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葛晓松: 作品数：14 被引量：35H指数：4; 供职机构：蚌埠医学院更多>>; 发文基金：安徽省自然科学基金安徽省高校省级自然科学研究项目国家自然科学基金更多>>; 相关领域：医药卫生生物学更多>>

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4-1BB配体在肿瘤细胞株上的表达及其与肿瘤细胞增殖的关系被引量：3: 2007年; 目的检测4-1BBL在肿瘤细胞株上的表达及其功能。方法半定量RT-PCR检测几种肿瘤细胞株内4-1BBL mRNA表达;流式细胞术检测肿瘤细胞表面4-1BBL蛋白的表达;MTT法检测4-1BBLmAb对肿瘤细胞增殖的影响。结果4- 1BBL在Raji和THP-1细胞株表面表达率分别为26.8%和15.3%,而在T1301和Jurkat细胞株中,4-1BBL mRNA水平虽有一定表达,但蛋白水平却几乎不表达;4-1BBLmAb可以促进肿瘤细胞的增殖。结论4-1BBL在不同肿瘤细胞株上的表达有差异;4-1BBL在肿瘤细胞的增殖和长期存活中发挥重要作用。; 刘琦吕坤葛晓松吴俊英; 关键词：肿瘤细胞 4-1BB配体增殖

转录因子T-bet对结合杆菌抗原活化人γδT细胞产生IFN-γ的调控作用初探: 近年来其他研究者的报导以及本实验室最近的实验结果均证实γδT与CD4+γβT在Th1／Th2分化的机制上的确有着不同的调控机制。特别是转录因子T-bet在调控γδT细胞产生IFN-γ过程中的作用需要阐明。本实验运用RNA...; 葛晓松李柏青; 文献传递

结核杆菌抗原对中性粒细胞自发性凋亡的抑制作用: 2007年; 目的:探讨结核杆菌抗原(Mtb-Ag)对体外培养中性粒细胞自发性凋亡的影响。方法:取健康成人外周血分离中性粒细胞,加Mtb-Ag培养24 h,或用Mek抑制剂PD98059预处理30 min后,Wright-Giemsa染色形态学方法和Annexin-V染色流式细胞术观察细胞凋亡。结果:与中性粒细胞体外培养24 h后自发凋亡(55±10)%相比,加入Mtb-Ag(1.125 mg/ml)后,中性粒细胞自发凋亡率(31±3)%明显降低(P<0.01);Mek抑制剂PD98059(50μmol/L)可阻断Mtb-Ag的抑制凋亡作用(P<0.01)。结论:Mtb-Ag对中性粒细胞自发性凋亡有抑制作用,这一作用可能涉及Mek-Erk途径。; 宋传旺葛晓松李柏青; 关键词：结核中性粒细胞结核杆菌抗原

siRNA沉默t-bet基因对CD4、CD8T淋巴细胞亚群IFN-γ产生的影响: 2009年; 利用化学合成针对人t-bet基因的小干扰RNA(siRNA),转染体外培养的人外周血单个核细胞,利用流式细胞仪分选纯化CD4+、CD8+T淋巴细胞,半定量RT-PCR检测CD4+、CD8+T淋巴细胞中t-betmRNA的表达变化,流式细胞术检测转染前后IFN-γ产生的变化情况。探讨转录因子t-bet对人CD4+、CD8+T淋巴细胞亚群IFN-γ产生的调控作用。与对照组相比,转染后的人CD4+、CD8+T淋巴细胞t-betmRNA表达水平明显下降;转染siRNA后,CD4+T淋巴细胞中IFN-γ+细胞比例为(18.46±6.86)%,与对照组(50.20±5.91)%比较有显著性差异(P<0.01);CD8+T淋巴细胞IFN-γ+细胞比例为(74.18±9.33)%,和对照组(76.51±6.49)%比较差异不明显(P>0.05)。体外转录合成的siRNA可有效降低人CD4+、CD8+T淋巴细胞t-bet的基因表达;转录因子t-bet对人不同淋巴细胞亚群IFN-γ的产生所起作用不同。; 汪洪涛葛晓松李柏青; 关键词：SIRNA T-BET IFN-Γ

结核杆菌抗原对中性粒细胞自发性凋亡的抑制作用: 通常认为巨噬细胞和淋巴细胞在抗结核感染的免疫和发病中起重要作用,而中性粒细胞(PMN)在结核病中的作用少有研究。近年Seiler等(EJI,2003,33:2676)发现,感染结核杆菌后,PMN首先到达感染局部, 并在急...; 宋传旺葛晓松李柏青; 文献传递

橙皮苷对UVB照射后的B16和HaCaT细胞的作用被引量：6: 2008年; 目的:研究橙皮苷对紫外线照射后的鼠黑素瘤B16和永生化人角质形成细胞HaCaT株细胞功能的影响。方法:采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法测定细胞的增殖,NaOH法测定黑素含量,Takahashi法测定酪氨酸酶活性;流式细胞仪分析HaCaT细胞的CXC型趋化因子受体(CXCR)2表达;ELISA法测定细胞培养液中转化生长因子(TGF)-β1含量的变化。结果:50～600mg/L橙皮苷对B16和HaCaT细胞的增殖活性无明显影响,200mg/L浓度以上时轻度抑制酪氨酸酶活性和黑素合成。不同浓度的橙皮苷作用后,角质形成细胞培养上清中TGF-β1水平呈无规律性变化。正常角质形成细胞的CXCR2表达不受橙皮苷的影响,紫外线照射后,CXCR2表达增加,200～600mg/L橙皮苷以浓度依赖方式抑制其表达,浓度在600mg/L时作用更显著。结论:橙皮苷无细胞毒性,其作用温和,具多效性,是有前途的褪色和光防护制剂。; 张汝芝朱文元谢芳葛晓松赵浩金慧玲; 关键词：橙皮苷窄谱中波紫外线转化生长因子-Β1

结核杆菌抗原激活MEK-ERK信号通路延迟中性粒细胞自发性凋亡的作用: 2006年; 探讨结核杆菌抗原(Mtb-Ag)对中性粒细胞自发性凋亡的影响。取健康成人外周血分离中性粒细胞,加Mtb-Ag培养24 h,或用Mek抑制剂PD98059预处理30 min,Annexin V染色流式细胞术观察细胞凋亡;并用Western blot印迹法检测Mek活化情况。与中性粒细胞体外培养24 h后自发凋亡(55%±6%)相比,加入Mtb-Ag(1.125 mg/ml)后,中性粒细胞凋亡率(31%±3%)明显降低;并且Mtb-Ag可诱导Mek的激活;而PD98059(50μmol/L)预处理可阻断Mtb-Ag的抑制凋亡作用。Mtb-Ag对中性粒细胞自发凋亡有抑制作用,这一作用涉及Mek-Erk途径。; 宋传旺刘琦唐洁葛晓松吕合作; 关键词：中性粒细胞凋亡结核杆菌抗原

结核分枝杆菌抗原激活核因子κB延迟中性粒细胞自发凋亡的作用被引量：3: 2007年; 目的探讨结核分枝杆菌抗原(Mtb-Ag)对中性粒细胞自发凋亡的影响。方法取健康成人外周血分离中性粒细胞,加 Mtb-Ag 培养24 h,或用核因子κB(NF-κB)抑制剂 N-甲苯磺基-L-苯乙胺酰氯甲基酮(TPCK)预处理30 min 后,膜联蛋白 V(AnnexinV/PI)染色,流式细胞术观察细胞凋亡情况;并用凝胶电泳迁移率变动分析(EMSA)化学发光法检测 Mtb-Ag 刺激0、1、2、4、6、24 h 后,中性粒细胞 NF-κB的 DNA 结合活性。结果加 Mtb-Ag(1.125 mg/ml)培养的中性粒细胞凋亡率(32%±3%)与中性粒细胞体外培养24 h 后自发凋亡率(55%±6%)相比,明显降低(P<0.05)。Mtb-Ag(1.125 mg/ml)作用中性粒细胞1 h 后明显可见 NF-κB活化,2 h NF-κB的 DNA 结合活性达高峰,24 h 回到静息水平;经 TPCK(30μmol/L)预处理后可阻断 Mtb-Ag 的抑制凋亡作用。结论经激活 NF-κB介导后,Mtb-Ag 对中性粒细胞自发凋亡有抑制作用。; 宋传旺唐洁刘琦葛晓松; 关键词：细胞凋亡核因子ΚB 中性粒细胞

丝裂原蛋白激酶两种抑制剂对弓形虫侵入宿主细胞影响的差异被引量：4: 2009年; 目的观察两种丝裂原蛋白激酶(mitogen activated protein kinases,MAPK)抑制剂PD98059及U0126对刚地弓形虫侵入宿主细胞的影响,探讨其对弓形虫速殖子侵入宿主细胞信号转导途径的不同阻断效应。方法丝裂原蛋白激酶抑制剂PD98059或U0126分别在不同时间及不同剂量作用于速殖子-宿主细胞培养系统,用流式细胞仪(FCM)检测宿主细胞感染速殖子的差异。结果流式细胞仪检测加入U01261μmol/L、10μmol/L和100μmol/L的细胞培养孔的细胞感染弓形虫速殖子的量分别比对照组平均降低了26.10%(P<0.01),66.42%(P<0.01)和70.39%(P<0.01)。而加入PD980591μmol/L、10μmol/L和100μmol/L的分别比对照组平均降低了25.45%(P<0.01),53.01%(P<0.01)和64.70%(P<0.01)。实验中发现100μmol/L U0126作用培养细胞9h的时候,可导致HL-60细胞出现部分聚集成团、漂浮的中毒现象。结论U0126和PD98059均可明显抑制弓形虫速殖子侵入宿主细胞,但其差异无显著性,其机制有待进一步探索。; 杨小迪陈兴智徐军孙新常雪莲王媛媛胡守锋葛晓松李柏青; 关键词：弓形虫速殖子 MAP激酶 U0126 PD98059

流式细胞术检测CFSE标记人T细胞亚群增殖反应被引量：11: 2005年; 目的探讨应用流式细胞术和活细胞荧光染料CFSE检测T淋巴细胞各亚群增殖反应的方法学。方法人外周血单个核细胞(PBMC)经CFSE染色后,分别用植物凝血素(PHA)、CD3mAb和结核杆菌抗原(Mtb-Ag)刺激,加IL-2扩增后,用流式细胞术检测活化增殖后T细胞各亚群的比例,并用ModFit软件分析各亚群的增殖动力模型。结果PHA和CD3mAb主要活化总T细胞,CD8+T细胞的增殖优于CD4+T细胞,但CD4+T细胞前4代细胞明显多于CD8+T细胞。Mtb-Ag主要刺激γδT细胞增殖。结论以CFSE标记淋巴细胞,结合流式细胞术可有效检测出不同T细胞亚群对不同刺激剂的增殖反应以及增殖动力学变化。; 王敏张林杰何金生葛晓松陈勇李柏青; 关键词：增殖 T细胞亚群流式细胞术

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