梁瑛娟
- 作品数：7 被引量：12H指数：2
- 供职机构：中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所更多>>
- 发文基金：黑龙江省科技计划项目国家自然科学基金黑龙江省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 原子力显微镜在病毒学研究中的应用被引量：1
- 2002年
- 赵铁强国立秋梁瑛娟董申
- 关键词：原子力显微镜病毒学研究
- 原子力显微镜在生物学研究中的应用进展被引量：6
- 2002年
- 原子力显微镜(atomicforcemicroscope,AFM)具有原子级分辨率,能够在生理条件下对生物样品进行观察。本文综述了AFM的原理及技术要点,举例说明了它在核酸、蛋白质、微生物及细胞等领域的应用进展。相信AFM必将在生物学研究中起到越来越重要的作用。
- 赵铁强周为民梁瑛娟董申
- 关键词：原子力显微镜生物学研究
- 柯萨奇B1病毒VP1基因在大肠杆菌中的表达
- 2002年
- 目的 在大肠杆菌中表达柯萨奇 B1(CVB1)病毒 VP1蛋白。方法 用限制性酶切方法将 CVB1VP1基因从 p MD18-T-VP1上切下 ,连接至 p QE3 0构建原核表达系统 p QE3 0 -VP1。经酶切和 PCR验证后转化至大肠杆菌 BL2 1(DE3 ) ,用 IPTG诱导目的基因表达。SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳和 Western-blot检测 VP1蛋白的表达。结果 酶切、PCR证明构建的原核表达系统携带方向正确的 CVB1VP1基因。SDS-PAGE和 Western-blot实验均可于 3 3 .0 k Da处见到目的条带。结论
- 赵铁强钟照华田野韩福生梁瑛娟谷淑燕皮国华孟繁超
- 关键词：柯萨奇病毒B大肠杆菌原核表达VP1基因
- 柯萨奇B1组病毒基因疫苗的构建和实验应用
- 柯萨奇B组病毒(CVB)是人类病毒性心肌炎的主要病原,目前尚缺乏有效的治疗措施。基因疫苗的出现为柯萨奇B组病毒感染的防治开辟了新的途径。 1 方法 1.1 基因疫苗的构建和鉴定:将CVB1病毒接种Vero细胞,培养收获后...
- 赵铁强田野梁瑛娟钟照华孟繁超皮国华
- 文献传递
- 柯萨奇B1病毒VP1基因序列分析被引量：1
- 2002年
- 赵铁强周为民李伯军段淑敏张素香赵新生温瑞福梁瑛娟皮国华
- 关键词：柯萨奇VP1基因
- 柯萨奇B1病毒VP1基因片段原子力显微镜成像分析被引量：3
- 2002年
- 用原子力显微镜(AFM)观察线性DNA并探讨其成像条件。用RT-PCR技术扩增柯萨奇B1病毒VP1基因DNA片段,纯化回收后配制成含和不含1mmol/LMgCl2的水溶液,DNA终浓度为100μg/ml。分别取20μl滴加在新鲜解理的云母片上,吸附1min,用滤纸吸去残液,氮气吹干,在室温下采用MultiModeAFMNanoscopeⅢa的敲击模式成像。同时比较新制备的和多次使用过的探针所获得图像的质量,对两种探针进行扫描电镜观察。电泳证明获得了0.83kb的VP1基因DNA线性片段。Mg2+存在时,DNA在云母片上吸附延展较好,所获图像质量优于无Mg2+时。新制备的探针较多次使用过的探针所获图象分辨率更高。DNA分子的表观宽度为18±2.9nm,高度为0.8±0.2nm。说明AFM能以高分辨率直接观察DNA分子,Mg2+的存在和高质量的探针有助于获得理想的图象。
- 赵铁强周为民国立秋李伯军梁瑛娟钟照华田野董申
- 关键词：原子力显微镜成像分析
- 柯萨奇B1病毒VP1基因DNA免疫的研究被引量：1
- 2002年
- 目的 构建柯萨奇 B1病毒 (CVB1)的 DNA疫苗 ,评价其免疫学性状。方法 将重组质粒 p MD18-T- VPl中的 CVB1VP1基因亚克隆至 p CEP4载体 ,构建真核表达系统 p CEP4 - VP1作为 DNA疫苗 ,经酶切、PCR和测序鉴定后转染至 He L a细胞 ,用间接免疫荧光法检测 CVB1抗原的体外表达。提纯制备 p CEP4 - VP1接种 BAL B/ C小鼠 ,取血清用 EL ISA法检测抗 CVB1Ig M和 Ig G,用 51 Cr释放法测定 CTL反应。结果 酶切、PCR和测序证明 VP1DNA疫苗构建正确 ;转染 p CEP4 - VP1的 He L a细胞中可见到荧光标记 ,提示表达了 VP1蛋白 ;接种 p CEP4 - VP1的小鼠可检测到抗 CVB1的 Ig M和 Ig G,并能产生较强的特异性 CTL反应。结论 p CEP4 -VP1可作为
- 赵铁强田野钟照华梁瑛娟韩福生钟学宽皮国华孟繁超
- 关键词：DNA疫苗免疫应答肠道病毒
