毛用敏
- 作品数：122 被引量：292H指数：9
- 供职机构：天津市胸科医院更多>>
- 发文基金：天津市卫生局科技基金天津市自然科学基金天津市科技发展战略研究计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 奥美拉唑对氯吡格雷抗血小板作用的影响及CYP2C19基因多态性的作用被引量：8
- 2012年
- 目的探讨质子泵抑制剂奥美拉唑对于氯吡格雷抗血小板聚集作用的影响，并研究CYP2C19的基因多态性与氯吡格雷抗血小板聚集作用的关系。方法将414例诊断为急性冠脉综合征且进行介入治疗的患者给予阿司匹林和氯吡格雷双联抗血小板治疗，术前及术前7天分别测定血小板聚集率（plateletaggregation，PA）后分别联用奥美拉唑（224例）和西咪替丁（190例）治疗，14天后再测定PA；应用聚合酶链反应一限制性片段长度多态性和DNA测序的方法对CYP2C19＊2（681G／A）进行基因分型，分析基因多态性对氯吡格雷抗血小板作用的影响。结果奥美拉唑组和西咪替丁组患者术前的PA比较差异无统计学意义，在术后7天和术后21天两组相同基因型患者PA比较差异无统计学意义，但术后7天、21天两组CYP2C19＊2GG型和GA型患者的PA明显小于AA型患者的PA，奥美拉唑组GG、GA、AA基因型术后7天的PA分别为（37．1±9．2）％、（37．4±9．4）％vs（45．6±8．9）％，术后21天的PA为（22．0±8．O）％、（22．6±7．2）％、（36．9士9．2）％，西眯替丁组GG、GA、AA基因型患者术后7天的PA为（38．4±8．3）％、（37．1±7．3）％、（48．5±7．2）％，术后21天的PA为（24．6±7．4）％、（22．9±7．7）％、（36．8±8．9）％（P〈O．05）。结论奥美拉唑不影响氯吡格雷抗血小板效应。CYP2C19＊2的AA基因变异影响氯吡格雷对血小板的抑制效果。
- 卢凤民佟子连毛用敏吴冬燕许静
- 关键词：氯吡格雷奥美拉唑遗传多态性
- CETP基因-629C／A多态性对阿托伐他汀钙调脂效应及长期临床预后的影响被引量：4
- 2013年
- 目的分析中国天津地区汉族冠状动脉性心脏病（coronary heart disease，CHD）患者胆固醇酯转运蛋白（cholesteryl ester transfer protein，CETP）基因-629C／A多态性，从药物基因组学角度探讨遗传因素对于阿托伐他汀钙调脂疗效以及患者长期预后的影响，为个体化治疗提供理论依据。方法研究对象为经冠状动脉造影检查证实的CHD患者232例。应用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性方法检测其CETP-629C／A基因型，用酶联免疫吸附测定法（enzyme—linked immunosorbent assay，ELISA）测定血清CETP含量。所有患者接受阿托伐他汀钙20mg／d调脂治疗1年后复查血脂，随访12～23个月，记录MACE事件（包括死亡、非致死性心肌梗死、再次血运重建和卒中）。采用Kaplan—Meier生存曲线Log—rank检验分析不同基因型对于生存率的影响。结果A突变等位基因频率为0．475，C等位基因频率为0．525；CC、CA、AA基因型相比，血清高密度脂蛋白胆固醇（high—density lipoprotein cholesterol，HDL—C）水平呈升高趋势，血清CETP水平呈降低趋势，但差异均无统计学意义（F=0．893，P=0．411；F=1．279，P=0．282）。血清HDL-C水平与CETP浓度呈负向变化趋势，但其相关性无统计学意义（r=0．151，P=0．081）。阿托伐他汀钙20mg／d调脂治疗1年后，CC基因型携带者低密度脂蛋白胆固醇（low—density lipoprotein cholesterol，LDL-c）水平下降最多，达35．41％，CA基因型次之，为18．84％，AA基因型下降最少，为8．15％，差异有统计学意义（P=0．001）。血清脂蛋白（a）水平变化在不同基因型3组间差异有统计学意义（P=0．021），CC基因型下降最明显，为30．41％；3种基因型患者HDL-C水平的变化尽管呈梯度变化的趋势，但差异无统计学意义（P=0．470）；CC基因型HDL-C水平升高最明显，为14．37％，CA基因型为10．48％，AA基因型为6．64％；对�
- 高静从洪良毛用敏刘祎张楠陈倩刘婷崔让庄
- 关键词：冠状动脉性心脏病胆固醇酯转运蛋白阿托伐他汀钙药物基因组学CETP基因
- 一种简便、特异地获取目的基因片段并克隆的好方法被引量：2
- 2000年
- 目的:以简便、特异的方法获取目的基因片段用于体外构建重组体。方法:以引物互为模板的聚合酶链反应合成目的基因片段。该目的基因片段经限制性内切核酸酶水解后被连接至克隆载体 ,克隆后经筛选并电泳鉴定。结果:以聚合酶链反应合成了目的基因片段 ,并获得相应重组体。经鉴定,该重组体确含目的基因片段序列。结论:成功利用聚合酶链反应获得目的基因片段并获得相应重组体 ,以作为进一步研究的基础。
- 李丹宁郭善一李兰戈崔让庄毛用敏
- 关键词：PCR基因重组
- 基质金属蛋白酶表达和活性改变同心房颤动患者心房纤维化的关系被引量：11
- 2006年
- 目的研究心房颤动(房颤)患者心房肌纤维化程度同基质金属蛋白酶(MMPs)表达和活性的关系,探讨MMPs在房颤患者心房重构中的作用。方法心外科手术病人53例,其中房颤患者27例,窦性心律患者26例,采用MASSON染色检测病理切片中胶原容积比例,逆转录-聚合酶链反应技术检测MMP-1、MMP-2、MMP-9的表达变化,通过明胶酶谱法观察MMP-2、MMP-9的活性改变。结果同窦性心律组比较,房颤患者的胶原容积比例增高,MMP-2mRNA水平和蛋白活性无明显变化,MMP-1、MMP-9mRNA升高,MMP-9的活性增强,差异有统计学意义(P<0．05)。结论心房纤维化在房颤的发生和维持中发挥重要作用,金属蛋白酶通过增强心房纤维化的程度而促进房颤的进展,参与房颤的心房结构重构,加重心房功能的衰竭。
- 许静吴冬燕毛用敏付乃宽卢凤民王瑞莹
- 关键词：心房颤动基质金属蛋白酶类纤维化
- 血管内皮生长因子与子宫内膜癌
- 2009年
- 血管内皮生长因子（vascular endothelial growth factor，VEGF）是一组功能强大且能产生多种效应的细胞因子。它可诱导血管及淋巴管生成，不仅在胚胎发育、创伤愈合中发挥重要作用，而且与肿瘤的生长、浸润和转移关系密切。子宫内膜癌是女性生殖道常见的三大恶性肿瘤之一，占女性生殖道恶性肿瘤的20％-30％，其发病率持续上升，且发病年龄有降低趋势。近年的研究表明，VEGF可能在子宫内膜癌的发生、发展、转移以及预后方面发挥重要作用。
- 纪宝凤毛用敏
- 关键词：血管内皮生长因子类子宫内膜肿瘤淋巴管生成
- Ad-VEGF_(121)和Ad-VEGF_(165)重组腺病毒的构建和制备被引量：2
- 2008年
- 目的:以pAdEasy-1缺陷性腺病毒系统为载体构建用于实验动物模型基因治疗的Ad-VEGF121和Ad-VEGF165重组腺病毒。方法:采用RT-PCR方法从人心肌组织中扩增获得VEGF121、VEGF165cDNA片段,分别插入pUCm-T载体构成pUC-VEGFs;限制性内切酶SalⅠ、KpnⅠ切下目的基因片段,插入pAdTrack-CMV载体相应的多克隆位点构成pAdTrack-CMV-VEGFs。电转法将被PmeⅠ切成线性的pAdTrack-CMV-VEGFs转入E coli BJ5183,与其中的pAdEasy-1同源重组成pAdEasy-VEGFs。阳离子脂质体法将被PacⅠ线性化的重组子转染293T细胞进行腺病毒包装。转染后7～11d可在荧光显微镜下观察到绿色荧光蛋白(GFP)呈彗星状,收集细胞反复冻融获得含重组腺病毒的上清液。感染293T细胞3～4次,待细胞出现细胞病变效应(CPE)时收获腺病毒(Ad-VEGFs),并用CsCl密度梯度超速离心进行纯化。结果:重组腺病毒在电镜下呈多面体,形态完整;Ad-VEGF121和Ad-VEGF165病毒滴度分别达到1.155×1012和1.281 5×1012 V.P/mL。结论:利用pAdEasy-1缺陷性腺病毒系统构建携带目的基因的重组腺病毒方法较简便,易掌握。获得的重组腺病毒纯度高、滴度高,适用于实验动物模型和体外培养细胞的基因治疗。
- 毛用敏李汇赵莉莉宋衍秋崔让庄
- 关键词：血管内皮生长因子类腺病毒科质粒
- 内皮型一氧化氮合酶基因4b/a和T786C多态性与颈动脉粥样硬化的关联分析被引量：2
- 2012年
- 目的:在汉族老年群体中探讨内皮型一氧化氮合酶(eNOS)基因4b/a和T786C多态性与颈动脉粥样硬化(CAS)的关联性。方法:选择接受颈动脉超声检查的汉族老年患者521例,根据超声检查结果分为CAS组266例和对照组255例。分别用PCR和PCR-RFLP方法分析4b/a和T786C多态性的基因型,同时对所有对象检验血脂等危险因素。结果:两个多态性处于连锁不平衡(LD)。两个多态性的基因型和等位基因分布在CAS组和对照组间均差异无统计学意义(均P>0.05)。在调整性别和年龄等多个CAS常见危险因素的前后,两个多态性各基因型与CAS的关联均差异无统计学意义(均P>0.05)。单体型分析发现,对常见危险因素进行调整后,单体型4a-T与CAS的关联差异有统计学意义(OR=2.86,95%CI=1.11～7.40,P=0.030)。结论:在所研究的汉族老年人群中未发现eNOS基因4b/a或T786C多态性单独与CAS相关联,但二者构成的单体型4a-T可能是汉族老年群体发生CAS的独立易感遗传标记。
- 张晶关欣刘婷梁蓉杨桂铭毛用敏
- 关键词：颈动脉粥样硬化内皮型一氧化氮合酶单体型
- 携带人金属蛋白酶组织抑制剂1重组腺病毒的构建及在人脐静脉内皮细胞中的表达被引量：2
- 2013年
- 目的构建携带人金属蛋白酶组织抑制剂1(TIMP1)的重组腺病毒AdV-hTIMP1,感染体外培养的人脐静脉内皮细胞CRL-1730,观察其mRNA表达情况。方法应用AdEasy复制缺陷型腺病毒载体系统在大肠埃希菌BJ5183中通过同源重组构建Ad-hTIMP1和对照Ad-Track。阳离子脂质体法将重组腺病毒转染到人胚胎肾细胞(HEK293T)中进行包装和扩增。纯化后PCR鉴定hTIMP1目的基因,OD260法测定滴度,透射电镜观察腺病毒形态。将人脐静脉内皮细胞CRL-1730分为3组,空白对照组、Track对照组和TIMP1实验组,感染48h后收集细胞,半定量PCR(RT-PCR)法检测内皮细胞中TIMP1mRNA的表达情况。结果重组腺病毒Ad-hTIMP1的滴度为1.9×1012v.p/mL。其感染人脐静脉内皮细胞CRL-1730后,实验组TIMP1mR-NA的表达明显升高(P<0.05)。结论成功构建了携带hTIMP1基因的重组腺病毒Ad-hTIMP1,成功感染了体外培养的人脐静脉内皮细胞CRL-1730,使细胞中hTIMP1过表达,为心血管疾病的基因治疗提供平台。
- 李汇毛用敏赵莉莉崔让庄王佩显
- 关键词：金属蛋白酶组织抑制剂1基因治疗
- 原发性高血压患者血清脂联素及其基因多态性与冠心病的相关性研究被引量：11
- 2014年
- 目的探讨原发性高血压患者血清脂联素水平及其基因单核苷酸多态性（SNP）rs266729、rs7649121、rs1501299、rs3774262与冠心病及冠脉病变程度的关系。方法以高血压患者414例（其中单纯高血压患者180例，高血压合并冠心病患者234例）和正常对照组185例为研究对象，应用酶联免疫吸附法（ELISA）测定血清脂联素水平，聚合酶链反应一限制性片段长度多态性（PCR—RFLP）法检测脂联素rs266729、rs7649121、rs1501299、rs3774262位点多态性。结果高血压合并冠心病组脂联素水平较对照组和单纯高血压组显著降低。脂联素rs7649121位点杂合子AT基因型较AA基因型可降低冠心病风险（校正OR=O．566，95％CI0．346～0．925，P=0．023）。多元Logistic回归分析显示年龄、LDL—C为冠心病的危险因素，脂联素为冠心病的保护因素。随着病变支数增加，脂联素水平呈逐渐降低趋势。脂联素SNP位点基因型对血清脂联素水平无明显影响。结论脂联素水平降低是高血压患者发生冠心病的独立危险因素，且随着冠脉病变程度的加重，脂联素水平逐渐降低。脂联素rs7649121位点多态性可能与高血压患者并发冠心病有关。
- 李杨秦勤任蓓赵丽丽毛用敏郑萍
- 关键词：脂联素单核苷酸高血压冠心病LOGISTIC模型
- 重组腺病毒Ad-hBNP的构建及其在CHF大鼠中的分布与表达
- 2012年
- 目的构建重组腺病毒Ad-hBNP,观察其在CHF大鼠体内的分布与表达,为腺病毒介导BNP治疗慢性心力衰竭奠定实验基础。方法 RT-PCR法从人心肌组织获得hBNP片段,应用AdEasy腺病毒载体系统,构建Ad-hBNP;CHF成模大鼠24只,随机分为4组,18只单次腹腔注射Ad-hBNP后,均分为1、4和7 d组;余不予Ad-hBNP,为0点组。实验动物于相应时间处死,ELISA检测血清hBNP水平,免疫组化检测各脏器hBNP表达,RT-PCR检测各组织hBNP mRNA表达。结果成功构建用于实验性基因治疗的Ad-hBNP,纯化后滴度达到4.4×1012VP/mL。透射电镜观察Ad-hBNP呈多面体结构,颗粒直径在90 nm左右。单次腹腔注射Ad-hBNP,CHF大鼠心脏、肝脏、肺脏、肾脏、脾脏及小肠均检测到hBNP表达,外源hBNP在CHF大鼠体内的表达至少可持续7天。结论腺病毒介导的外源hBNP基因可在CHF大鼠多脏器中得到有效表达,其生物学效应时间显著长于BNP的生物半衰期。
- 宋衍秋赵莉莉毛用敏赵鸿铭徐美林崔让庄
- 关键词：B型利钠肽腺病毒基因治疗
