牟红
- 作品数：3 被引量：4H指数：2
- 供职机构：昆明医学院第二附属医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 多发性骨髓瘤黏蛋白-1基因真核表达载体构建及其在COS-7细胞中的表达被引量：1
- 2009年
- 本研究旨在构建多发性骨髓瘤黏蛋白1(两串联)基因(muc1-2vntr)的真核表达载体及该重组体在COS-7细胞中的表达,为研制多发性骨髓瘤基因疫苗奠定基础。以MUC1-2VNTR蛋白的编码基因作为目的基因,在其前端加上KOZAK序列后,两端分别加上HindⅢ和XbaⅠ酶的酶切位点,将人工合成的全基因定向插入pcDNA3.1/myc-his B载体中,转化E.coli感受态细胞获得重组菌株,经酶切及测序鉴定为pcDNA3.1-2vntr/myc-hisB重组质粒后,采用Lipofectimine脂质体介导法转染COS-7细胞,用荧光显微镜对荧光表达进行观察,然后用Western blot检测重组体在细胞内外的表达。结果表明:合成的MUC1-2VNTR基因全长约140bp,所构建的pcDNA3.1-2vntr/myc-hisB重组质粒经双酶切及测序鉴定后,与预期片段大小相符,并含有完整的阅读框架和目的基因。将其转入COS-7细胞后48小时,荧光显微镜和Westernblot检测均可证实黏蛋白1表达。结论:成功的构建了多发性骨髓瘤真核表达载体pcDNA3.1-2vntr/myc-hisB,并在COS-7细胞中成功地表达黏蛋白1,这为黏蛋白1的功能研究和多发性骨髓瘤基因疫苗的研制提供了实验基础。
- 刘昆罗云娇刘月波姚锦杨红牟红黄桂云张铀
- 关键词：多发性骨髓瘤MUC1PCDNA3.1细胞转染
- 多发性骨髓瘤血清MUC1表达的临床意义被引量：2
- 2008年
- 目的探讨血清MUC1（sMUC1）在多发性骨髓瘤（MM）临床诊疗中的应用价值。方法应用酶联免疫吸附法（ELISA）检测12例初治和15例化疗后MM患者及46名健康人外周血中MUC1的表达。结果sMUC1在MM初治患者表达量为10．86～88．80U／ml，平均33．44U／ml；化疗后3．92～22．22U／ml，平均11．6U／ml；健康人3．84～30．45U／ml，平均12．81U／ml。初治患者sMUC1浓度明显高于化疗后患者（P=0．001）和健康人（P=0．000），而化疗后患者与健康人之间差异无统计学意义（P=0．461）。结论sMUC1可作为MM的诊断和化疗效果观察的辅助指标，并还可能作为MM免疫治疗潜在的靶点。
- 王欣张铀杨红高春林牟红
- 关键词：多发性骨髓瘤酶联免疫吸附测定膜糖蛋白MUC1
- 多发性骨髓瘤MUC1-2VNTR基因疫苗诱导小鼠免疫应答的实验研究被引量：2
- 2010年
- 目的观察黏蛋白1两串联重复区(MUC1-2VNTR)基因疫苗诱导BALB/c小鼠体液及细胞免疫应答的效果。方法将含MUC1-2VNTR的重组质粒pcDNA3.1-2VNTR/myc-hisB免疫小鼠,免疫后采用ELISA动态检测血清中抗VNTR特异性抗体的水平,乳酸脱氢酶法检测细胞毒性T细胞(CTL)反应活性,MTS法检测脾淋巴细胞增殖活性。结果重组质粒免疫组小鼠血清中检出了MUC1-2VNTR抗原特异性抗体。用重组质粒免疫BALB/c小鼠后,在效靶比为80∶1时可显著地诱导特异性CTL应答。在MUC1-2VNTR抗原肽的刺激下,免疫小鼠脾淋巴细胞得到增殖;与空质粒对照组比较,差异有统计学意义(P<0.01)。结论MUC1-2VNTR基因疫苗可诱导小鼠产生特异性细胞及体液免疫应答,对多发性骨髓瘤的疫苗治疗有重要意义。
- 翁羽蕙刘月波张铀杨红姚锦牟红黄桂云王浩罗云娇
- 关键词：多发性骨髓瘤黏蛋白1细胞免疫体液免疫
