合及所有中和抗体均阴性。本方案毒性反应主要为骨髓抑制、发热、胃肠道反应、肝功能受损和神经系统毒性 ,Ⅲ级为 66.67% ,Ⅳ级为 2 5 %。结论 :IFNα 2b加DTIC方案治疗晚期恶性黑色素瘤近期疗效 。
- 姚阳林峰宋礼华彭万仁杨玲郝吉庆
- 关键词:恶性黑色素瘤干扰素氮烯咪胺干扰素抗体
- 影响干扰素治疗慢性乙型肝炎疗效因素分析被引量:2
- 1997年
- 为了解重组干扰素α2b治疗慢性乙型肝炎疗效的影响因素,对住院治疗的108例慢性乙型肝炎进行研究。治疗前所有病例HBsAg、HBeAg、HBVDNA均阳性,ALT均大于正常值3倍。结果发现,总有效率女性高于男性(P<005);病程短于3年者明显优于长于3年者(P<001);CAH明显高于CPH(P<001)。9例治疗无效者,2例检出前C区变异;1例野生株和变异株混合感染者疗程结束后表现为无效。47例治疗无效者(包括部分复发者),检出干扰素中和抗体2例;结合抗体6例。治疗期间有类流感症状者显效率明显高于无反应者(P<001);总有效率高于无反应者(P<005)。治疗中ALT升高大于基值2倍以上者疗效更好(P<001)。结果表明,干扰素治疗慢性乙型肝炎疗效的影响因素较多。
- 李家斌余鑫之李旭吴锐杨玲宋礼华
- 关键词:干扰素慢性乙型肝炎
- 抗心肌肌钙蛋白T单抗杂交瘤细胞株的建立及鉴定
- 1999年
- 以牛心肌为原料,提取纯化得牛cTnT,并经特定处理,免疫BALB/C 小鼠,取其脾细胞与SP2/0 融合,获得两株抗cTnT 细胞3B2 和3D6 。Ig 亚类均是IgG1 。相加试验表明可识别不同表位,为建立测定cTnT方法奠定了基础。
- 宋礼华梁俊杨玲杜贤宇姜先荣杨杰傅惠英
- 关键词:杂交瘤CTNT
- 三种α干扰素亚型单抗的特性鉴定被引量:5
- 2003年
- 采用中和活性法、免疫印迹法 ,通过α1b、α2b、α2a干扰素与自制的 6株单抗反应的结果差异 ,对 3种干扰素加以鉴别。中和活性结果表明 ,AK1单抗只与IFN α1b有中和活性 ,AK2单抗只与IFN α2有中和活性 ,而AK4单抗与IFN α1b和IFN α2b皆有中和活性。免疫印迹结果表明 ,AK1单抗只与IFN α1b有印迹反应 ,AK2与IFN α2有印迹反应 ,而AK4单抗与IFN α1b和IFN α2b皆有印迹反应 ,与IFN 2a无印迹反应。AK1或AK2能够鉴别IFN α1b与IFN α2 ,AK4能够鉴别IFN α2a与IFN α2b。
- 杨玲饶春明杜贤宇徐振山周业亭刘长暖宋礼华
- 关键词:干扰素-Α单克隆抗体
- 免疫-PCR法检测儿童尿中生长激素水平被引量:2
- 2003年
- 目的:建立超灵敏度的免疫-PCR法检测尿中生长激素的水平。方法:在经戊二醛处理的PCR管中完成双抗炎心酶免疫反应,通过PCR扩增加接在抗原-抗体复合物上的DNA分子,琼脂糖电泳及扫描判断结果。结果:处理后的PCR管完全能够进行免疫反应,其灵敏度可达0.1pg/ml左右。琼脂糖电泳及扫描结果表明,30例正常青春发育期前儿童与10例经常规生长激素激发试验诊断为生长激素缺乏(growth hormone-deficient,GHD)的儿童,12h夜尿生长激素(GH)水平有明显差异。结论:此法的敏感度比酶标法高10^3-10^4倍,适于儿童尿中微量GH水平的检测。
- 杨玲杜贤宇等
- 关键词:免疫-PCR生长激素