王德富
- 作品数：91 被引量：180H指数：8
- 供职机构：山西农业大学生命科学学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金山西省自然科学基金国家现代农业产业技术体系建设项目更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生生物学文化科学更多>>
- 基于小RNA深度测序和RT-PCR鉴定鹅绒藤花叶病的病毒病原被引量：1
- 2024年
- 鹅绒藤(Cynanchum chinense)是一种传统中药,为明确造成鹅绒藤叶片花叶症状的原因,本研究采用小RNA深度测序技术结合RT-PCR的方法鉴定引起山西太谷鹅绒藤病毒花叶症状的病原,并通过生物信息学的手段对病毒序列进行分析。结果表明,发病鹅绒藤样品经小RNA深度测序技术共获得15039334个原始序列,将拼接contigs与NCBI中的病毒数据库进行比对注释,结果显示病原为苜蓿花叶病毒(AMV)和黄瓜花叶病毒(CMV)。利用特异引物克隆了AMV和CMV的外壳蛋白(CP)和移动蛋白(MP)基因全序列,分别命名为AMV-BR和CMV-BR。通过序列比对分析,发现AMV-BR CP氨基酸序列和核苷酸序列与AMV分离物AMV-Gyn(MH332899)、Dich-rep(MW835989)和VIC-320(MF075254)的相似性均达到100%;MP氨基酸序列和核苷酸序列与AMV分离物AMV-Gyn(MH332899)的相似性最高,均为99.3%。CMV-BR CP氨基酸序列和核苷酸序列与CMV亚组ⅠA中CMV分离物YA17(MH119159)的相似性最高,分别为100%和99.1%;MP氨基酸序列和核苷酸序列与CMV亚组Ⅰ分离物PV-0185(ON013887)的相似性最高,分别为98.2%和96.4%。MP和CP氨基酸序列系统进化分析表明,CMV-BR属于CMV亚组Ⅰ中的成员。这是首次在山西鹅绒藤上检测到AMV和CMV,该研究有助于深入了解AMV、CMV的分子进化,也为鹅绒藤病毒病的防治提供一定的理论依据。
- 杜江马振男王德富牛颜冰
- 关键词：鹅绒藤苜蓿花叶病毒
- 草苁蓉酒发酵工艺研究被引量：1
- 2019年
- 以大米、糯米、草苁蓉为原料,通过单因素试验和正交试验研究了草苁蓉粉用量、酒曲添加量和发酵时间对草苁蓉酒感官评分的影响。结果显示,用大米发酵时,当酒曲接种量为0.12%、草苁蓉粉末的添加量为0.2%、发酵时间为2.0 d时,所得发酵液感官评价最高;而以糯米发酵时,当酒曲接种量为0.12%、草苁蓉粉末的添加量为0.8%、发酵时间为2.0 d时,所得发酵液感官评价最高。由此得到的草苁蓉酒色泽呈亮黄色,澄清度高,甜度适宜。
- 龙丹丹王德富申少斐牛颜冰
- 关键词：草苁蓉发酵甜酒感官评价
- 一种牡丹玫瑰保健饮料及其制备方法
- 本发明公开了一种牡丹玫瑰保健饮料，由以下质量百分比的原料组分制成：中药混合提取液15～40％、白砂糖5～26％、柠檬酸0.2～0.6％、β环状糊精0.03％、余量为水。本发明还公开了上述牡丹玫瑰保健饮料的制备方法，包括以...
- 王德富龙丹丹牛颜冰申少斐崔丽艳王疆然王燕花
- 文献传递
- 一种响应面优化黄芪茎叶总黄酮的提取方法
- 本发明公开了一种响应面优化黄芪茎叶总黄酮的提取方法，包括以下步骤：S1、预处理；S2、混配；S3、超声波连续浸提：S3‑1：将步骤S2中得到的黄芪茎叶粗提溶液置于超声波反应器中，在100W的超声功率下、温度为40‑80℃...
- 王德富牛颜冰杨智明张学治崔丽艳杜江吴永娜贾彬良
- 文献传递
- 栽培黑果枸杞活性成分生物合成关键基因克隆及表达分析被引量：1
- 2020年
- [目的]本文旨在对不同生长期花色苷和原花青素含量及关键酶基因表达分析,为从分子生物学水平确定黑果枸杞最佳采收期提供理论依据,同时对生物合成途径中关键酶基因进行克隆,为揭示黑果枸杞花色苷和原花青素的生物合成机制以及利用基因工程技术进行黑果枸杞靶向育种奠定基础。[方法]分别利用pH示差法和香草醛-盐酸法测定不同时期黑果枸杞花色苷和原花青素含量;通过RT-PCR技术扩增4种关键酶基因LrDFR、LrANS、LrLAR和LrANR的cDNA全长序列,并进行生物信息学分析;利用qRT-PCR分析关键酶基因在黑果枸杞果实不同发育时期的表达情况。[结果]黑果枸杞果实花色苷在黑果成熟期含量最高(6.08 mg·g^-1 DW),原花青素在半紫半黑果期含量最高(22.3 mg·g^-1 DW);克隆得到4种关键酶基因的序列全长分别为1140 bp、1251 bp、1002 bp和1017 bp,分别编码379、416、333和338 aa的蛋白质,序列分析表明4种基因所编码氨基酸均具有所属蛋白家族的典型特征。[结论]花色苷在黑果成熟期含量最高,原花青素在半紫半黑果期含量最高,且随着果实发育和花色苷含量的增加,LrDFR和LrANS表达水平也逐渐上升,而LrLAR和LrANR则呈先上升后下降的表达模式;当黑果枸杞用于原花青素提取时,可适当提前采收期;研究结果为从分子生物学水平确定黑果枸杞最佳采收期提供理论依据,也为黑果枸杞花色苷与原花青素生物合成机制的揭示奠定基础。
- 王德富杨锋崔丽艳龙丹丹李玲玉申少斐牛颜冰
- 关键词：黑果枸杞花色苷原花青素基因克隆
- 连翘叶茶对大鼠肝硬化的影响及其机理研究
- 2024年
- 【目的】研究连翘叶茶粗提物及其茶水对四氯化碳(CCl4)诱导大鼠肝硬化的影响,阐明不同剂量连翘叶茶粗提物及茶水对肠道菌群多样性的影响及其机理。【方法】30只雄性SD大鼠按照平均体重相近的原则随机分为对照组、模型组、低、中、高剂量连翘叶茶灌胃组和茶水组,采用皮下注射CCl_(4)+灌胃CCl_(4)橄榄油混合液的方法构建肝硬化大鼠模型,建模成功后给予不同剂量连翘叶茶粗提物灌胃及茶水组干预10 d后,收取血清进行ELISA检测,肝脏组织通过HE染色和提取RNA进行RT-PCR检测,粪便样本进行16S rRNA测序。【结果】连翘叶茶粗提物及茶水组均能显著改善大鼠肝硬化形态,尤其茶水组可明显逆转肝硬化状态,肝细胞脂肪变性、中央静脉周围炎性细胞浸润和汇管区纤维结缔组织增生较模型组均明显改善;连翘叶茶粗提物及茶水组可显著提高益生菌Rothia、Parabacteroides和Lactobacillus丰度,促进不饱和脂肪酸合成和酸呼吸通路的富集;连翘叶茶粗提物及茶水组可抑制血液中DAO、TLR-4、LPS内毒素因子的水平,促进抑炎因子1L-4及肠道屏障功能因子ZO-1表达,各组之间肠道微生物组成与DAO、LPS、1L-4和TLR4相关,其中与肠道损伤指标DAO相关性最大。【结论】连翘叶茶粗提物及茶水组可能通过改善大鼠肝硬化形态、减弱炎症反应、改善肠道微生态功能失调及保护肠屏障功能抑制肝硬化发生。
- 吴永娜滕文龙张磊王德富牛颜冰
- 关键词：肝硬化微生物多样性炎症因子
- 侵染苘麻的菜豆金色黄花叶病毒的鉴定及基因组结构分析
- 2024年
- 为明确引起我国山西晋中地区苘麻叶片表现皱缩和花叶症状的病原物及其基因组分子特征,本研究利用双生病毒简并引物扩增获得病毒基因组部分序列,经测序、比对后设计特异性引物扩增病毒基因组序列,进而通过生物信息学方法构建系统发育树并进行序列分析。结果表明:引起苘麻叶片皱缩、花叶的病原物为番茄黄化曲叶病毒(tomato yellow leaf curl virus,TYLCV),将该分离物命名为TYLCV-Abu,GenBank登录号为OP293347,但未扩增到β卫星。该病毒DNA-A基因组全长为2782 bp,含有6个开放阅读框。TYLCV-Abu分离物与TYLCV茄子分离物KSQ1-3(GenBank登录号KC428753)的核苷酸序列一致性最高,为98.99%,其中C4和V2编码的蛋白变异较大。重组结果分析显示,分离物TYLCV-Abu是由TYLCV-F(GenBank登录号KY971326)和TYLCV-KSQ1-3重组得到,重组区域为其基因组2617-2782 nt区域。这是首次从苘麻样品中扩增到TYLCV全基因组序列并进行分析。
- 杜江马振男崔丽艳王德富牛颜冰
- 关键词：苘麻
- 菊花R病毒杭白菊分离株全基因组序列测定与分析被引量：4
- 2020年
- 杭白菊作为著名的中药"浙八味"之一,种植规模和产区不断扩大,但其病毒病的发生也日益严重,对其产量和品质造成严重影响。本研究利用双链RNA(double-stranded RNA,dsRNA)和非序列依赖PCR扩增(sequence-independent amplification,SIA)等方法,对感病杭白菊病原物进行鉴定,为杭白菊病毒病原的检测构建一套快速和简便的方法。结果表明,感病杭白菊被菊花R病毒(Chrysanthemum virus R,CVR)侵染,将其命名为CVR-TX。通过对其全基因组进行序列扩增与分析,获得其全长基因组为8872 bp,编码6个ORF,具有Carlavirus属病毒的典型特征。基于全基因组核酸序列以及复制酶、外壳蛋白氨基酸的序列比对发现,CVR-TX与CVR-BJ同源性最高,分别为85.5%、96.0%和96.3%;与Carlavirus属其他病毒同源性分别在48.2%~54.4%、46.9%~55.3%和36.8%~59.5%,因此CVR被确定为一种新的Carlavirus属病毒。系统进化分析表明,基于全长基因组、复制酶(replicase)基因和外壳蛋白(coat protein,CP)基因与CVR-BJ聚为一簇,亲缘性最近。本研究获得了CVR-TX的全长基因组,丰富了CVR的基因组信息,通过生物信息学分析明确其种属关系和区域变化情况,从而为建立CVR可靠灵敏的分子检测手段和有效的防控措施提供理论基础。
- 裴燕妮咸珅齐永红张丽王德富牛颜冰
- 关键词：杭白菊全基因组序列
- 一种三重浓度梯度微流控芯片装置及其应用
- 本发明公开了一种三重浓度梯度微流控芯片装置及其应用。属于微流控芯片技术领域。包括具体的三重浓度梯度微流控芯片装置结构。本发明证明了三重浓度梯度微流控芯片装置在宽流速范围内保持稳定有效的线性浓度，满足研究不同剂量的候选药物...
- 申少斐刘亚君王德富牛颜冰张芳娟
- 油菜花叶病毒山西地黄分离物的全基因组序列测定与分析被引量：10
- 2016年
- 采用双链RNA（double-stranded RNA,dsRNA）技术和非序列依赖PCR扩增（sequence-independent amplification,SIA）方法对感病地黄进行分子鉴定,并测定油菜花叶病毒（Youcai mosaic virus,YoMV）山西地黄分离物（YoMV-SX）的基因组全序列。序列测定及分析发现侵染地黄的病毒为油菜花叶病毒（Youcai mosaic virus,YoMV）。获得YoMV-SX（Gen Bank登录号JX422022）全长为6 304 nt,5＇UTR长度为68 nt,3＇UTR长度为236 nt,含有4个开放阅读框（open reading frame,ORF）。全序列核苷酸一致性分析显示Yo M V-SX与Tobamovirus亚组Ⅲ中分离物的一致性为90.7%-96.0%,与同属亚组Ⅰ和Ⅱ的一致性仅为50.2%-63.3%。全序列系统进化分析表明,YoMV-SX与YoMV-Wh形成一个独立分支,亲缘关系最近。这是YoMV侵染地黄的首次报道。
- 王德富张西梅杨锋牛颜冰
- 关键词：地黄
