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一株兔源耐药性肺炎克雷伯氏菌的分离与鉴定被引量：11: 2013年; 本试验旨在对从患呼吸道感染和腹泻的仔兔血液中分离的1株疑似病原菌进行鉴定。采用分离培养、镜检、生化检测、荚膜染色、16S rDNA序列测序、药敏试验和动物体内感染等方法,对该疑似菌进行了分析。结果显示,该疑似菌呈杆状、含有丰富的荚膜多糖,其16S rDNA序列与肺炎克雷伯氏菌标准菌株序列相似性达到99%,且对链霉素、庆大霉素、氨苄青霉素、硫酸庆大霉素、硫酸卡那霉素和氯霉素均表现出不同程度的显著抗性。腹腔注射该菌(109CFU/mL),仔兔全部死亡;而口腔灌喂,仔兔有较强的耐受性(无死亡)。结果表明,从患病仔兔血液中分离到1株肺炎克雷伯氏菌且具有致病性。; 张智李再新曾光菊李丙超胡卫东赵志平刘章琴陈欲云; 关键词：肺炎克雷伯氏菌耐药性

DNA疫苗及其在卵黄抗体制备中的应用: 2014年; DNA疫苗技术由于其独特的作用和优势,现已成为最有发展潜力的新兴免疫技术之一。将DNA疫苗技术和卵黄抗体技术联合起来,可获得效价更高、亲和性更好和成本更低的卵黄抗体。就DNA疫苗和卵黄抗体的各自特点以及DNA疫苗技术在卵黄抗体制备中的应用优势进行综述。; 李再新李丙超胡卫东唐文才文倩张智; 关键词：DNA疫苗卵黄抗体免疫

人A组轮状病毒结构蛋白VP7原核表达及其卵黄抗体效价的研究被引量：2: 2014年; 为获得人A组轮状病毒重组结构蛋白VP7及其高效价的卵黄抗体,使用PCR技术扩增VP7 DNA片段并将其克隆到原核表达载体pET28a上形成重组质粒pET28a-VP7。将重组质粒转化基因工程菌E.Coil BL21(DE3),用0.5 mM IPTG诱导VP7重组蛋白的表达。通过包涵体纯化和蛋白复性后,将VP7重组蛋白与弗氏佐剂混匀免疫产蛋鸡,收集鸡蛋。用水稀释-盐析法纯化卵黄抗体IgY。进一步应用SDS-PAGE、ELISA和点杂交技术,分析该卵黄抗体的纯度、效价和特异性。结果表明在基因工程菌E.coli BL21(DE3)中能够实现VP7重组抗原的表达,将重组抗原VP7免疫产蛋鸡,提取纯化得到滴度为1:100 000的抗VP7卵黄抗体,且特异性的识别野生型A组轮状病毒。; 李丙超李再新胡卫东黄永生唐文才张智; 关键词：VP7 原核表达

一种抗兔病毒性出血症病毒RHDV卵黄抗体的制备方法: 本发明公开了一种抗兔病毒性出血症病毒RHDV卵黄抗体的制备方法，通过基因工程菌在体外大量表达和纯化兔病毒性出血症病毒RHDV衣壳蛋白VP60抗原，将纯化的VP60抗原与适宜的佐剂制备成疫苗免疫产蛋鸡，并从鸡蛋中提取高效价...; 张智李再新谢万如胡卫东李天有邹晓阳李丙超陆仕海; 文献传递

传统发酵香肠中菌种的分子生物学鉴定被引量：4: 2015年; 为探究发酵香肠的微生物菌群的作用机理,利用传统的微生物学平板稀释分离法,分离出发酵香肠中酵母、大肠杆菌和乳酸菌等微生物,并提取其DNA,PCR扩增16S rDNA、ITS后测序,将测序结果与NCBI基因库中序列进行比对,MegAlign软件进行序列分析并构建系统发育树,结果表明,发酵香肠中富含德氏酵母、YSY1-6腐生葡萄球菌、德式乳酸乳杆菌亚种。; 李丙超胡卫东唐文才李兴玲钟强李再新张智; 关键词：发酵香肠 ITS 同源性比较

一种抗兔病毒性出血症病毒RHDV卵黄抗体的制备方法: 本发明公开了一种抗兔病毒性出血症病毒RHDV卵黄抗体的制备方法，通过基因工程菌在体外大量表达和纯化兔病毒性出血症病毒RHDV衣壳蛋白VP60抗原，将纯化的VP60抗原与适宜的佐剂制备成疫苗免疫产蛋鸡，并从鸡蛋中提取高效价...; 张智李再新谢万如胡卫东李天有邹晓阳李丙超陆仕海; 文献传递

人A组轮状病毒结构蛋白VP8的卵黄抗体制备与活性检测被引量：4: 2014年; 目的：制备人A组轮状病毒VP4结构蛋白N端的刺突蛋白VP8卵黄抗体IgY，并检测其生物学特征。方法以轮状病毒VP4基因的DNA为模板，采用PCR方法扩增VP8 DNA序列。将VP8片段克隆到原核表达载体 pET28a 上，形成重组质粒pET28a-VP8，转化基因工程菌E．coli BL21，完成VP8重组蛋白的诱导表达。 VP8包涵体蛋白经纯化和蛋白复性后，与弗氏佐剂混匀免疫产蛋鸡，收集鸡蛋，用水稀释-超滤法纯化卵黄抗体IgY。通过SDS-PAGE、Western blot、ELISA和点杂交等技术方法，分析该抗体的生物学特性，包括抗体的纯度、滴度、特异性和稳定性。结果 VP8在基因工程菌E．coli BL21中主要以包涵体蛋白形式表达，相对分子质量约为35×10^3，在pH8．0的Tris-HCI缓冲体系其复性效率可达90％。将重组抗原VP8免疫产蛋鸡，获得VP8抗原特异性的卵黄抗体IgY，抗体滴度达到1∶100000，且特异性地识别野生型A组轮状病毒。结论本研究采用基因工程和免疫技术制备的VP8卵黄抗体IgY，具有较高的抗体滴度和特异性，为婴幼儿轮状病毒感染性腹泻的诊断和防治提供了新的思路。; 张智胡卫东邹晓阳李天有李丙超李再新; 关键词：卵黄抗体

一种抗人A组轮状病毒的鸡卵黄抗体及其制备方法和应用: 本发明公开一种抗人A组轮状病毒鸡卵黄抗体及其制备方法和应用，该方法包括：体外表达纯化人A组轮状病毒结构蛋白VP7或VP8，并免疫产蛋鸡，收集鸡蛋，分离纯化出VP7或VP8卵黄抗体。制备得到的鸡卵黄抗体可冻干制备成用作预防...; 李再新张智胡卫东李丙超李天有邹晓阳唐文才; 文献传递

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胡卫东