王凡龙
- 作品数：7 被引量：22H指数：3
- 供职机构：石河子大学农学院新疆生产建设兵团绿洲生态农业重点实验室更多>>
- 发文基金：国家重点实验室开放基金国家科技重大专项国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 棉花多胺HPLC的测定方法优化及其在体细胞胚胎发生过程中的变化规律被引量：7
- 2014年
- 利用HPLC法测定棉花组织培养物中的多胺含量,以棉花品种新陆早33号愈伤组织为材料进行多胺含量的测定,结果表明：冰浴浸提时间及衍生反应时间优化后,可将内源腐胺（Putrescine,Put）、亚精胺（Spermidine,Spd）、精胺（Spermine,Spm）在15min完全分离并定量测定,线性关系良好（r＞0.99）,回收率高（96.8％～103.1％）;建立了棉花多胺HPLC测定方法.利用该方法对棉花体细胞胚胎发生各时期培养物进行多胺含量测定,结果显示胚性愈伤组织形成后多胺含量显著上升,且腐胺与亚精胺和精胺的比例随着体细胞胚胎发生持续下降,表明非胚性细胞向胚性细胞转化过程中,二胺（腐胺）不断向三胺（亚精胺）和四胺（精胺）转化,特别是在胚状体形成期,亚精胺和精胺的积累显著增加,初步揭示了棉花体细胞胚胎发生过程中多胺的变化规律.
- 程文翰朱华国李鹏飞王凡龙朱守鸿赵兰杰郭丽雪孙杰
- 关键词：棉花愈伤组织高效液相色谱多胺体细胞胚胎发生
- 两个新疆棉花品种体细胞胚胎发生的比较研究被引量：2
- 2013年
- 以新疆棉区主栽品种新陆早33号和新彩棉7号为实验材料,比较不同激素组合对两者体细胞胚胎发生过程的影响,以建立高效再生体系。结果表明,新陆早33号和新彩棉7号在2,4-D+KT的激素组合下出愈率均为100%,降低2,4-D浓度有利于胚性愈伤组织的分化,分化率分别达到60.0%和7.5%;在IBA+KT的激素组合下出愈情况相对较差,分别为72.5%和85.0%;继代几次后,两个品种的胚性愈伤组织分化率可分别达到45%和55%,新陆早33号和新彩棉7号分别在DK和IK激素组合下更有利于体细胞胚胎发生过程。进一步观察发现,新彩棉7号分化形成胚状体的能力比新陆早33号更强,两品种均能在6个月内获得再生植株。再生体系的建立,为新疆棉花开展分子育种工作奠定了基础。
- 李鹏飞程文翰王凡龙张新宇朱华国孙杰
- 关键词：棉花外源激素体细胞胚胎发生再生植株
- 棉花多胺氧化酶基因(GhPAO_2)的克隆及非生物胁迫下的表达分析被引量：4
- 2015年
- 本研究以拟南芥多氨氧化酶(AtPAO2)为探针,在雷蒙德氏棉基因组数据库中获得同源基因并设计引物,利用RT-PCR技术克隆PAO基因,分离一个新的陆地棉PAO基因命名为GhPAO2。该基因cDNA全长为2 237 bp,具有一个1473 bp的开放阅读框,编码490个氨基酸残基,预测该基因蛋白质分子量为54.41 kD,等电点为5.69。利用Real-time PCR对该基因在不同组织和多种非生物胁迫处理进行表达分析,结果表明:GhPAO2基因主要在棉花花瓣和叶中表达;不同胁迫处理下GhPAO2基因表达量均发生显著变化,其中低温处理和20%PEG处理后基因表达量迅速上升并在1 h时表达量达到最高,200 mmol/L NaCl和1 mmol/L ABA处理则在24 h时表达量达到最高,表明GhPAO2基因受低温、PEG、Na Cl和ABA诱导表达,可能在棉花抵御非生物胁迫过程中发挥重要作用。
- 成新琪程文翰王凡龙贺雪孙杰朱华国
- 关键词：棉花多胺氧化酶基因克隆非生物胁迫
- 腐胺促进棉花胚性愈伤组织分化的初步研究被引量：1
- 2015年
- 为了利用多胺促进棉花体细胞胚胎发生,提高农杆菌介导的棉花遗传转化效率,本研究以4个陆地棉品种新陆早33号(L33)、新陆早36号(L36)、新彩棉7号(C7)、豫早1号(Y1)为试验材料,下胚轴在附加有0.1 mg/L2,4-D和0.1 mg/L KT的MSB培养基中培养4周后,分别继代到附加了1 mmol/L腐胺(Put)、1 mmol/L D-精氨酸(D-Arg)和对照的3种分化培养基中培养4周后,记录愈伤组织的增殖和分化情况。结果表明:D-Arg可以显著抑制愈伤组织增殖,4个品种都表现出严重的褐化,而附加Put则能够一定程度地促进愈伤组织的增殖。在胚性愈伤组织分化方面,D-Arg处理后L33和L36均未见分化,C7和Y1分别为对照处理的49.38%和324%;而经Put处理后,所有品种的胚性愈伤组织分化率均表现为提高,其中Y1和L33的胚性愈伤组织分化率提高了3倍多。此外,内源多胺含量测定发现,施加外源腐胺和D-Arg之后愈伤组织的多胺含量发生明显变化,可能与后期胚性愈伤组织分化有关。因此,多胺在促进棉花胚性愈伤组织分化方面发挥重要作用。
- 戴亚楠陈晓宇杨梅程文翰王凡龙朱华国
- 关键词：棉花腐胺胚性愈伤组织
- 棉花GhSAMDC2/3/4基因的克隆及功能研究
- 棉花是全世界重要的经济作物，也是盐碱地种植的先锋作物之一。在棉花生产中，陆地棉种植最为广泛，占全世界棉花总产量的90％以上。新疆作为我国的植棉大省，连续20年保持单产、总产和调出量的全国第一，棉花种植业已经成为新疆经济的...
- 王凡龙
- 关键词：棉花种植良种培育抗性育种生物遗传
- 文献传递
- 棉花S-腺苷蛋氨酸脱羧酶基因(GhSAMDC2/3/4)的克隆及其诱导表达分析被引量：8
- 2015年
- 利用电子克隆结合RT-PCR技术克隆获得陆地棉(Gossypium hirsutum L.)S-腺苷蛋氨酸脱羧酶(S-adenosylmethionine decarboxylase,SAMDC)基因家族3个基因,分别命名为Gh SAMDC2、Gh SAMDC3和GhSAMDC4。序列分析显示,该基因c DNA包含的upstream ORF(u ORF)和main ORF(m ORF)为植物SAMDC基因特征ORF,其中m ORF长度分别为1068 bp、1110 bp和1032 bp,分别编码355、369和343个氨基酸。聚类分析表明,Gh SAMDC2/3蛋白与可可树(Theobroma cacao)SAMDC聚为一类,且Gh SAMDC2与GhSAMDC3蛋白亲缘关系最近;Gh SAMDC4与拟南芥At SAMDC4聚为一类。实时荧光定量PCR分析表明,Gh SAMDC2在茎中表达相对较高,随着纤维发育其表达量不断增加,在纤维发育后期其表达量达到最高;Gh SAMDC2/3/4在不同的胁迫条件下表现出不同的表达模式,Gh SAMDC2受低温和干旱胁迫诱导最强烈,Gh SAMDC3响应盐胁迫显著,Gh SAMDC4受ABA诱导强烈。上述结果为进一步研究棉花SAMDC基因功能奠定了一定基础。
- 王凡龙朱华国程文翰刘永昌成新琪孙杰
- 关键词：棉花多胺非生物胁迫
- 新陆早33号高效遗传转化体系研究被引量：1
- 2013年
- 【目的】以新疆北疆棉区主栽品种新陆早33号为材料,研究不同处理条件对转基因抗性胚性愈伤组织增殖、胚状体分化以及植株再生的影响,为新疆棉花遗传转化奠定基础。【方法】以新陆早33号下胚轴为外植体,利用农杆菌介导法转化抗草甘膦基因EPSPS,通过优化培养条件以提高抗性胚性愈伤组织获得完整再生植株的能力。【结果】在胚性愈伤组织增殖阶段,培养基中KNO_3浓度为3.8g/L,继代周期为11 d有助于胚性愈伤组织快速增殖和保持良好生长状态;将凝固剂Phytagel浓度提高到4.0g/L能明显促进胚状体分化;在子叶胚生根阶段以Phytagel为凝固剂同时加入1.0 g/L的活性炭有助于壮根、减少褐化和提高正常植株比例。【结论】通过对培养条件的优化,缩短了胚状体发生的周期,并获得了大量再生植株,建立了新陆早33号的高效遗传转化体系。
- 李鹏飞朱华国程文翰王凡龙张新宇孙杰
- 关键词：棉花体细胞胚胎发生再生植株
