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糖结合蛋白的高通量筛选和分离纯化方法的建立: 近年来,人们已经认识到细胞表面糖链与蛋白质的相互作用促进了细胞与细胞间的黏附, 参与了脊椎动物胚胎发育。这种与糖链相互作用的蛋白被称为糖结合蛋白(glycan-binding protein,GBP)。GBP 通过和糖蛋...; 南刚孙秀璇颜桦孙士生杨刚龙简强陈超李铮; 文献传递

凝集素BS-I及Grp78 O-GalNAc糖基化对肝癌细胞迁移和侵袭的影响及其机制研究: 肝细胞癌(HCC)是肝脏内发生的恶性肿瘤,是世界范围内的第五大常见恶性肿瘤,致死率在男性及女性中分列第二位及六位。据统计仅2012年全球就新增肝癌782,500例,而肝癌致死人数则高达745,500人,其中仅中国就占新发...; 简强; 关键词：GRP78

一种在唾液、血清和尿液中检测肝肿瘤的替代生物标志物的方法: 本发明提供一种在唾液、血清和尿液中检测肝肿瘤的替代生物标志物的方法，以快速、简便、准确检测肝肿瘤的替代生物标志物的表达信息。该方法主要步骤有：1)制备分别对应于唾液、血清和尿液样本检测的凝集素芯片；2)分别对唾液、血清和...; 李铮于汉杰朱珉之秦棪楠简强张华; 文献传递

凝集素芯片技术检测糖蛋白方法的建立及初步应用被引量：11: 2009年; 建立了凝集素芯片技术检测糖蛋白的方法,对实验条件进行了优化,应用凝集素芯片初步检测分析了Chang's liver正常肝细胞总蛋白中的糖蛋白糖链构成.将凝集素ConA、GNA固定于环氧化修饰的玻片表面,用Cy3标记标准糖蛋白RNaseB,利用凝集素识别特异糖链的原理建立凝集素芯片检测糖蛋白的方法.摸索出最佳封闭剂是含1%BSA的磷酸缓冲液,最佳孵育时间及温度为3h和室温,最佳孵育缓冲液为含1%BSA和0.05%Tween-20的磷酸缓冲液,并用甘露糖抑制实验验证了凝集素芯片结合的特异性.用包含10种凝集素的芯片,成功解析了标准糖蛋白RNaseB、Fetuin的糖链构成,证实了凝集素芯片检测糖蛋白糖链的可行性.最后用凝集素芯片初步检测分析了Chang's liver正常肝细胞总蛋白中的糖蛋白糖链构成,发现Chang's liver正常肝细胞总蛋白中的糖蛋白可能有多价Sia或GlcNAc、terminalα-1,3 mannose、GalNAc、Galβ-1,4GlcNAc这些糖链结构的存在.蛋白质糖基化是一种重要的翻译后修饰,它在微生物感染、细胞分化、肿瘤转移、细胞癌变等生命活动中起着重要作用,因此近年来蛋白质的糖基化研究受到广泛的重视,但由于缺乏一种简便、快速、高通量的检测手段,蛋白质糖基化修饰的研究发展缓慢.凝集素芯片技术的出现实现了对糖蛋白的快速、准确、高通量的检测分析.; 简强于汉杰陈超李铮; 关键词：糖蛋白糖组学肝细胞

LCA结合糖蛋白磁性微粒分离纯化方法的建立: 用环氧磁粒为载体固定小扁豆凝集素 LCA,对固定化及分离提取糖蛋白的条件进行优化。研究α-甲基甘露糖苷及二价金属离子对于偶联反应的影响。以健康人肝脏细胞 Chang Liver 总蛋白、肝癌细胞 SMMC-7721总蛋白...; 王婷杨刚龙孙士生简强陈超李铮; 文献传递

凝集素芯片检测糖蛋白方法的建立及应用: 目的：蛋白质糖基化是一种重要的翻译后修饰，它在微生物感染、细胞分化、肿瘤转移、细胞癌变等生命活动中起着重要作用，因此近年来蛋白质的糖基化研究受到广泛的重视，但由于缺乏一种能简便、快速、高通量的检测手段，蛋白质糖基化修饰的...; 简强; 关键词：糖组学糖蛋白肝癌血清糖链大骨节病; 文献传递

基于金磁微粒标记技术的可目视化蛋白质芯片检测方法的建立被引量：4: 2007年; 目的应用金磁微粒标记蛋白质技术,建立可目视化蛋白质芯片检测体系,比较金磁微粒和胶体金标记蛋白质技术应用于蛋白质芯片检测效果的优劣。方法将人IgG点制于环氧基修饰的玻片上,分别与金磁微粒和胶体金标记的羊抗人IgG温育,银染显色,肉眼观察并用普通扫描仪记录结果。结果基于金磁微粒的蛋白质芯片人IgG最佳点样浓度为0.2mg/ml,37℃温育2h,银染10～15min,检测结果信噪比高;基于胶体金的蛋白质芯片人IgG最佳点样浓度为0.1mg/ml,37℃温育1h,银染15～20min,检测结果信噪比高。结论金磁微粒标记蛋白质技术应用于蛋白质芯片的检测,具有和胶体金一致的可目视化检测效果,且其标记技术简单,标记的蛋白质可定量。; 唐金凡简强崔亚丽陈超李铮; 关键词：蛋白质芯片胶体金

沉默EVL表达抑制肝癌细胞SMMC-7721的增殖和迁移能力: 2015年; Ena/VASP样蛋白(Ena/VASP like protein,EVL)是Ena/VASP家族成员之一,它参与肌动蛋白细胞骨架重组,以及细胞迁移、收缩环形成和细胞间附着.EVL在肝癌SMMC-7721细胞中高表达.抑制EVL蛋白表达后,SMMC-7721细胞的增殖与迁移能力降低.为研究EVL在肝癌细胞的功能,构建了靶向shRNA干扰表达载体,稳定转染肝癌SMMC-7721细胞.MTT实验和细胞集落形成实验显示,与转染对照比较,沉默EVL蛋白表达可明显抑制SMMC-7721肝癌细胞的增殖、集落形成能力.Transwell实验证明,沉默EVL表达导致SMMC-7721细胞迁移能力降低.进而,流式细胞术揭示,沉默EVL表达的SMMC-7721细胞G0/G1期细胞比例增多.研究结果提示,EVL蛋白可促进肝癌细胞的增殖与迁移;该结果可解释EVL在肝癌细胞中高表达的意义.; 鲁呈韬简强李铮; 关键词：肝癌细胞增殖肝癌

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简强

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