王利
- 作品数：10 被引量：15H指数：3
- 供职机构：第四军医大学西京医院更多>>
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- 叶酸通过NLRP3/ASC/Caspase-1信号通路对HT22细胞拟帕金森损伤作用的研究
- 2022年
- 目的探讨叶酸对小鼠HT22细胞拟帕金森(PD)损伤产生的影响。方法将小鼠HT22细胞作为研究对象,随机分为对照组、模型组、叶酸组及治疗组4组。采用CCK-8、LDH、TUNEL以及免疫荧光试验检测叶酸对MPP+诱导的细胞损伤的活性影响以及NOD样受体蛋白3(NLRP3)荧光表达的影响;采用Western免疫印迹和qPCR实验检测叶酸对MPP+诱导细胞损伤后NLRP3、凋亡相关微粒蛋白(ASC)、Caspase-1表达的影响;利用ELISA检测叶酸对MPP+诱导细胞损伤后白细胞介素(IL)-18和IL-1β表达的影响;最后采用Western免疫印迹检测NLRP3抑制剂CY-09对MPP+诱导细胞损伤后ASC、Caspase-1、IL-18和IL-1β表达的影响。结果MPP+诱导HT22细胞引起拟PD损伤,CCK-8、LDH、TUNEL实验检测结果显示叶酸可显著缓解损伤引起的细胞活性的降低和凋亡细胞的增加;免疫荧光试验检测结果显示叶酸可降低损伤后细胞中NLRP3荧光强度的升高;Western免疫印迹和qPCR试验检测结果显示叶酸可降低NLRP3、ASC、Caspase-1在蛋白水平和mRNA水平的升高;ELISA检测结果显示,叶酸治疗可显著缓解损伤后细胞内IL-18和IL-1β的分泌;最后采用Western免疫印迹检测显示CY-09可以阻断损伤后细胞内ASC、Caspase-1、IL-18和IL-1β蛋白水平的升高。结论叶酸通过降低IL-18和IL-1β表达保护MPP+致HT22细胞拟PD损伤,潜在的保护机制可能与NLRP3/ASC/Caspase-1信号通路密切相关。
- 姬丽娅姬昂狄政莉熊婧刘志勤薛秀云费晓炜豆雅楠王利
- 关键词：叶酸白细胞介素-1Β白细胞介素-18
- 聚乳酸-聚乙醇酸共聚物复合心肌样细胞体外构建工程化心肌组织
- 2010年
- 背景:研究证实,在一定的诱导条件下,骨髓间充质干细胞可能向心肌细胞等多种中胚层来源的间质细胞分化。目的:探索以聚乳酸-聚乙醇酸共聚物为支架、骨髓间充质干细胞诱导分化的心肌样细胞为种子细胞,体外构建工程化心肌组织的可行性。方法:分离SD大鼠骨髓间充质干细胞,取第3代骨髓间充质干细胞加入含5-氮胞苷的培养液进行诱导分化,培养4周。将诱导成功后的细胞制成细胞悬液,缓慢滴注于预先制备好的聚乳酸-聚乙醇酸共聚物上,培养14d。以倒置相差显微镜观察诱导前后细胞的形态学变化,免疫荧光染色法鉴定诱导后骨髓间充质干细胞中心肌特异性肌钙蛋白Ⅰ的表达,大体观察工程化心肌组织在培养期间的形态,透射电镜观察工程化心肌组织的超微结构。结果与结论:原代培养的骨髓间充质干细胞14d形成集落,传代细胞体积变大,5-氮胞苷诱导后细胞呈长梭形,呈一致性生长。免疫荧光染色结果显示诱导后骨髓间充质干细胞表达心肌特异性肌钙蛋白Ⅰ。透射电镜可见肌丝、Z线样物质。结果证实,以聚乳酸-聚乙醇酸共聚物为支架、骨髓间充质干细胞诱导分化的心肌样细胞为种子细胞,可于体外构建出类似天然心肌的工程化心肌组织。
- 邢玉洁吕安林王利燕学波
- 关键词：聚乳酸-聚乙醇酸5-氮杂胞苷心肌样细胞工程化心肌组织
- 雷帕霉素-聚乳酸纳米磁性微球复合材料影响血管平滑肌细胞增殖的能力被引量：4
- 2010年
- 背景:聚乳酸类材料是目前常用的血管支架涂层材料,具有可降解、可塑性强、抗原性低和组织相容性好等优点,而磁化的金属裸支架可显著降低血栓和再狭窄的发生。目的:分析新型支架涂层材料雷帕霉素-聚乳酸纳米磁性微球复合材料的细胞生物相容性及对血管平滑肌增殖的影响。方法:分散聚合法制作雷帕霉素-聚乳酸纳米磁性微球复合材料小膜片,标准条件下与3～5代SD大鼠主动脉平滑肌细胞共培养7d,MTT法检测平滑肌细胞的生长增殖情况。结果与结论:不同磁性微球浓度的聚乳酸复合材料膜片对平滑肌细胞的增殖均有不同程度的抑制作用(P<0.05),雷帕霉素-聚乳酸纳米磁性微球复合材料膜片对平滑肌细胞增殖的抑制作用程度与未添加磁性微球的膜片无明显差异(P>0.05),但强于未添加雷帕霉素的膜片(P<0.05)。提示,雷帕霉素-聚乳酸纳米磁性微球复合材料既能显著抑制血管平滑肌细胞增殖又具有很好的细胞生物相容性。
- 吕安林邢玉洁王利燕学波赵伟
- 关键词：雷帕霉素聚乳酸磁性微球生物相容性
- 支架内血栓的监护、预测和防治体系研究
- 2009年
- 支架内血栓是药物洗脱支架的重要并发症之一，严重危及患者的生命。支架内血栓的发生有其一定的病理生理基础，文中详细论述了其发生、发展的各种影响因素，阐明了支架内血栓的检测方法和措施，分析了支架内血栓的危险信息识别体系和临床作用，提出了支架内血栓的预测和防治方法与措施。
- 吕安林程康杜娟娟王海昌栾荣华李伟杰郭文怡李成祥赵晓梅王利邢玉杰
- 关键词：血栓
- 心肌组织工程的研究现状被引量：3
- 2009年
- 心肌组织工程研究主要包括种子细胞的获取、支架材料的研制、工程化心肌组织的构建三部分。种子细胞的来源和种类是心肌组织工程的关键环节,目前研究较多的主要有胎幼心肌细胞、心脏自体细胞和全能干细胞、多能干细胞等。支架材料是细胞附着的基本框架和代谢场所,直接影响所构成的组织形态和功能。目前用于心肌组织工程的生物材料很多,大体上分为两类:天然材料和合成材料。天然材料主要有胶原、珊瑚、氨基葡聚糖、硫酸软骨素、纤维蛋白凝胶等。合成材料较多,例如聚亚安酯、聚羟乙酸、聚乳酸、聚羟基丁酸戊酯等。体外构建由种子细胞和支架材料所组成的复合体是心肌组织工程的核心。目前,心肌组织工程的体外构建主要包括以下几种方式:①直接在人工或天然材料上种植。②在可溶解的基质材料中培养。③叠加单层细胞,形成心肌样组织。心肌组织工程的研究已取得了很大的成绩,目前这方面的研究仍处于起步阶段,有很多问题尚待解决。
- 邢玉洁吕安林赵晓梅李飞王利杜娟娟
- 关键词：心肌心功能衰竭
- 老年大鼠血管功能及能量代谢改变及机制
- 2011年
- 目的:探讨老年大鼠血管功能的特点及其能量代谢和线粒体功能变化。方法:将16只大鼠分为两组(n=8),即老年大鼠组和成年大鼠组。禁食12 h后,测量大鼠全血血糖水平和血浆胰岛素的水平。取大鼠胸主动脉制作成2～3 mm的血管环,连接到离体血管灌流及记录系统记录血管的舒张变化情况。取血管灌流液测定NO的含量。用Western blot法测量腺苷酸活化蛋白激酶(AMPKα1)的蛋白的表达。采用782型氧气消耗仪测定胸主动脉细胞内线粒体的氧气消耗。结果:禁食12 h后,老年大鼠组全血血糖水平高于成年大鼠组[(5.70±0.03)vs.(4.21±0.06)mmol/L,P<0.05]。老年大鼠组血浆胰岛素水平高于成年大鼠组[(23.6±0.2)vs.(14.4±0.2)μU/ml,P<0.05]。老年大鼠胸主动脉舒张率下降显著[(0.41±0.01)vs.(0.79±0.01)%,P<0.05]。老年大鼠组NO的含量显著低于成年大鼠组[(9.07±0.15)vs.(45.33±0.38)μmol/L,P<0.05]。老年大鼠组AMPKα1的蛋白表达显著低于成年大鼠组(P<0.05);线粒体氧气消耗,两组差异明显[(1.33±0.33)vs.(2.42±0.03)μmol/min/g,P<0.05]。结论:老年大鼠组存在全身性胰岛素抵抗;血管舒张功能下降程度显著;AMPKα1蛋白的表达及线粒体氧气消耗能力下降,是血管功能下降的机制之一。
- 王利吕安林赵晓梅邢玉洁燕学波赵伟
- 关键词：血管功能能量代谢腺苷酸活化蛋白激酶线粒体
- 移植心肌样细胞对心肌梗死后功能性室壁瘤大鼠心功能的影响
- 2009年
- 目的探讨心肌内注射心肌样细胞对心肌梗死（MI）后功能性室壁瘤大鼠心功能的影响。方法结扎大鼠冠状动脉前降支形成MI，4周后，用超声心动图检测并筛选形成功能性室壁瘤者，并随机分为两组，即移植组（n=10），在室壁瘤部位及周边点状注射5-氮杂胞苷（5-Aza）诱导骨髓间充质干细胞（MSCs）分化、并用4，6-二脒基-2-苯基吲哚（DAPI）标记的心肌样细胞（10^6-10^7个）；对照组（n=10）：注射生理盐水。另取10只健康大鼠作为假手术组，只开胸不做任何处理。4周后，用超声心动图和血流动力学方法测定功能性室壁瘤大鼠的心功能，在荧光显微镜下观察DAPI标记的移植细胞的存活情况。结果超声心动图的结果显示，对照组和移植组的左室舒张末内径（LVEDD）和左室收缩末内径（LVESD）均较假手术组增高（P〈0．01），而移植组较对照组有所降低[（8．749±0．091）、（5．109±0．171）VS（9．219±0．059）mm、（5．942±0．092）mm，P〈0．05]；对照组和移植组的短轴缩短率（△Fs）及左室射血分数（LVEF）均较假手术组明显降低（P〈0．01），移植组较对照组两者有所增高[（32．70±1．283）、（45．78±1．796）VS（22．80±0．593）％、（31．92±0．830）％，P〈0．05]。血流动力学检测结果显示，移植组、对照组和假手术组的左室舒缩压差（LVDP）和左室正负最大变化速率（±dp／dtmax），分别为（152．9±0．669）、（4109±33．86）、（-3579±49．09），（122．5±2．639）、（3823±73．50）、（-2828±60．96）和（183．6±2．348）mmHg、（6695±80．17）mmHg／s、（-6294±71．39）mmHg／s，假手术组优于对照组和移植组（P〈0．01），移植组优于对照组（P〈0．05）。在荧光显微镜下可以观察到移植组的心肌组织中有存活的标记细胞。结论移植心肌样细胞能显著改善MI后功能性室壁瘤大鼠�
- 杜娟娟陶凌周祥张英梅邢玉洁王利赵晓梅吕安林
- 关键词：骨髓间充质干细胞心肌样细胞
- 心血管系统中PTEN基因的研究进展被引量：5
- 2010年
- PTEN基因于1997年由3个研究小组先后克隆并命名，是迄今发现的第一个具有双特异磷酸酶活性的抑癌基因，其在细胞生长、凋亡、细胞周期阻滞、细胞迁移过程起关键作用，成为新近研究的热点。
- 王利吕安林赵晓梅邢玉洁燕学波
- 关键词：基因PTEN再灌注损伤心肌肥厚
- 冠状动脉弯曲钙化病变分型及锚定介入新技术被引量：3
- 2010年
- 冠状动脉介入支架术（PCI）已经成为冠心病治疗的主要方法之一，一般A型和B型病变治疗成功率很高（达99％-100％），而C型和慢性完全闭塞（CTO）病变的成功率却远低于前两者，只有90％-97％，尤其是极度钙化和弯曲病变的介入治疗成功率更低（75％～85％）。这类患者的外科搭桥术治疗也容易发生桥血管闭塞（20％-37％），因此5年以后的远期疗效不佳，严重影响了该类患者的生活质量和生存期。改进极度钙化和弯曲病变患者的介入治疗技术和提高手术成功率已经是当今介入治疗领域的研究重点之一。
- 吕安林王海昌郭文怡王利邢玉洁燕学波赵伟
- 关键词：冠状动脉介入病变分型钙化介入治疗技术手术成功率慢性完全闭塞
- 聚乳酸-聚乙醇酸共聚物与心肌样细胞生物相容性的研究
- 2011年
- 目的:探讨聚乳酸-聚乙醇酸(PLGA)与骨髓间充质干细胞(BM-MSCs)衍生的心肌样细胞的生物相容性,为构建心肌组织工程及其进一步体内回植提供研究基础。方法:以密度梯度离心法体外分离培养SD大鼠的BM-MSCs,将培养的第3代细胞用终浓度为10μmol/L的5-氮杂胞苷和0.1μmol/L的血管紧张素Ⅱ诱导分化。将诱导后的心肌样细胞接种到PLGA材料上,用沉淀法测定细胞的黏附力和黏附率;MTT比色法检测细胞的增殖并绘制增殖曲线;扫描电镜观察细胞在PLGA材料上的形态学特征及细胞与该材料的相容性。结果:心肌样细胞在PLGA支架材料上贴附、生长良好,可分泌细胞外基质,其黏附、增殖能力与单纯的细胞相比无显著统计学差异。结论:PLGA与心肌样细胞具有良好的生物相容性,可作为心肌样细胞的理想载体构建心肌组织工程。
- 邢玉洁吕安林王利燕学波张荣庆
- 关键词：聚乳酸-聚乙醇酸心肌样细胞骨髓间充质干细胞生物相容性心肌组织工程
