董富兴
- 作品数：19 被引量：29H指数：3
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- 新生幼鼠缺血缺氧性脑损伤后少突胶质细胞及髓鞘超微结构的变化
- 2010年
- 目的:探索3日龄幼鼠单侧颈总动脉结扎联合缺氧造成脑白质损伤后少突胶质细胞及髓鞘超微结构的变化。方法:将3日龄未成熟SD新生大鼠随机分为对照组和实验组。实验组大鼠结扎右侧颈总动脉,置8%O2和92%N2混合气体的缺氧装置2h后,取出返笼饲养。对照组仅游离右侧颈总动脉,并未结扎及缺氧实验。术后28d透射电镜观察胼胝体少突胶质细胞及髓鞘超微结构。结果:对照组大鼠少突胶质细胞染色质分布均匀,细胞器结构完整;髓鞘厚度及数目均正常;实验组大鼠部分少突胶质细胞核固缩、核破碎,细胞器广泛缺失;与对照组相比髓鞘厚度变薄,数目明显减少。结论:3日龄幼鼠脑缺血缺氧28d后,脑白质少突胶质细胞的超微结构发生了坏死性病理改变,髓鞘形成能力减弱,髓鞘化轴突的数目减少。
- 姚瑞芹曾田于红丽刘静袁红花董富兴高殿帅
- 关键词：脑缺血缺氧少突胶质细胞髓鞘新生鼠
- 大鼠脑室管膜下区包埋前免疫电镜双标技术的探索被引量：1
- 2013年
- 目的观察脑室管膜下区(SVZ)神经干细胞上N-甲基-D-天冬氨酸受体亚单位1(NR1)的超微分布。方法成年大鼠灌注固定,冠状面振动切片,片厚150μm。取含SVZ区域的脑片,行巢蛋白(nestin)和NR1双标免疫组织化学染色。其中,巢蛋白为辣根过氧化物酶标记,NR1为免疫金-银法标记。取1.5mm×1.0mm大小的SVZ双标阳性组织,常规电镜制样、观察、拍照。结果电镜下观察到标记NR1的纳米金-银标颗粒电子密度高,呈颗粒状,分布于细胞膜上,偶见于胞质中;巢蛋白免疫阳性产物呈絮状,分布于胞质中。结论包埋前免疫电镜双重标记技术对组织的抗原性保存较好,免疫金颗粒对抗原定位较精确,有利于研究两种递质在同一个细胞或终末内的共存或分析递质与其相应受体之间的联系,特别是对于中枢神经系统的研究有独到之处。
- 于红丽李志宁董富兴张伟董红燕
- 关键词：免疫电镜神经干细胞N-甲基-D-天冬氨酸受体
- 医学研究生电镜取材实验课教学探讨
- 2016年
- 在进行电镜科研样品及医院电镜外检标本观察时，常发现最终得不到理想的电镜超微结构图片，究其原因大都是电镜样品取材时出了问题，送检者没有经过规范的电镜取材培训，操作不当，最终导致电镜观察结果不理想甚至失败。
- 董富兴于红丽刘亚萍董红燕姚瑞芹
- 关键词：实验课教学医学研究生取材电镜样品电镜观察
- 中和IL-10促进Th17的体外诱导分化
- 2014年
- 辅助性T细胞17（ Th17）是一类特异分泌IL-17、表达Rorγt的Th亚群，由于其参与了诸多免疫性疾病的发生发展而备受研究学者的关注。 Th17在体内比率非常低，难以分离纯化，而体外的诱导率仅为10％左右，如何提高体外Th17诱导分化与增殖的效率成为了研究Th17亟待解决的问题之一。
- 曲学彬韩晶晶姚瑞芹董富兴王贝
- 关键词：体外诱导分化IL-10辅助性T细胞RORΓTTH亚群
- 透射电镜样品制备中常见污染问题的探讨被引量：4
- 2012年
- 透射电镜生物样品制备最常用的是超薄切片法,超薄切片技术的制片过程很复杂,要求很细致,稍有不慎便会造成污染,影响图片质量.本文就如何减少样品制备污染问题,总结了本实验室长期以来的制样经验,供广大电镜工作者,特别是初学者借鉴.
- 于红丽董富兴戚大石熊晔董红燕
- 关键词：透射电镜制样污染
- 缺氧对少突胶质前体细胞内NLRP3炎症小体表达的影响
- 2016年
- 目的:观察缺氧对少突胶质前体细胞(preOL)内Nod样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NLRP3)及细胞凋亡相关斑点样蛋白(ASC)表达的影响。方法:将体外分离纯化的preOL分为正常组和缺氧组,1%O25%CO2、37℃缺氧培养箱培养9 h建立preOL缺氧损伤模型。TUNEL法检测细胞凋亡,免疫荧光染色、qRT-PCR及Western Blot检测NLRP3表达,Western Blot检测ASC表达。结果:preOL缺氧损伤后胞质内出现空泡,胞膜破裂,突起出现肿胀、断裂;凋亡率较正常组增加(P<0.05);缺氧组NLRP3阳性细胞数和平均荧光强度均较正常组增加(P<0.05),NLRP3的mRNA及蛋白水平也均较正常组增加(P<0.05);ASC蛋白的表达在缺氧后上调(P<0.05)。结论:preOL的缺氧损伤可能与激活NLRP3炎症小体有关。
- 马丽吴明凤江红艳武秀香董富兴曲学彬姚瑞芹
- 关键词：少突胶质前体细胞缺氧
- 两种横纹肌染色方法的比较被引量：1
- 2015年
- 横纹肌包括骨骼肌和心肌,常规的H-E染色方法对正常横纹肌中横纹显示不清楚,所以为了显示与观察横纹,常常需要用到特殊的横纹肌染色方法.传统的横纹肌染色包括Mallory磷钨酸苏木精染色法(PTAH)和Heidenhain氏铁苏木素染色法等.作为医学检验方法,以简单快速为首选,而要制作教学切片,则对染色的效果,切片存放时间等要求高.为了寻求一种稳定的,效果好的,适合制作大量教学切片的染色方法,我们将上述2种横纹肌的染色方法做了比较.
- 刘亚萍王蕾张大红董富兴
- 关键词：染色法横纹肌染色方法
- Ro25-6981对脑缺血-再灌注后神经发生的影响被引量：1
- 2012年
- 目的探讨NR2B特异性拮抗剂Ro25-6981对大鼠脑缺血-再灌注(I-R)后海马齿状回颗粒下层(SGZ)神经发生的作用。方法 64只SD大鼠随机均分为对照组(A组)、假手术组(B组)、脑I-R组(C组)和Ro25-6981 0.6、1.2、2.4、4.8和9.6μg/kg组(分别为D1、D2、D3、D4和D5组)。术后7d取脑,各组大鼠处死前2h侧脑室注射5-溴脱氧尿嘧啶核苷(BrdU),免疫组织化学染色观察SGZ中BrdU阳性细胞变化。结果与A、B组相比,C组SGZ的BrdU阳性细胞数明显增加(P<0.01);而D1、D2、D3、D4和D5组BrdU阳性细胞数均较C组减少(P<0.05或P<0.01)。结论Ro25-6981能抑制大鼠脑I-R后海马齿状回SGZ神经发生。
- 董富兴刘亚萍徐铁军
- 关键词：脑缺血-再灌注神经发生
- 离体培养海马神经干细胞中自噬现象的观察被引量：3
- 2016年
- 目的:观察离体培养海马神经干细胞中自噬现象。方法:分离新生1 d大鼠海马组织,培养、扩增和传代,鉴定后取培养7 d的细胞,用RT-PCR法检测自噬特异性蛋白LC3和Bclin1的mRNA表达,Western Blot检测LC3和Bclin1的蛋白表达,透射电子显微镜观察神经干细胞中的自噬体的超微结构。结果:分离培养的神经干细胞呈Nestin免疫荧光阳性,且能分化为β-Ⅲtubulin^+的神经细胞和GFAP^+的胶质细胞;RT-PCR和Western Blot分别检测出神经干细胞有LC3、Bclin1的mRNA和蛋白表达;电镜下观察到神经干细胞胞质内有自噬体和自噬溶酶体。结论:正常离体培养的大鼠海马神经干细胞存在自噬现象,提示自噬可能对神经干细胞正常生理功能的维持有重要作用。
- 董富兴张振中刘亚萍胡莹莹曲学彬于红丽姚瑞芹
- 关键词：神经干细胞自噬LC3BECLIN1
- Bcl-2和Bad参与GDNF协同雌二醇对多巴胺能神经细胞的保护作用被引量：2
- 2015年
- 目的：研究GDNF和雌二醇（E2）联合使用对6-羟基多巴胺（6-OHDA）所致的多巴胺能神经细胞损伤的影响并探讨其作用的机制.方法：新生2～3d的雄性SD大鼠行常规中脑脑片培养,6-OHDA诱导损伤,脑片分为8组：正常对照组、溶剂对照组、E2组、Wortmannin（PI3-K特异性阻断剂）＋E2组、GDNF组、Wortmannin＋GDNF组、GDNF＋E2组、Wortmannin＋GDNF＋E2组.免疫荧光染色观察黑质致密部（SNc）酪氨酸羟化酶（TH）的表达情况;Western Blot检测各组脑片中Bcl-2及Bad的表达.结果：免疫荧光染色结果显示,在GDNF＋E2组,TH的表达比单用GDNF或E2时显著升高,差异有统计学意义（P＜0.05）;阻断PD-K/Akt信号通路后,TH的表达与未阻断组相比降低,差异有统计学意义（P＜0.05）.Western Blot检测结果显示,在GDNF＋ E2组,Bcl-2的表达比单用GDNF或E2时升高,而Bad的表达比单用GDNF或E2时降低,差异均有统计学意义（P＜0.05）;阻断PI3-K/Akt信号通路后,Bcl-2的表达与未阻断组相比降低,而Bad的表达是升高的,差异有统计学意义（P＜0.05）.结论：GDNF和E2联合使用对6-OHDA所致的黑质多巴胺能神经细胞损伤有保护作用,其机制可能是通过调节凋亡相关蛋白Bcl-2和Bad的表达变化实现的.
- 刘亚萍董富兴王晓舟高殿帅
- 关键词：雌激素多巴胺GDNFBCL-2BAD
