梁艺瑜
- 作品数：5 被引量：21H指数：3
- 供职机构：华南农业大学兽医学院农业部兽用疫苗创制重点实验室更多>>
- 发文基金：广东省科技计划工业攻关项目NSFC-广东联合基金国家肉鸡产业技术体系建设专项更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 不同病变型J亚群禽白血病病毒LTR启动子序列分析及活性比较被引量：7
- 2010年
- 从ALV-J中国地方分离株SCAU-HN06株（血管瘤病变型）、NX0101株和JS-nt株（骨髓瘤病变型）病毒的细胞培养物提取前病毒DNA,通过PCR扩增各毒株的LTR并克隆,随后进行测序分析。与国内外ALV-J参考毒株LTR序列比较发现：国内地方分离株与英国ALV-J原型株HPRS-103和美国ALV-J原型株ADOL-7501的LTR核苷酸序列相似性为88.0%~97.2%;LTR中的U5区及R区具有较高的保守性,而U3区内存在较大差异。将不同病变型ALV-J的LTR片段分别插入pCAT-basic载体CAT报告基因5＇端。用所得的重组报告基因表达质粒转染DF-1细胞,48h后通过测定转染细胞中的CAT表达量来评价LTR启动子的活性。结果表明,SCAU-HN06株与骨髓瘤病变型ALV-J（JS-nt株,NX0101株）LTR启动子活性差异不显著。
- 张贺楠齐岩史伟伟梁艺瑜刘红波曹伟胜廖明
- 关键词：J亚群禽白血病病毒长末端重复序列启动子活性
- J亚群禽白血病病毒双抗体夹心ELISA检测方法的建立被引量：8
- 2013年
- 本研究利用J亚群禽白血病病毒(subgroup J avian leukosis virus,ALV-J)gp85单因子血清纯化后的抗体成功建立了检测ALV-J抗原的双抗体夹心ELISA方法(DAS-ELISA)。结果表明,该方法具有良好的特异性、重复性和稳定性,对ALV-J抗原的最小检出量为0.165μg/mL。用该法对48份临床血浆样品进行检测,结果与PCR方法的符合率达到85.2%。
- 廖亚琳梁艺瑜王秀珑冯敏谭利强曹伟胜
- 关键词：双抗体夹心ELISA
- 血管瘤禽白血病病毒FJ0610株的分离与鉴定
- 2012年
- 为了解禽白血病病毒在商品蛋鸡中的流行情况,试验采用病理剖检、聚合酶链式反应(PCR)以及间接免疫荧光试验(IFA)等方法对送检的疑似禽白血病病毒感染的商品蛋鸡进行了病毒分离与鉴定,并对分离株的致瘤相关基因gp85基因进行测序,与国内外各亚群禽白血病病毒进行对比。结果表明:分离、鉴定到1株J亚群血管瘤禽白血病病毒,命名为FJ0610;分离株gp85基因核苷酸序列同源性在11.5%～94.5%之间,其中与血管瘤禽白血病毒株ZH-08株同源性最高,而与E亚群毒株同源性最低;基于gp85核苷酸序列的系统进化分析表明FJ0610株的gp85序列与ZH-08株的亲缘关系最近。
- 刘红波冯少珍史伟伟梁艺瑜王小芬李育豪廖明辛朝安曹伟胜
- 关键词：J亚群禽白血病病毒
- 血管瘤病变型J亚群禽白血病病毒E元件缺失突变体的构建
- 2010年
- 为构建血管瘤病变型J亚群禽白血病病毒E元件缺失突变体病毒,本研究利用融合PCR方法将E元件缺失,获得含有缺失性突变体病毒前病毒全基因组的重组质粒pSCAU-HN-△E。将该重组质粒纯化后转染DF-1细胞,并连续传代,最终获得缺失病毒rSCAU-HN-△E。该毒株感染的DF-1细胞可被ALV-J特异性单克隆抗体JE9所识别,并且体外增殖性能稳定。该缺失性病毒的获得为E元件功能的研究奠定了基础。
- 张贺楠齐岩史伟伟梁艺瑜刘洪波张小桃曹伟胜廖明
- 关键词：J亚群禽白血病病毒血管瘤感染性克隆
- J亚群禽白血病病毒gp85单因子血清的制备被引量：6
- 2011年
- J亚群禽白血病病毒(ALV-J)在中国普遍存在,严重危害养禽业,暂时尚无有效预防、治疗禽白血病的措施,只能通过净化控制。因此,研究一种低成本、易推广的检测方法对防控此病非常重要。用DF-1细胞接种病毒,以细胞基因组为模板,通过巢式PCR方法扩增出941bp的含酶切位点的ALV-J特异性基因gp85基因序列,连接于pET32a(+)载体上,实现gp85蛋白在宿主菌BL21的表达,以切胶回收方式纯化蛋白,成功获得约52ku的重组融合蛋白,免疫新西兰兔,制备gp85单因子抗血清,Dot-ELISA检测抗体效价。结果显示,纯化所得蛋白质具有良好抗原性,制备的抗血清效价高于1.024×105。本试验通过较简便、低耗的方法获得高效单因子血清,为抗血清的制备提供参考,为ALV-J gp85蛋白的研究、ALV-J特异性检测方法的研制打下基础,对ALV-J的净化有重要意义。
- 梁艺瑜冯少珍史伟伟刘红波王小芬李育豪廖明曹伟胜
- 关键词：J亚群禽白血病病毒GP85基因蛋白表达
