王恒梁
- 作品数：27 被引量：51H指数：4
- 供职机构：军事医学科学院更多>>
- 发文基金：国家重点基础研究发展计划国家自然科学基金国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- rhGM-CSF基因真核表达载体的构建及其在COS-7细胞和小鼠体内的表达被引量：2
- 1996年
- 将ｈＧＭＣＳＦ基因克隆至真核表达质粒ｐＣＤＳ中，构建成重组质粒ｐＣＧ１。用电穿孔法将质粒ｐＣＧ１导入ＣＯＳ７细胞和直接注射小鼠骨骼肌内，ＥＬＩＳＡ检测显示质粒ｐＣＧ１转染ＣＯＳ７细胞后４８、７２、９６ｈ和肌注质粒ｐＣＧ１后ｄ１０、ｄ１５、ｄ２０、ｄ２５小鼠体内均有ｈＧＭＣＳＦ的表达。生物学活性检测显示含肌注ｐＣＧ１的小鼠血液有维持ＴＦ１细胞生长的作用。
- 张述苏国富鲍云华芮贤良叶棋浓吴进冬隋拥君王恒梁徐永强
- 关键词：HGM-CSF真核细胞
- p21基因的克隆及其对肺癌细胞生长的抑制
- 1997年
- 用反转录PCR从正常人胚胎肺细胞中获得了p21基因cDNA,将其插入真核表达载体pMSCVneo,构建成重组质粒pMS21,并将其转染至肺癌细胞株A549。通过集落形成观察到p21对肺癌细胞具有明显的抑制作用,经RNA狭缝杂交、Western印迹分析和免疫细胞化学实验证实这是p21表达的结果。荷瘤裸鼠实验也进一步证实了p21对肺癌细胞具有明显的抑制作用。
- 王恒梁叶棋浓张述张毅苏国富
- 关键词：P21基因治疗肿瘤抑制
- 人白血病细胞株中G_(sα)转录物的新型异常剪接被引量：1
- 1998年
- Gsα是与激活腺苷酸环化酶信号转导途径相关的蛋白质 .不同的Gsα mRNA是由不同形式的剪接或利用不同的启动子产生的 .报道人白血病细胞株中Gsα转录物的一种新型异常剪接 .以来自Jurkat细胞株的人白血病文库cDNA及人白血病细胞株HL_6 0mRNA反转录后的cDNA第一链为模板 ,PCR扩增出Gsα基因完整编码区 (命名为GsαLeu) .DNA序列分析表明 ,GsαLeu与正常Gsα相比有 2个区域发生不改变阅读框架的缺失 ,一个位于正常Gsα第 2 3个氨基酸与第 2 49个氨基酸之间 ,另一个位于第 2 5 4个氨基酸与第 2 6 0个氨基酸之间 ,GsαLeu的这种结构提示其在白血病中起着重要的作用 .将GsαLeu完整编码区插入pGEX_2T融合蛋白表达载体的凝血酶位点下游 ,高效表达了GST/GsαLeu融合蛋白 ,表达产物经亲和层析 ,一步获得了电泳纯的GST/GsαLeu,为进一步研究GsαLeu的功能打下了基础 .
- 叶棋浓姚潇王恒梁张述刘怀田苏国富黄翠芬周廷冲
- 关键词：剪接PCR白血病细胞株
- 表达自杀基因的减毒伤寒沙门氏菌对肿瘤的抑制作用
- 2001年
- 目的研究表达自杀基因的减毒鼠伤寒沙门氏菌对肿瘤的抑制作用。方法把表达自杀基因的质粒pcCD导入减毒的鼠伤寒沙门氏菌,以荷瘤鼠为模型研究沙门氏菌/自杀基因与5FC系统对肿瘤的抑制作用。结果该系统能抑制肿瘤生长,延长荷瘤鼠的存活期。结论鼠伤寒沙门氏菌可以作为基因治疗的候选载体。
- 金明韩照中冯尔玲王恒梁苏国富黄翠芬
- 关键词：自杀基因鼠伤寒沙门氏菌基因治疗肿瘤治疗
- 人源CPP32基因的表达及其对大肠杆菌生长抑制作用的研究
- 1998年
- 将人源ＣＰＰ３２基因分别克隆到载体ｐＢＶ３２１和ｐＥＸ３１Ｂ中，得到ｐＢＶ３２１／ＣＰＰ和ｐＥＸ３１Ｂ／ＣＰＰ两种重组质粒。将它们分别转化到大肠杆菌中的结果显示，诱导真核细胞程序性死亡的ＣＰＰ３２基因对大肠杆菌的生长也有明显的抑制作用。ＮｏｒｔｈｅｒｎＢｌｏｔ显示ＣＰＰ３２基因在转录水平上得到了表达。
- 姚潇叶棋浓袁仕取王恒梁刘全宏王恒梁
- 关键词：CPP32基因表达大肠杆菌细胞凋亡蛋白酶
- 肿瘤细胞株中新型Gsα缺失突变体与CPP32的相互作用被引量：1
- 1998年
- 蛋白酶尤其是ＩＣＥ家族的蛋白酶是细胞死亡机制的核心成分。ＩＣＥ蛋白酶家族中，ＣＰＰ３２（又称Ｙａｍａ，Ａｐｏｐａｉｎ）在不同形式的凋亡途径中起核心作用，可引起包括肿瘤细胞在内的细胞凋亡。目前发现，ＣＰＰ３２可切割多种底物，如ＰＡＲＰ、Ｕ１－７０ｋ、Ｄ...
- 叶棋浓姚潇王恒梁王恒梁黄翠芬苏国富
- 关键词：肿瘤细胞株细胞凋亡突变体CPP32
- 军事医学科学院蛋白质组学研究进展被引量：4
- 2011年
- 蛋白质组学是后基因组时代生命科学研究的热点和前沿领域.军事医学科学院是国内最早开展蛋白质组研究的单位之一,其蛋白质组学研究的发展不仅对中国蛋白质组研究起到重要的引领作用,也对国际蛋白质组学的发展做出了重要贡献.本文将重点介绍军事医学科学院的科学家在国际人类肝脏蛋白质组计划以及疾病蛋白质组、病原微生物蛋白质组等领域的研究成果.
- 钱小红姜颖王建朱云平李栋魏开华王恒梁
- 关键词：蛋白质组学表达谱肝病蛋白质相互作用病原微生物
- 白血病细胞中新型G_sα缺失体与CPP32的相互作用(英文)被引量：1
- 1998年
- CPP32/Yama/Apopain/Caspase-3在不同形式的细胞凋亡途径中起核心作用。目前发现,CPP32可切割多种底物,但以CPP32为引诱蛋白用酵母双杂交系统分离与其相互作用的分子方面的研究,在国内外尚未见报道。为进一步了解肿瘤细胞信号转导途径,本文用该系统筛选与CPP32(作为引诱蛋白)相互作用的蛋白质。将CPP32引诱蛋白表达载体和肿瘤细胞文库质粒导入到酵母细胞HF7C中,用Trp-Leu-His-营养缺陷培养基初步筛选文库中插入cDNA所编码的序列与CPP32相互作用的菌落,再进一步检测β-半乳糖苷酶活性,结果从200多个Trp^+Leu^+His^+酵母菌落中获得7个LacZ^+阳性的酵母菌落。经分离阳性菌中的文库质粒和序列分析发现,在人白血病细胞株Jurkat中,新型G_sα缺失体(其正常蛋白与腺苷酸环化酶信号转导途径的激活相关)可与CPP32相互作用。纯化大肠杆菌中表达的G_sα缺失体及CPP32,用ELISA法进一步证实了这种相互作用。结论推测白血病细胞(至少某种白血病细胞)中CPP32参与了腺苷酸环化酶信号转导途径。
- 叶棋浓姚潇王恒梁张述逯好英苏国富黄翠芬周廷冲
- 关键词：CPP32白血病细胞细胞凋亡
- p21基因的克隆及其对肿瘤抑制的研究
- 该文首先从正常人胚胎肺细胞中提取了细胞总RNA,反转录合成cDNA第一链,再以此为模板进行PCR,得到了编码成熟p21的cDNA.该cDNA用EcoRl、BamHl双酶切后,回收含p21基因的长约500bp的DNA片段,...
- 王恒梁
- 关键词：P21P53肿瘤抑制
- 人单核细胞趋化蛋白-15'端翻译起始区的改构及其表达
- 1998年
- 应用ＰＣＲ技术优化人单核细胞趋化蛋白－１（ＭＣＰ－１）基因的５端翻译起始区，并将其亚克隆入大肠杆菌表达载体ｐＢＶ２２０中，经ＤＮＡ测序证实优化成功，且在大肠杆菌中表达出ＭＣＰ－１蛋白，表达产物约占菌体总蛋白的１０％左右，Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ检测表明，表达产物可与ＭＣＰ－１抗体发生特异性反应。
- 张毅叶棋浓王恒梁刘及苏国富
- 关键词：PCR原核表达
