米文娟
- 作品数：42 被引量：94H指数：6
- 供职机构：第四军医大学西京医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划西京医院科技创新基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学农业科学石油与天然气工程更多>>
- 顺铂致聋后大鼠耳蜗螺旋神经元NeuroD的表达被引量：2
- 2012年
- 目的检测神经分化因子NeuroD在大鼠耳蜗螺旋神经元顺铂损伤后的表达变化。方法通过免疫组织化学及Real-TimePCR技术,观察耳蜗螺旋神经元损伤1d、3d、5d后NeuroD的表达变化。正常成年SD大鼠32只随机分为对照组(生理盐水5ml/kg,1次/d,腹腔注射,连续5d),用药1d组(顺铂5mg/kg,腹腔注射),用药3d组(顺铂5mg/kg,1次/d,腹腔注射,连续3d),用药5d组(顺铂5mg/kg,1次/d,腹腔注射,连续5d),每组8只,建立顺铂耳毒性模型。采用Real-TimePCR、免疫组织化学染色检测不同时间螺旋神经元NeuroD的mRNA及蛋白表达变化。结果成功建立顺铂耳毒性大鼠模型,随着用药时间的延长,神经分化因子NeuroD在耳蜗螺旋神经元中呈动态变化。NeuroD的mRNA和蛋白表达在用药1d及3d组分别为2.17±0.39、1.15±0.20及7.02±0.69、2.42±0.40,与对照组及用药5d组比较具有统计学意义(P值<0.01)。结论 NeuroD在用药1d后开始增加,3d后达到高峰,5d后下降;在用药早期有一过性表达增强,后期表达下降同时听力损失明显。表明NeuroD可能参与顺铂损伤螺旋神经元后的修复过程。
- 王娟王亚菲蒋兴旺米文娟邱建华
- 关键词：NEUROD耳蜗螺旋神经元
- 大鼠嗅上皮神经干细胞培养及鉴定
- 2005年
- 陈福权邱建华王锦玲刘顺利米文娟
- 关键词：干细胞培养NSC嗅上皮疾病治疗成年大鼠
- A型肉毒杆菌毒素对豚鼠鼻黏膜腺细胞凋亡的影响被引量：7
- 2005年
- 目的 探讨A型肉毒杆菌毒素 (botulinumtoxintypeA ,BTA)对豚鼠鼻腔黏膜腺细胞凋亡的影响。方法 1 8只雄性豚鼠随机分为BTA组和对照组。BTA组左侧鼻腔以浸有 1 0U (0 .2ml)BTA的Merocel作用 1h ,对照组以生理盐水代替BTA。分别于用药后第 1周、2周、4周全麻下切取豚鼠左侧下鼻甲黏膜 (每组 3只 ) ,4 %多聚甲醛固定后石蜡包埋。切片行末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP缺口末端标记 (TUNEL)和AB PAS染色。结果 BTA局部应用第 1、2周豚鼠鼻黏膜腺体及腺上皮中凋亡细胞显著增加 (P <0 .0 1 ) ,第 4周凋亡指数恢复正常。细胞凋亡主要发生在浆液腺。结论 BTA可诱导豚鼠鼻黏膜浆液腺细胞凋亡。
- 陈福权王锦玲刘顺利米文娟王荫椿
- miR-182可以促进耳蜗前体细胞分化为毛细胞被引量：6
- 2014年
- 目的探讨miR-182诱导耳蜗前体细胞向毛细胞分化的作用及机制。方法从新生大鼠耳蜗中分离培养耳蜗前体细胞并用血清诱导分化,BrdU、Nestin免疫荧光染色鉴定细胞自我增殖能力;myosinⅦa和phalloidin免疫荧光染色鉴定其是否具有分化为毛细胞的潜能。分别利用miR-182 mimics和siRNA在新生大鼠耳蜗前体细胞中过表达和低表达miR-182,然后在细胞诱导分化7天后,用流式细胞仪检测分化细胞中myosinⅦa阳性细胞比例,用Western-blot检测支持细胞标志分子中Sox2的变化。结果使用miR-182 mimics进行过表达后,耳蜗前体细胞分化为myosinⅦa阳性表达的细胞比例显著高于对照组,使用miR-182 siRNA进行低表达后此比例显著低于对照组。Western-blot检测显示,Sox2在miR-182 mimics组较对照组降低,miR-182 siRNA组较对照组增加。结论过表达miRN182可以促进耳蜗前体细胞向毛细胞方向分化,ox2可能是此过程中的靶基因。
- 邢蔚闫辉米文娟陈俊邱建华
- 关键词：分化毛细胞
- 大鼠嗅上皮神经干细胞的分离及培养被引量：3
- 2006年
- 目的:从新生及成年大鼠嗅上皮分离培养嗅上皮神经干细胞(NSC),研究其增殖及分化特性。方法:采用含10%胎牛血清的DMEM/F12(1∶1)培养液,分离、培养生后第3天和硫酸锌原位创伤后6d的成年大鼠嗅上皮NSC,应用间接免疫荧光染色鉴定培养的NSC及分化的特异性神经细胞类型,四甲基偶氮唑盐法(MTT)测定嗅上皮NSC的生长曲线及生长因子的影响。结果:从生后第3天和成年大鼠嗅上皮分离、培养出巢蛋白免疫反应阳性而细胞角蛋白免疫反应阴性,并能分化为神经元和星形胶质细胞的NSC。生后第3天和成年大鼠嗅上皮NSC生存能力的差异无统计学意义(P>0.05),细胞克隆形成率为0.05%～0.10%。碱性成纤维细胞生长因子可以显著促进嗅上皮NSC的增殖。结论:从生后第3天和成年大鼠嗅上皮可培养出具有自我复制和多向分化潜能的NSC。
- 陈福权邱建华王锦玲刘顺利米文娟
- 关键词：嗅上皮神经干细胞细胞培养细胞分化
- 胱硫醚-γ-裂解酶在大鼠耳蜗的分布及其在噪声刺激后的表达变化被引量：1
- 2009年
- 目的探讨大鼠耳蜗胱硫醚-γ-裂解酶(cystathionine-γ-lyase,CSE)的分布情况及在噪声刺激后的表达变化。方法通过免疫组织化学及免疫荧光染色技术,观察CSE在正常成年SD大鼠耳蜗内的分布及定位。32只SD大鼠被分成4组:正常对照组、1天组、1周组、3周组,后3组分别暴露于110dBSPL宽带白噪声中。采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测大鼠接受强噪声刺激前后CSE在耳蜗内的表达变化。结果CSE主要表达在大鼠耳蜗的血管纹,螺旋突,以及耳蜗微小血管处;在耳蜗内外毛细胞、各类支持细胞、盖膜及蜗神经节处未见明显表达。随着噪声刺激时间的延长,CSE在mRNA水平的表达呈先增长后下降的趋势。结论CSE在耳蜗内的分布及其在噪声刺激后的表达变化,提示其在改善耳蜗血循环方面可能发挥重要作用。
- 毛小波乔莉邱建华何亚韩宇米文娟
- 关键词：胱硫醚-Γ-裂解酶耳蜗噪声暴露
- 新生大鼠耳蜗corti器体外培养及不同方法的对比研究
- 目的建立新生大鼠耳蜗corti器体外培养方法,并比较不同培养方法下大鼠鼠耳蜗corti器体外培养情况。方法采用新生1-3天大鼠,取出耳蜗corti器组织放入胶原凝胶表面,然后分别在有血清及无血
- 米文娟
- 锰诱导体外培养耳蜗毛细胞的损伤与凋亡研究被引量：3
- 2016年
- 目的探讨锰诱导体外培养耳蜗毛细胞损伤与凋亡的关系。方法将出生3天的新生Sprague Dawley大鼠的耳蜗器官体外培养,将贮存浓度为100m M氯化锰用SFM稀释到终浓度为1m M,3m M,5m M后进行体外染毒处理耳蜗基底膜。应用鬼笔环肽染色特异性显示耳蜗毛细胞的静纤毛,同时用β-Tubulin对神经纤维进行染色,用TUNEL试剂盒;Cleaved caspase-3抗体对耳蜗基底膜进行染色,在激光共聚焦显微镜下分别观察耳蜗基底膜的毛细胞,神经纤维。结果耳蜗基底膜培养24小时,1m M氯化锰对耳蜗毛细胞及神经纤维损伤甚微,差异无统计学意义(P>0.05),内,外毛细胞排列整齐规律,听神经纤维分布均匀,成束排列。最高浓度5m M氯化锰处理24小时后对神经纤维造成明显的损害,与对照组相比,差异有统计学意义(P<0.05)。当浓度逐渐增加,损伤愈加显著并呈浓度依赖性。2m M氯化锰处理,对耳蜗基底膜底转损伤较中转、顶转明显。不同浓度氯化锰处理24小时TUNEL染色阳性细胞随着氯化锰浓度的增加而增多;Cleaved caspase-3染色阳性细胞亦随着氯化锰浓度的增加而增多。结论通过大鼠耳蜗器官体外培养方法,发现氯化锰会造成毛细胞缺失,神经纤维变细变少,而这种损伤的机制与细胞凋亡密切相关。
- 李丹王卫龙卢连军张建彬米文娟邱阳陈俊宋勇莉田克勇唐晓旭
- 关键词：锰毛细胞神经纤维耳蜗凋亡
- 谷氨酸损伤体外培养大鼠螺旋神经元中凋亡诱导因子的表达与分布被引量：2
- 2014年
- 目的观察不同浓度谷氨酸（Glu）损伤螺旋神经元中凋亡诱导因子（apoptosis inducing factor,AIF）的表达与分布变化,探讨利用谷氨酸损伤体外培养螺旋神经元是否与AIF凋亡途径相关。方法取40只出生后0~3天SD仔鼠螺旋神经元行体外培养,所得培养细胞平均分为正常组和10mM、20mM、40mM Glu组,正常组仅给予正常SGNs培养液培养,其余三组分别加入相应浓度谷氨酸和SGNs培养液,培养48h后,应用光学显微镜、免疫荧光染色及实时荧光定量PCR方法观察四组中SGN细胞形态、SGN中AIF的分布及AIF、钙蛋白酶（calpain）、半胱氨酸天冬氨酸3（caspase 3）的表达变化;用TUNEL法观察细胞凋亡。结果 20mM和40mM Glu组SGNs细胞形态改变和细胞凋亡明显,并伴有AIF核转位;不同浓度Glu组AIF和calpain基因表达明显高于正常组（P〈0.05）,但caspase 3表达无明显升高（P〉0.05）。结论谷氨酸损伤体外培养的螺旋神经元过程中,AIF凋亡途径参与了细胞凋亡,calpain的高表达也促进了兴奋性神经递质对SGNs的损伤,但caspase3途径无明显作用。
- 丁忠家唐晓旭陈鑫宋勇莉米文娟王剑陈福权邱建华
- 关键词：螺旋神经元谷氨酸凋亡诱导因子钙蛋白酶
- TERT在耳蜗前体细胞中的表达及其促前体细胞增殖的研究
- 目的 TERT对于维持端粒酶活性具有关键作用,已被证实可以促进多种细胞的增殖,而其在内耳细胞中的作用并不清楚.本研究目的是检测TERT在大鼠耳蜗发育及前体细胞培养过程中的表达变化,并进一步观察过表达TERT后,耳蜗前体细...
- 宋勇莉米文娟高伟查定军邱建华
