胡玲玲
- 作品数：26 被引量：56H指数：5
- 供职机构：南京医科大学第二附属医院更多>>
- 发文基金：江苏省自然科学基金江苏省高校高新技术产业发展项目国家科技重大专项更多>>
- 相关领域：医药卫生社会学经济管理更多>>
- 血液分析仪与手工法嗜酸性粒细胞分类结果的比较
- 2009年
- 国际血液学标准化委员会（ICSH）规定嗜酸性粒细胞计数以手工法为参比方法，但操作较费时费力，且易受主观因素影响。本研究同时用全自动血液分析仪及手工法对嗜酸性粒细胞进行检测，为临床实验室选用检测方法与仪器提供依据。
- 朱银霞张益红胡玲玲
- 关键词：嗜酸性粒细胞计数手工法全自动血细胞分析仪
- 抗人CD28鼠-人嵌合抗体的构建及瞬时表达被引量：2
- 2007年
- 目的构建及瞬时表达抗人CD28鼠-人嵌合抗体。方法采用基因工程技术,从分泌鼠抗人CD28单克隆抗体的杂交瘤细胞株(克隆号:2F5)中克隆出抗体重链和轻链可变区基因及相应信号肽编码序列。分别与人免疫球蛋白IgG1恒定区重、轻链基因拼接,构建含有重组基因的pIRES表达质粒pIRES/h2F5。转染293T细胞并用抗性药物G418选择培养。采用流式细胞术,检测瞬时转染细胞后嵌合抗体的表达情况。结果抗人CD28鼠人嵌合抗体得到表达并能与CD28分子特异性结合。结论抗人CD28鼠-人嵌合抗体的构建和瞬时表达是成功的,为后续构建稳定分泌抗人CD28鼠-人嵌合抗体的CHO基因转染细胞株奠定了基础。
- 程钢陈永井马震宇费敏孙中文徐耀瑜胡玲玲邱玉华
- 关键词：CD28单克隆抗体嵌合抗体
- CD80鼠-人嵌合抗体的CHO细胞表达及体外生物学功能的初步研究被引量：12
- 2009年
- 目的:CHO细胞表达抗人CD80鼠-人嵌合抗体ch4E5,并研究其在体外阻断CD80介导的共刺激信号转导的生物学功能。方法:构建含有嵌合重、轻链基因的表达载体pIRES/ch4E5;表达载体先转染293T细胞,FCM检测到ch4E5抗体的瞬时表达后,表达载体再转染CHO细胞,构建稳定表达细胞株CHO-ch4E5;ProteinG亲和层析法从CHO-ch4E5细胞无血清培养上清中纯化ch4E5抗体,FCM检测ch4E5抗体对膜型CD80的识别;以丝裂霉素处理的正常人外周血单核细胞PBMCs为刺激细胞,以异体正常人外周血淋巴细胞PBLs为反应细胞,用MTT法分析ch4E5抗体的阻断作用。结果:ch4E5抗体在293T细胞的瞬时表达于48小时达到高峰,上清与L929-B7-1细胞结合率为96.0%;CHO-ch4E5细胞持续表达ch4E5抗体,其培养上清与L929-B7-1细胞结合率为95.7%;3天培养上清中,ch4E5抗体的产率约为5.56mg/L;ch4E5抗体和L929-B7-1、Daudi、Sub-T细胞结合率分别为94.1%、25.7%、23.5%;ch4E5抗体可以阻断CD80介导的共刺激信号转导,抑制异体PBLs的体外增殖。结论:在CHO细胞中成功表达了抗人CD80鼠-人嵌合抗体ch4E5,在体外该嵌合抗体具有亲本抗体阻断CD80介导的共刺激信号的生物学活性。
- 徐耀瑜胡玲玲陈永井程钢罗先富孙杰刘玉华王艳茹陈明心邱玉华
- 关键词：CD80嵌合抗体阻断作用
- 抗人CD28激发型单抗2F5对T细胞淋巴瘤的抑制作用研究
- 目的研究鼠抗人CD28单克隆抗体(克隆号:2F5)对T淋巴细胞瘤的抗肿瘤效应。方法流式细胞术检测鼠抗人CD28克隆抗体2F5对人T淋巴瘤细胞株Jurkat细胞表面膜型CD28分子的识别;Jurkat细胞株与2F5共培养,...
- 胡玲玲陈昌友张益红
- 文献传递
- 人CTLA-4基因转染细胞的构建及功能性单克隆抗体的研制
- 目的:构建含有人CTLA-4的重组逆转录病毒载体,获得稳定表达CTLA-4基因的L929细胞,并研制鼠抗人CTLA-4功能性单克隆抗体。方法:从活化T细胞中用trizol法抽提总RNA,进一步用RT-PCR的方法扩增出C...
- 孙玮丽孙中文陈永井程钢徐耀瑜胡玲玲张学光邱玉华
- 关键词：CTLA-4基因转染细胞单克隆抗体
- 文献传递
- B7-2基因工程抗体的制备及体内外抗B淋巴瘤作用研究被引量：5
- 2010年
- 构建B7-2人-鼠嵌合抗体基因表达质粒pIRES/ch3C8,经脂质体法转染真核表达细胞株CHO制备B7-2人-鼠嵌合抗体(命名为ch3C8)。该抗体能够识别人恶性B淋巴瘤细胞株Raji表面的B7-2分子并诱导其凋亡。ch3C8结构中来源于人Ig的Fc段可介导高效的ADCC及CDC效应。经ch3C8结合的Raji细胞接种于BALB/c裸鼠后的致瘤性消失。该抗体在B7-2相关肿瘤的生物治疗中具有潜在的应用价值。
- 刘玉华孙杰陈明心郭静雅胡玲玲王艳茹陈昌友高增燕朱晓燕邱玉华
- 关键词：B7-2嵌合抗体淋巴瘤ADCC效应
- 抗人CD28激发性单抗对T细胞淋巴瘤的抑制作用研究被引量：2
- 2011年
- 目的:研究鼠抗人CD28单克隆抗体(克隆号:2F5)对T淋巴细胞瘤的抗肿瘤效应,为抗体介导肿瘤靶向治疗提供新的方法和思路。方法:流式细胞术检测鼠抗人CD28单克隆抗体2F5对人T淋巴瘤细胞株Jurkat细胞表面膜型CD28分子的识别;MTT法检测2F5对Jurkat细胞体外增殖的影响;将Jurkat细胞株接种于裸鼠腋下,建立Jurkat细胞荷瘤裸鼠模型;经瘤内多点注射2F5(注射剂量1μg/mm3),逐日观察肿瘤的大小和裸鼠的生存状态。结果:2F5能够识别Jurkat细胞表面CD28分子,阳性结合率可达93.37%;2F5与Jurkat细胞共培养后,显微镜下观察可见胞质中出现黑色颗粒,胞膜破裂,细胞的折光性和立体感减弱;MTT法分析结果显示,抗CD28单抗对Jurkat细胞的体外增殖具有明显的抑制作用;将Jurkat细胞接种35只裸鼠(成瘤率达70%);经瘤内多点注射2F5,35天后荷瘤小鼠体内肿瘤的生长速率明显降低;而生理盐水对照组肿瘤生长无明显改变。结论:鼠抗人CD28单克隆抗体2F5通过与Jurkat细胞表面膜型CD28分子结合对其增殖具有明显的抑制作用,提示CD28分子可作为治疗T淋巴瘤的一个潜在靶点,抗体对治疗CD28分子阳性的肿瘤具有潜在临床应用价值。
- 胡玲玲陈昌友张益红郭静雅陆海波旬神美邱玉华
- 关键词：CD28
- 贝克曼液体质控品用于载脂类等质控项目可行性的分析
- 目的 对三种不同水平的贝克曼液体质控品用于载脂类等室内质控品可行性的分析.方法 重复测定备选液的载脂蛋白A1、载脂蛋白B、脂蛋白a、前白蛋白、腺苷脱氨酶、直接胆红素和胱抑素C的含量、稳定性、均一性，判断是否达到质控品的标...
- 王建平张益红胡玲玲王京雯雷忠英张梅香李海伦
- 小鼠CXCR3基因转染细胞株的构建、鉴定及生物学功能研究被引量：3
- 2010年
- 目的：构建含有小鼠CXCR3基因的重组逆转录病毒载体，获得稳定表达小鼠CXCR3分子的基因转染细胞株L929-mCXCR3，研究CXCR3与其配IP-10相互作用引起的L929-mCXCR3的迁移效应。方法：取1只雌性BALB／c小鼠（7周龄），尾静脉注射0．5mgConA／只，12h后取其脾脏，研磨成细胞悬液后，分离获得脾脏细胞；用含5万U／L人IL-2的RPMll640培养基培养3d；收集细胞，TRIzol一步法抽提总RNA，RT—PCR扩增小鼠CXCR3全长基因，装入逆转录病毒载体pEGZ—term，与两辅助病毒载体脂质体法共转染包装细胞293T，收集含完整逆转录病毒颗粒的293T培养上清感染L929细胞，重复感染3次，筛选获得含Zeocin抗性的稳定表达小鼠CXCR3分子的基因转染细胞株。采用流式细胞术（FCM）和RT—PCR对CXCR3分子的表达进行鉴定。Transwell分析基因转染细胞株L929-mCXCR3在IP．10作用下的迁移能力。结果：构建了含小鼠CXCR3基因的重组逆转录病毒载体，建立了稳定表达小鼠CXCR3分子的基因转染细胞株L929-mCXCR3，其膜表面CXCR3分子阳性表达率为97．0％；该基因转染细胞株在IP-10的介导下可定向迁移，迁移率为4．356％。结论：L929-mCXCR3细胞株为研究CXCR3信号通路的生物学特性、肿瘤转移模型的建立和抗小鼠CXCR3单克隆抗体的研制奠定了基础。
- 孙杰刘玉华陈永井郭静雅陈昌友胡玲玲陈明心邱玉华
- 关键词：CXCR3趋化因子基因转染逆转录病毒
- 血清补体C3、C4与糖尿病肾病的相关性研究被引量：5
- 2020年
- 目的探讨血清补体C3、C4对糖尿病肾病的早期诊断和进展监测的价值。方法选取2017年1月至2018年12月南京医科大学第二附属医院收治的101例糖尿病患者,进行血清补体C3、C4、胱抑素C(CysC)和尿微量清蛋白肌酐比值(ACR)检测,对检测数据进行相关性和回归分析。以ACR≥30 mg/g分为糖尿病清蛋白尿组,其余为糖尿病无清蛋白尿组。以ACR<30 mg/g、30 mg/g≤ACR<300 mg/g和ACR≥300 mg/g分为无肾功能损伤组、中度肾功能损伤组和重度肾功能损伤组。结果糖尿病清蛋白尿组平均年龄、ACR水平、补体C4和CysC水平均高于糖尿病无清蛋白尿组,差异有统计学意义(P<0.05);两组间性别比例和补体C3水平比较差异无统计学意义(P>0.05)。不同程度肾损伤的患者3组间C4和CysC水平比较差异有统计学意义(分别为P=0.018和P<0.001)。在与肾功能损伤相关指标的关联上,C3与CysC呈负相关关系(r=-0.274,P=0.006),C4与ACR呈正相关关系(r=0.448,P<0.001)。另外,C3与性别和年龄有显著的相关关系,女性的C3水平更高(r=0.221,P=0.026),随着年龄的增加,C3水平出现下降(r=-0.364,P<0.001)。结论糖尿病患者中,补体C3与糖尿病肾病肾功能损伤成负相关关系,补体C4则呈正相关关系。持续监测血清补体C3、C4水平有助于及时发现早期糖尿病肾病,并和ACR、CysC联合检测可判断糖尿病肾病肾功能受损情况。
- 胡玲玲张益红荀神美
- 关键词：糖尿病肾病补体C3补体C4胱抑素C
