白宏伟
- 作品数:5 被引量:4H指数:1
- 供职机构:内蒙古农业大学更多>>
- 相关领域:生物学农业科学更多>>
- PiggyBac转座子载体的构建与在牛成纤维细胞中转座位点的分析
- 本研究利用piggybac转座子为载体将嗜热菌糖苷酶(LacS)基因整合到牛成纤维细胞的基因组中,并分析了piggybac转座子在牛成纤维细胞中的转座效率和转座位点的特性。同时,在研究中探讨了转座子和转座酶二元载体转染牛...
- 白宏伟
- 关键词:PIGGYBAC转座子
- 文献传递
- 嗜热菌β-糖苷酶基因乳腺特异性表达载体鉴定被引量:1
- 2013年
- 本研究目的在于对实验室优化构建的嗜热菌β-糖苷酶基因乳腺特异性表达载体PLOX-LacS的功能进行鉴定,检测目的基因能否正常表达。实验通过脂质体介导方法将载体质粒转染小鼠的乳腺癌细胞,筛选获得的阳性细胞通过PCR和RT-PCR的方法进行嗜热菌β-糖苷酶基因的整合检测和表达检测。基因整合PCR鉴定结果表明小鼠乳腺癌细胞基因组中整合有嗜热菌糖苷酶基因,目的片段大小为1203bp;RT-PCR表达鉴定结果显示,目的片段大小与预期相同,说明诱导后的小鼠乳腺癌细胞表达了完整的嗜热菌β-糖苷酶基因。实验表明该载体能够使目的基因整合在乳腺细胞基因组中并特异性表达。为后期生产转基因奶牛提供实验材料。
- 杜威刘羿羿王申元张东白宏伟王凌云周欢敏
- 煤基复混肥养分释放特性及土壤和作物效应
- 我国煤矿废弃物存量巨大且连年增长,对环境和人类造成巨大的危害,煤矿废弃物资源化利用迫在眉睫。本研究旨在探究煤矿废弃物在农业方向的资源利用途径。试验以煤矿废弃物风化煤、煤泥、煤矸石和普通化肥为原料制备煤基复混肥,通过浸水试...
- 白宏伟
- 关键词:养分利用率
- 文献传递
- PiggyBac转座子载体的构建与在牛成纤维细胞转座位点的分析
- 本研究利用piggybac转座子为载体将嗜热菌糖苷酶(LacS)基因整合到牛成纤维细胞的基因组中,并分析了piggybac转座子在牛成纤维细胞中的转座效率和转座位点的特性。同时,在研究中探讨了转座子和转座酶二元载体转染牛...
- 白宏伟
- 关键词:PIGGYBAC转座子单克隆
- 文献传递
- PiggyBac转座子在牛成纤维细胞基因组中的转座效率与整合位点分析被引量:2
- 2013年
- 为分析PiggyBac转座子在牛成纤维细胞中的转座效率和整合位点。用转座子载体转染牛成纤维细胞,传代稀释比例分别为1:30、1:60、1:100,应用TailPCR技术分析PiggyBac转座子在牛基因组中的整合位点的特征。结果显示,转染转座子载体后的细胞,经筛选后到的单克隆数分别为177、134、79,当不加转座酶时得到的单克隆数分别为5、0.2、0差异极显著。在此基础上本实验进一步摸索转座子与转座酶的最佳比例,当转座子与转座酶的比率为10:1、5:1、2:1、1:5、1:10时单克隆数分别为4、89、127、131、125、86。结果显示插入位点与载体连接处都是TTAA序列,插入的位点没有处于外显子的,都是处于内含子、基因间序列或重复序列之中。40个整合位点可以定位到牛的14条染色体上。说明PiggyBac转座子能高效转座牛成纤维细胞并且能整合到基因组中。
- 白宏伟刘羿羿张东王凌云周欢敏
- 关键词:PIGGYBAC转座子转座酶整合位点