王新文
- 作品数：65 被引量：348H指数：11
- 供职机构：第四军医大学更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划国家自然科学基金福建省科技厅科研基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学文化科学自动化与计算机技术更多>>
- EGF对真皮成纤维细胞中cyclinD1和CDK-4表达的影响被引量：17
- 2002年
- 目的 探讨表皮生长因子 (EGF)对作为皮肤组织工程种子细胞之一的真皮成纤维细胞中 cyclin D1和 CDK- 4表达的影响 ,以从细胞周期探讨 EGF促进真皮成纤维细胞生长的机制 .方法 用含 10 0 m L· L- 1 胎牛血清的 DMEM,加入5 0 mg· L- 1的 EGF培养 SD大鼠的真皮成纤维细胞 ,通过MTT检测、流式细胞仪分析观察细胞的生长状态 ,免疫组化检测 cyclin D1和 CDK- 4的表达 ,结合流式细胞仪分析观察细胞的周期变化 .结果 MTT检测、流式细胞仪结果都显示 5 0mg· L- 1 的 EGF能显著促进真皮成纤维细胞的生长增殖 ,免疫组化结果显示 ,二者一致 .结论 5 0 mg· L- 1 的 EGF对真皮成纤维细胞的生长有极大的促进作用 ,促进了细胞周期蛋白 cyclin D1和 CDK- 4的表达 ,使细胞 G1期变短 .
- 王军琳刘源金岩吕红兵赵宇王新文董蕊
- 关键词：细胞周期蛋白类细胞周期蛋白质依赖激酶类表皮生长因子-尿抑胃素真皮成纤维细胞
- 组织工程皮肤中黑色素细胞的培养纯化被引量：1
- 2002年
- 目的探讨如何以简便快速的方法获得大量高纯度的黑色素细胞。方法以包皮组织作为细胞来源,用消化法获得表皮细胞悬液,用该实验室设计的方法对细胞进行纯化,Dopa染色、S100免疫组化和透射电镜鉴定细胞来源。结果用该实验室的纯化方法培养的黑色素细胞贴壁快,细胞产量高,未见角朊细胞和成纤维细胞污染。结论结果表明该实验方法可以快速获得大量高纯度的黑色素细胞。
- 李媛王新文金岩刘源
- 关键词：皮肤黑色素细胞纯化
- 组织蛋白酶C(CTSC)在正常小鼠组织中的表达模式观察
- <正>目的观察正常小鼠8种组织中组织蛋白酶C的表达位置和强度,从而为进一步的研究该酶在生理和病理过程中的作用和机制做铺垫。方法 6只8周龄C57雄性小鼠,经1%戊巴比妥钠麻醉后,4%多聚甲醛经心脏灌注。取背部皮肤、脚掌部...
- 胡鑫王新文王勤涛
- 文献传递
- 组织蛋白酶C在牙周炎牙龈的表达研究
- <正>研究目的掌跖角化-牙周破坏综合征(PLS)是一种隐性遗传病,由组织蛋白酶C(CTSC)基因突变导致,主要表现为牙周组织的破坏和掌跖皮肤的异常角化。本实验通过研究普通慢性牙周炎患者牙周组织CTSC的表达规律,为PLS...
- 王津津王新文王勤涛
- 文献传递
- rhBMP-2对舌癌细胞Tca8113增殖能力影响的研究被引量：1
- 2004年
- 目的 :探讨人重组骨形成蛋白 2 (recombinanthumanbonemorphogeneticprotein 2 ,rhBMP 2 )对舌癌细胞Tca8113增殖能力的影响 ,以深入了解口腔舌癌的恶变机制。方法 :用含 10 0ml/L胎牛血清的RMPI 164 0培养基 ,加入 5 0 μg/L的rhBMP 2培养舌癌细胞Tca8113 ,通过细胞生长曲线、MTT检测、流式细胞仪分析观察细胞的生长状态 ,免疫组化检测细胞周期蛋白依赖性激酶 4(cyclin dependent kinases 4,CDK 4)的表达来观察细胞的周期变化。 结果 :5 0 μg/L的rhBMP 2能显著增进Tca8113细胞的增殖 ,免疫组化结果显示周期蛋白CDK 4的表达增强。结论 :5 0 μg/L的rhBMP 2能显著促进Tca8113细胞的增殖 ,并上调细胞周期蛋白的表达 ,说明BMP 2可能在舌癌的发生发展过程中起着重要作用。
- 王军琳刘源金岩王新文赵宇
- 关键词：RHBMP-2舌癌TCA8113癌细胞人重组骨形成蛋白-2
- 人牙髓干细胞的体外分离、培养及鉴定被引量：10
- 2004年
- 目的 :体外分离、培养人牙髓干细胞 ,从不同角度对其进行鉴定。方法 :采用胶原酶和Dispase酶联合消化法培养人牙髓干细胞 ,有限稀释法分离纯化 ,将克隆形成的细胞通过透射电镜观察其超微结构、流式细胞仪细胞周期分析及抗波形丝蛋白 (Vimentin)、CD44、骨粘素 (ON)、牙本质涎蛋白 (DSP)免疫组化染色方法进行鉴定。结果 :通过有限稀释法获得了人牙髓干细胞克隆 ,透射电镜下观察这种克隆形成细胞具有干细胞典型的超微结构特点 ,大多数细胞处于G0 /G1期 ,为细胞周期的静止期 ,并具有牙源性未分化间充质细胞的表型特点。结论 :克隆化培养是人牙髓干细胞较为有效的分离纯化方法 ,该方法分离的人牙髓干细胞具有干细胞的结构、细胞周期及表型特点。
- 贺慧霞金岩史俊南刘源王亦菁周泽渊王新文
- 关键词：人牙髓干细胞细胞克隆超微结构细胞周期
- 构建含血管结构的组织工程皮肤的研究被引量：12
- 2004年
- 目的 探讨应用组织工程方法构建含有血管结构的组织工程皮肤。 方法 以新生儿脐带静脉和包皮作为细胞来源 ,用消化法获得血管内皮细胞、皮肤角朊细胞和成纤维细胞 ,用设计的组织工程皮肤培养系统构建组织工程皮肤。实验组 :真皮层含有 1∶ 1的成纤维细胞和血管内皮细胞 ,在真皮表面种植角朊细胞以形成表皮 ;对照组 :真皮层只含有成纤维细胞 ,不含血管内皮细胞 ,在真皮表面种植角朊细胞以形成表皮。 HE染色和免疫组织化学染色检测第 因子抗体 ,观察两种组织工程皮肤真皮层中血管结构的形成情况。用所构建的两种组织工程皮肤修复裸鼠的全层皮肤缺损。 结果 所构建的组织工程皮肤结构完整 ,细胞状态良好 ,实验组真皮层内含有血管样结构 ,对照组未见到血管样结构。修复裸鼠全层皮肤缺损 ,肉眼观察皮肤缺损愈合 ,染色显示移植部位有大量血管长入。 结论 构建的组织工程皮肤结构完整 ,细胞状态良好 ,真皮层中形成了微血管样结构。
- 刘源金岩王新文赵宇李媛
- 关键词：组织工程皮肤微血管新生儿脐带静脉包皮
- 人表皮干细胞在不同培养基中生长状态的观察及其生物学性状的初步探讨被引量：13
- 2005年
- 目的 筛选合适的保持人表皮干细胞特性的体外培养基,并观察其生物学性状。 方法 按不同培养基分组,配制FAD培养基和FAD加入不同浓度的碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growth factor,b FGF)的培养基,即FAD、FAD1、FAD2、FAD3等组,以及角质化细胞专用无血清培养基(keratinocyte- SFM,K- SFM) ,同时应用同一个体的成纤维细胞经丝裂霉素处理后作滋养层,培养人表皮干细胞。通过细胞生长曲线及MTT检测,观察细胞的生长状态。在体外培养扩增表皮干细胞后,利用透射电镜、流式细胞仪分析、Brd U检测,观察细胞的生长状态;结合流式细胞仪分析,观察细胞周期的变化。 结果 人表皮干细胞在FAD组中生长良好,加入b FGF可进一步改善细胞的生长状态。扩增后细胞检测提示,人表皮干细胞在体外培养过程中呈典型的克隆性生长,生长周期长。流式细胞仪检测表明,人表皮干细胞80 .2 %处于G0 /G1 期;透射电镜观察见其细胞器少,细胞核浆比大。 结论 加入b FGF的FAD培养基并同时利用滋养层,更适合人表皮干细胞的生长,在稳定状态下是一种处于静止期的幼稚细胞。
- 董蕊金岩刘源聂鑫王新文赵宇
- 关键词：人表皮干细胞生物学性状流式细胞仪分析细胞生长曲线体外培养扩增MTT检测
- 兔口腔黏膜固有层多能干细胞的分离培养被引量：4
- 2006年
- 目的:探讨兔口腔黏膜固有层中是否含有间充质干细胞并对其进行分离培养。方法:利用间充质干细胞的粘附特性,对兔口腔黏膜固有层多能干细胞进行筛选分离。体外培养扩增后,以CD44、角蛋白抗体(Ck)、波形丝蛋白(Vim)抗体,免疫组化方法对细胞进行鉴定;并用MTT方法检测其增殖,流式细胞术检测其细胞周期。结果:所筛选培养的细胞可在体外呈克隆性生长,细胞表面表达CD44分子,而不表达Ck、Vim;细胞增殖活力旺盛;流式细胞检测结果显示95.1%的细胞处于G0/G1期,与未经筛选的对照组有明显差异。结论:本实验证实在兔口腔黏膜固有层中含有成体干细胞,这类细胞可在体外成功分离并进行扩增培养。口腔黏膜固有层可能是间充质干细胞的又一重要来源,为研究间充质干细胞和口腔黏膜的生物学特性提供基础。
- 董蕊金岩刘晓亮王新文雷娟赵宇
- 关键词：口腔黏膜多能干细胞细胞培养
- 构建含黑色素细胞组织工程皮肤的研究被引量：30
- 2003年
- 目的 探讨运用组织工程方法构建含有黑色素细胞的组织工程皮肤。 方法 以包皮组织作为细胞来源 ,采用消化法获得角朊细胞、成纤维细胞和黑色素细胞 ,在自行设计的组织工程皮肤培养系统构建组织工程皮肤。行Dopa染色、透射电镜和 S- 10 0免疫组织化学检测构建的皮肤中黑色素细胞的分布和状态。 结果 构建的组织工程皮肤结构完整 ,细胞状态良好 ,Dopa染色、透射电镜和 S- 10 0免疫组织化学检测均显示含有大量黑色素细胞并处于良好状态。 结论 构建了含黑色素细胞的组织工程皮肤 ,可用于下一步的动物实验和临床实验。
- 刘源金岩王新文赵宇李媛
- 关键词：黑色素细胞组织工程皮肤细胞培养
