王小毅
- 作品数：47 被引量：139H指数：8
- 供职机构：重庆医科大学附属第一医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金重庆市卫生局科研项目更多>>
- 相关领域：医药卫生文化科学更多>>
- 人乳腺癌细胞HYAL1基因真核表达载体的构建及其在MCF-7和ZR-75-30细胞中的表达被引量：1
- 2008年
- 目的构建人乳腺癌HYAL1基因的真核表达载体并稳定转染HYAL1基因低表达的乳腺癌MCF-7和ZR-75-30细胞株,为进一步探讨HYAL1基因在乳腺癌的侵袭和转移中的作用奠定基础。方法采用RT-PCR技术从高表达HYAL1的人乳腺癌细胞株MDA-MB-435S中扩增透明质酸酶HYLAL1基因,并将其插入真核表达载体pcDNA3.1/V5-His-TOPO中,构建的重组表达质粒经脂质体介导转染HYAL1基因低表达的乳腺癌MCF-7和ZR-75-30细胞。结果用RT-PCR成功地扩增出1条1332bp的DNA片段,经限制性内切酶酶切分析和DNA测序证明已经成功构建了人乳腺癌HY-AL1基因的真核表达载体。RT-PCR证明转染了重组质粒的乳腺癌MCF-7和ZR-75-30细胞可以高效稳定的表达HYAL1基因,且其穿透细胞外基质的能力增强。结论成功构建了人乳腺癌HYAL1基因的真核表达载体,获得了稳定表达人HYAL1基因的MCF-7和ZR-75-30细胞克隆,且其侵袭能力增强。
- 苏新良任国胜王小毅谭金祥
- 关键词：透明质酸酶真核表达乳腺癌细胞
- B-18Livin siRNA对人乳腺癌裸鼠移植瘤生长的抑制作用
- 李凡厉红元苏新良王小毅孔令泉任国胜
- 关键词：乳腺癌裸鼠LIVINSIRNA
- siRNA沉默HYAL1基因表达对人乳腺癌细胞生长和增殖的影响
- 2006年
- 背景与目的:有研究证实透明质酸酶(hyaluronidase,Hyase)与人乳腺癌的恶性潜能相关。本研究拟探讨RNA干扰是否能有效抑制Hyase基因HYAL1的表达以及人乳腺癌细胞的生长和增殖。方法:体外化学合成HYAL1序列特异性双链RNA(dsRNA),在脂质体(SiPORTLipid)的介导下转染人乳腺癌细胞株MDA-MB-231、MDA-MB-453S、ZR-75和ZR-75-30。荧光共聚焦显微镜下观察转染效率,RT-PCR分析HYAL1mRNA的表达,MTT测定细胞的增殖,流式细胞仪测定细胞周期。结果:(1)HYAL1-siRNA能有效地封闭HYAL1基因的表达,使HYAL1mRNA相对水平明显降低(P<0.05);(2)HYAL1-siRNA能明显抑制细胞增殖(P<0.05);(3)HYAL1-siRNA使细胞周期G0/G1期细胞百分比明显增加,S期的细胞百分比显著减少(P<0.05)。结论:siRNA-HYAL1能有效抑制人乳腺癌细胞株HYAL1基因的表达,抑制细胞增殖,将更多的细胞阻滞在G0/G1期。
- 谭金祥任国胜涂刚Li Xiao-Tao王小毅冉亮
- 关键词：RNA干扰乳腺癌细胞系透明质酸酶细胞周期
- 蛋白酶体激活因子REGgamma基因对乳腺癌MDA-MB-231细胞生长的影响被引量：3
- 2008年
- 目的观察蛋白酶体激活因子REGgamma（REGγ）基因对乳腺癌MDA-MB-231细胞生长的影响。方法构建真核表达重组体PcDNA3．1-REGγ并将其以脂质体转染法导人细胞，以600mg／L浓度的G418连续筛选转染细胞6周，获得稳定高表达该基因的细胞株。分别以噻唑蓝（MTT）、流式细胞仪（FCM）、软琼脂集落形成试验检测其对细胞生长的影响。免疫细胞化学检测增殖细胞核抗原（PCNA）的表达。结果转染REGγ的细胞有外源REGγ基因的整合及表达，经Westernblot检测其表达较未转染组和仅转染空载体组明显增加。MTT法检测发现转染REGγ细胞生长加速；FCM检测提示转染REGγ组、未转染组和仅转染空载体组在S＋G2＋M增殖期的细胞比例分别为55．91％、44．09％、43．69％；软琼脂集落形成试验显示其平均集落形成率分别为10．23％、3．67％、4．06％。转染REGγ基因后PCNA表达明显增强。结论转染外源野生型REG7基因对乳腺癌MDA-MB-231细胞具有加速其生长、促进其增殖的作用。
- 田甜王小毅李凡任国胜李佳
- 关键词：乳腺癌细胞周期增殖
- REGgamma在胃癌组织与不同分化胃癌细胞株中的表达及其临床意义
- 2009年
- 目的:探讨REGgamma(REGγ)在胃癌组织与不同分化细胞株中的表达水平及其临床意义。方法:应用免疫组化SP法检测70例胃癌组织和30例正常胃组织中REGγ/蛋白的表达水平,并分析其与胃癌生物学行为的关系:分别采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)及Western blot检测正常胃粘膜细胞株(GES-1)、胃癌高分化(MKN-28)、中分化(SGC-7901)和低分化(BGC823)细胞株中REGγ mRNA转录情况和蛋白表达水平。结果:免疫组化结果表明在胃癌组织中,REGγ蛋白的表达阳性率(74.3%)显著高于正常胃粘膜组织(40.0%,P<0.01),且表达与肿瘤的大小(P<0.01)、淋巴结转移(P<0.05)、分化程度(P<0.01)、浸润程度(P<0.01)及远处转移(P<0.05)相关;RT-PCR结果表明在正常胃粘膜细胞株及胃癌高、中、低分化细胞株中,REGγ mRNA表达水平逐渐增强,分别为0.459±0.079、0.588±0.118、0.715±0.066、0.873±0.099(P<0.01),Western blot结果表明在正常胃粘膜细胞株及胃癌高、中、低分化细胞株中,REGγ蛋白表达水平逐渐增强,分别为0.712±0.065、1.176±0.185、1.533±0.127、2.061±0.398,结果差别有统计学意义(P<0.05)。结论:REGγ在正常胃粘膜组织和胃癌组织中呈一定比例的阳性表达,其表达水平与胃癌癌肿大小、是否有淋巴结转移、分化程度、浸润程度及是否远处转移等肿瘤的恶性生物学行为有关。REGγ表达与胃癌的分化程度相关,随着细胞分化程度的降低其表达逐渐增强,检测REG7 mRNA及蛋白的表达可望成为胃癌早期诊断和判断预后的分子指标之一。
- 李佳田甜王小毅李凡任国胜
- 关键词：胃肿瘤免疫组织化学蛋白质
- 输液港在乳腺癌患者化疗中的临床应用被引量：19
- 2014年
- 肿瘤患者因反复的血管穿刺和化疗药物本身的毒性易致穿刺血管形成血栓和静脉炎[1],严重的影响了患者的生活质量和生命安全。植入式静脉输液港（ implantable venous access port, IVPA）是一种可植入皮下,长期留置在体内的静脉输液装置,通过使用无损伤针穿刺植入皮下输液港即可建立输液通道,可进行输注药物、补液、营养支持、输血等治疗。 IVPA最常见的植入方式有锁骨下静脉路径和颈内静脉路径,但因锁骨下路径易发生夹闭综合征（ pinch-off syndrome）导致严重并发症,因此,临床多选择颈内静脉植入。2012年11月至2013年5月本院共完成超声引导下经颈内静脉途径输液港安置术50例,患者化疗结束后均顺利拔出输液装置。笔者将临床应用情况及体会总结如下。
- 胡飞翔蔡明淳林魏余贤王小毅任国胜
- 关键词：乳腺肿瘤化学疗法
- 浅谈医学研究生人文教育的培养被引量：6
- 2018年
- 从人文教育课程设置、教学内容,教学方法以及教师、导师的认识方面简要分析我国目前医学研究生的人文素质教育现状。从医学研究生的人文教育内容,课程体系、师资和教学方法出发,提出加强医学研究生人文教育的相关对策。引导医学研究生形成正确的人生观、价值观,正确处理当今医疗保健服务和医学科研中的各种伦理、社会问题,适应医疗改革环境的需要,培养出医学科研和医疗保健服务的高级人才。
- 涂生芬刘阳王小毅
- 关键词：医学研究生人文教育研究生培养
- 血液滤过治疗重症急性胰腺炎的疗效观察被引量：10
- 2005年
- 目的观察血液滤过(HF)在重症急性胰腺炎(SAP)治疗中的作用.方法对比分析30例SAP,其中15例接受HF治疗,APACHEⅡ评分为16.26±4.36,从发病到开始HF时间(1.7±0.43)d,HF治疗时间为(27.8±1.0)h.为12～24h不间断滤过,采用低分子肝素抗凝.另15例SAP未接受HF治疗APACHEⅡ评分为14.46±3.86.结果15例接受HF治疗病人有2例死亡(13.3%),1例因脑死亡放弃治疗,12例治愈出院.另外15例未接受HF治疗病人有3例死亡(20%),12例治愈出院.接受HF治疗的15例SAP病人在HF后96h内心率,呼吸频率、尿量、动脉血氧分压、电解质及腹胀、腹痛等自觉症状较HF治疗前和未接受HF治疗病人有明显改善,所有病人均能良好耐受HF治疗,治疗中未出现明显不良反应.结论HF能明显改善SAP患者的呼吸、心率、尿量、电解质、血氧饱和度及腹痛、腹胀等,治疗中血液动力学稳定,无明显不良反应.
- 王小毅谭金祥任国胜
- 关键词：血液滤过重症急性胰腺炎
- Y14和Upf1在人乳腺癌细胞表达增强被引量：2
- 2009年
- 目的探讨Y14和Upf1在人乳腺癌细胞株和人乳腺癌组织表达情况及其意义。方法应用免疫细胞化学、激光共聚焦方法测定Y14和Upf1在乳腺癌细胞系(MCF-7、ZR-75-30、T47D、MDA-MB-435s、MDA-MB-453、MDA-MB-231)及乳腺上皮细胞系(HBL-100)中的表达。结果(1)人乳腺癌细胞系中Y14和Upf1的表达均明显高于乳腺上皮细胞系(P<0.05)。(2)在人乳腺癌细胞中,MDA-MB-231细胞系的Y14和Upf1表达明显高于MCF-7细胞(P<0.05)。(3)Y14和Upf1在人乳腺癌组织表达增强(P<0.05)。结论Y14和Upf1在人乳腺癌细胞和人乳腺癌组织中的表达增强。
- 冉亮涂刚王小毅赵聪任国胜
- 关键词：NMD人乳腺癌细胞人乳腺癌组织
- HYAL1基因过表达对乳腺癌细胞迁移能力和血管生成能力及增殖的影响
- 2008年
- 目的探讨透明质酸酶HYAL1基因过表达对人乳腺癌细胞株MCF-7和ZR-75-30的迁移能力和血管生成能力以及增殖的影响。方法应用双室联合培养技术,建立体外肿瘤侵袭和血管生成模型,观察过表达HYAL1基因对乳腺癌细胞穿透ECM gel和诱导血管内皮细胞形成血管能力的影响;应用MTT和流式细胞术检测细胞的增殖能力变化。结果过表达HYAL1基因的乳腺癌细胞MCF-7和ZR-75-30(实验组)穿透ECM的能力以及诱导血管生成的能力均强于对照组(P<0.05);但是,过表达HYAL1基因的乳腺癌细胞增殖能力与对照组比较没有明显差异(P>0.05)。结论过表达HYAL1基因能促进人乳腺癌细胞在体外侵袭和诱导血管生成,但是对乳腺癌细胞的增殖没有影响。
- 苏新良任国胜王小毅谭金祥
- 关键词：乳腺癌透明质酸酶血管生成增殖
