王蔚
- 作品数：7 被引量：34H指数：5
- 供职机构：北京大学生命科学学院更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生更多>>
- 小肠三叶因子对盐酸诱导的大鼠胃溃疡的预防和治疗作用被引量：6
- 2000年
- 目的 探讨克隆表达的rh ITF在模拟胃肠道条件下的稳定性和抗胃溃疡的作用机制。方法 采用质谱法及盐酸诱导的大鼠胃溃疡模型 ,测定rh ITF在模拟胃肠道条件下的结构稳定性和大鼠腺胃粘膜损伤级别 ,损伤指数及胃酸度 ,胃蛋白酶活性及胃排空能力。结果 酸对rh ITF相对分子量没有影响 ,胃蛋白酶仅从N端切除 6个氨基酸残基。rh ITF可明显降低大鼠腺胃粘膜损伤级别和损伤指数 ,但对胃酸分泌 ,胃蛋白酶活性及胃排空能力没有影响。结论 rh ITF在体外对酸和胃蛋白酶有一定的抗性 ,其对胃溃疡的治疗和预防作用不是通过降低攻击因子 (酸和蛋白酶 )和影响胃的自主运动实现的。
- 口如琴王蔚李令媛茹炳根
- 关键词：胃溃疡
- 三叶因子家族被引量：7
- 2000年
- 三叶因子家族是一类具有特殊结构———P结构域的蛋白质家族 ,P结构域包含 6个高度保守的半胱氨酸残基及精氨酸、甘氨酸、色氨酸和苯丙氨酸残基 .半胱氨酸残基以Cys1 Cys5 ,Cys2 Cys4,Cys3 Cys6连接形成三个链内二硫桥 .已发现多种含有P结构域的多肽 ,其中最引人注目的是TFF1/pS2、TFF2 /SP及TFF3/ITF ,在正常组织中其主要表达位点分别为胃基底和胃体 (TFF1/pS2 )、胃窦深部的小凹 (TFF2 /SP)及小肠和大肠杯状细胞 (TFF3/ITF) .TFF可能具有维持粘膜屏障和促进溃疡治愈的功能 .TFF含有α折叠 (α helix) ,β片层 (β sheet) .三叶因子家族多肽的作用机理仍处于猜测阶段 ,现有与粘蛋白共同作用和与受体作用两种假说 .
- 口如琴王蔚李令媛茹炳根
- 关键词：三叶肽
- 人小肠三叶因子缺失半胱氨酸57突变体的构建及其生物活性
- 2000年
- 用 PCR方法构建了一个不能形成二聚体的 C端缺失半胱氨酸 57的 h ITF突变体 .将其克隆到大肠杆菌表达载体 p GEX- 4T- 1中 ,ITPG诱导表达 ,融合蛋白经 Glutathione- Sepharose 4B亲和层析 ,凝血酶酶切和 Sephacryl S 1 0 0纯化 ,得到突变体蛋白 .SDS- PAGE,氨基酸组成 ,飞行质谱 ,N端氨基酸序列测定结果与期望值一致 .研究表明突变体的生物学活性有所降低 .对胃蛋白酶作用的稳定性降低 .
- 口如琴王蔚李令媛茹炳根
- 关键词：生物活性
- 人小肠三叶因子在大肠杆菌中的表达被引量：11
- 1999年
- 利用PCR技术将人小肠三叶因子(hITF)基因重组入表达载体pGEX-4T-1,构建了融合蛋白GST-hITF的重组表达质粒pGTF,在大肠杆菌中诱导表达。表达的融合蛋白经亲和层析、凝血酶切和凝胶过滤层析得到纯化的hITF蛋白。测定了重组蛋白的氨基酸组成、分子量及其对酸和蛋白酶的抗性。Western印迹表明重组蛋白具有hITF的抗原性,并对大鼠胃溃疡具有明显的预防和保护作用。
- 王蔚口如琴李令媛茹炳根
- 关键词：基因重组融合蛋白
- 三叶肽:从结构到功能被引量：10
- 2001年
- 三叶结构域是一段由３８～３９个氨基酸组成的多肽序列，其中包含６个高度保守的半胱氨酸残基，这 ６个半胱氨酸残基以 １－５， ２－４， ３－６的交联方式形成三对二硫键，使多肽链折叠成特征性的三叶结构。已发现的哺乳动物三叶肽有三种：ｐＳ２、ＳＰ及ＩＴＦ。三叶肽通常位于消化道腔面的粘膜层，具有保护和修复功能，在维持粘膜的完整性中发挥着重要作用。
- 王蔚口如琴李令媛茹炳根
- 关键词：三叶肽溃疡病结构域消化道
- 人小肠三叶因子的克隆及酶联免疫吸附检测
- 2000年
- 人小肠三叶因子的cDNA ,克隆到原核表达载体 pGEX 4T 1中 ,经IPTG诱导后 ,hITF以GST hITF融合蛋白的形式表达 ,融合蛋白占细菌总蛋白的 15%左右。经过Glutathione Sepharose4B亲和柱和Sephacry1S 10 0分子筛层析纯化了hITF。SDS PAGE和氨基酸分析证明得到了hITF纯品。以天然hITF为抗原免疫青紫蓝兔制备了抗血清 ,用纯化的IgG建立了hITF的酶联免疫吸附检测 (ELISA)方法 ,给出了标准工作曲线。应用于纯化过程中样品峰的确立。
- 口如琴王蔚李令媛茹炳根
- 关键词：克隆三叶肽
- 人小肠三叶因子的理化性质及光谱学行为被引量：5
- 1999年
- 酵母表达的重组人小肠三叶因子(rh-ITF)飞行质谱测定二聚体的分子量为13154,等电点约为4.5～4.75.紫外和荧光光谱表明rh-ITF在pH2.7～8.4和pH2.7～7.7时,吸收值增加。随pH进一步增加,吸收值降低。推测色氨酸和酪氨酸所处微环境发生了一定的变化。园二色谱表明在不同pH下,rh-ITF所含二级结构百分数有所变化,但仍保留有一定的二级结构,即含有一定数量的α-helix,β-sheet或β-turn,其三级结构基本不变。光电滴定和有机溶剂微扰法表明rh-ITF分子中有两个酪氨酸,一个处于分子表面,另一个参与氢键的形成或存在于一个非极性的环境中。rh-ITF中的色氨酸处于分子内部。另外。
- 口如琴王蔚李令媛茹炳根
- 关键词：理化性质
