袁凤刚
- 作品数：19 被引量：122H指数：6
- 供职机构：徐州医学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金江苏省自然科学基金徐州市科技局社会发展基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学农业科学更多>>
- 银杏内酯A对大鼠全脑缺血／再灌注损伤的影响及其机制研究
- 2016年
- 目的探讨银杏内酯A对全脑缺血／再灌注大鼠脑组织损伤的保护作用及其相关机制。方法采用四动脉结扎法构建大鼠全脑缺血／再灌注模型。将大鼠随机分为假手术组（sham组）、缺血／再灌注组（I／R组）和缺血／再灌注给药组（GA组）。观察银杏内酯A对各组大鼠神经功能缺损评分（NDS）、脑梗死面积、脑组织内超氧化物歧化酶（SOD）活力及丙二醛（MDA）含量的影响。结果全脑缺血／再灌注6h后，银杏内酯A能明显降低大鼠NDS分值，减少脑梗死面积，降低脑组织内MDA含量，同时提高SOD活性。结论银杏内酯A能显著改善大鼠全脑缺血／再灌注后的脑神经功能，减轻缺血／再灌注对大鼠脑组织的损害，具有一定的脑保护作用。
- 袁凤刚郝艳玲张春辛陈永刚
- 关键词：银杏内酯A超氧化物歧化酶丙二醛
- 冬眠合剂对小鼠缺氧耐受力的影响被引量：3
- 2011年
- 目的探索不同剂量的冬眠合剂对小鼠缺氧耐受力的影响。方法将小鼠分为先用药和后用药两批,又分别分为生理盐水对照组,肾上腺素组和冬眠合剂低、中、高剂量组5个组,先给药的和后给药的分别是给药5分钟后进行缺氧和缺氧5分钟后再给药,分别测定小鼠常压缺氧存活时间和亚硝酸盐中毒缺氧存活时间。结果与生理盐水对照组相比较,中剂量的冬眠合剂能够有效地延长常压缺氧和亚硝酸钠中毒后的存活时间,并能够延长已缺氧后继续缺氧的存活时间(P<0.05)。与中剂量组相比较,而高剂量的冬眠合剂却缩短了小鼠缺氧的存活时间。结论中剂量的冬眠合剂对小鼠具有提高缺氧耐受力的功效。
- 郝艳玲袁凤刚杨龙王秒朱蒙蒙马晓明
- 关键词：冬眠合剂缺氧耐受
- 脑缺血再灌注中nNOS介导的ASK1巯基亚硝基化促进其激活
- 2011年
- 目的本文主要研究在脑缺血再灌注早期,神经性一氧化氮合酶(nNOS)来源的NO是否能够引起凋亡信号调节激酶蛋白1(ASK1)巯基亚硝基化,以及ASK1的巯基亚硝基化与其激活的关系。方法 SD大鼠分为正常对照组,缺血复灌6 h组,7NI给药组,AMT给药组,生理盐水对照组。采用四动脉结扎去结扎法构建大鼠全脑缺血再灌注模型。运用SDS-PAGE、免疫印迹、免疫沉淀和免疫组织化学方法对蛋白质的磷酸化以及蛋白质之间的相互作用进行研究;蛋白质的S-亚硝基化的检测主要是通过"生物素转化法"(Biotin-Swich method)。结果 nNOS的抑制剂7NI能够降低ASK1的亚硝基化水平,进而降低了ASK1的磷酸化水平(P<0.05)即ASK1的活性。结论 7NI通过降低nNOS介导的ASK1巯基亚硝基化,对SD大鼠海马区脑缺血再灌注损伤的神经元起到保护作用。
- 袁凤刚朱孝荣郝艳玲张光毅
- 关键词：脑缺血
- 药用三角叶黄连遗传多样性的ISSR分析被引量：5
- 2009年
- 目的:对野生三角叶黄连进行遗传多样性研究。方法:通过ISSR技术对8个野生三角叶黄连居群共90个个体进行遗传多样性分析。结果:用12个随机引物共扩增出128条清晰条带,其中94条具多态性,平均多态性位点比率为73.44%,Ne i’s基因多样性指数H=0.192 5,Shannon’s多样性指数I=0.302 8,遗传分化指数Gst=0.721 2,遗传距离和遗传一致度分别为0.085 8~0.231 4,0.804 6~0.942 5。结论:三角叶黄连种水平上具有较高的遗传多样性,遗传变异主要存在于居群间,遗传多样性与地理关系表现出明显的相关性,ISSR可以作为研究遗传多样性及遗传分化的有效标记。
- 张春平何平胡世俊袁凤刚王瑞波高姗
- 关键词：ISSR聚类分析遗传分化
- HPLC同时测定双丹胶囊中7种主要成分被引量：4
- 2016年
- 目的:建立同时测定双丹胶囊中丹参素、原儿茶醛、芍药苷、迷迭香酸、紫草酸、丹酚酸B、丹皮酚7种有效成分的高效液相色谱分析方法。方法:采用Agilent Zorbax SB-C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相乙腈-0.1%甲酸溶液梯度洗脱,检测波长235 nm,流速1.0 m L·min^(-1),柱温30℃。结果:7种成分的线性范围分别为54.43~544.3,0.96~9.6,2.68~26.8,0.92~9.2,2.16~21.6,9.36~93.6,9.16~91.6 mg·L^(-1),r分别为0.999 7,0.999 6,0.999 5,0.999 3,0.999 2,0.999 7,0.9995。平均加样回收率分别为98.6%(RSD 1.8%),100.2%(RSD 1.9%),100.4%(RSD 2.0%),99.1%(RSD 2.5%),98.8%(RSD 2.3%),100.6%(RSD 1.9%),99.1%(RSD 1.8%)。结论:该分析方法准确可靠,重复性好,能更好地控制双丹胶囊的质量提供科学依据。
- 袁凤刚郝艳玲陈永刚孙远峰
- 关键词：双丹胶囊丹参素原儿茶醛
- MK801对大鼠全脑缺血／再灌注ASK1信号通路影响以及神经元的保护被引量：6
- 2014年
- 目的探讨MK801(dizocilpine,地佐环平)对全脑缺血/再灌注后神经型一氧化氮合成酶(nNOS)介导的凋亡信号调节激酶1(apoptosis signal-regulating kinase 1,ASK1)信号通路及海马CA1区细胞凋亡的影响。方法采用四动脉结扎法构建大鼠全脑缺血模型。SD大鼠腹腔注射MK801(30mg·kg-1)。通过"生物素转化法"(Biotin-Swich method)检测蛋白质的S-亚硝基化。然后运用免疫印迹、免疫共沉淀和免疫组织化学等方法对蛋白质的磷酸化以及蛋白质之间的相互作用进行研究;应用焦油紫染色的方法检测脑缺血/再灌注后海马CA1区的细胞凋亡情况。结果脑缺血/再灌注引起了ASK1的S-亚硝基化;MK801明显地抑制了脑缺血/再灌注诱导的ASK1的S-亚硝基化的增加;MK801明显降低了Thr845的磷酸化水平、增加了Ser83位的磷酸化水平,从而降低了ASK1的活性;MK801引起ASK1下游MKK4/7-JNK信号通路及下游凋亡的核通路也产生了相应的变化。结论 MK801能够抑制SD大鼠全脑缺血/再灌注引起ASK1的S-亚硝基化,进而影响ASK1凋亡信号通路,对神经元损伤起到保护作用。
- 袁凤刚郝艳玲张春平陈永刚朱孝荣
- 关键词：MK801全脑缺血再灌注ASK1亚硝基化NNOS
- 外源5-氨基乙酰丙酸对干旱胁迫下草珊瑚叶绿素荧光特性及能量分配的影响被引量：14
- 2012年
- 目的探讨干旱胁迫对草珊瑚叶绿素荧光特性及能量分配的影响,找到延缓干旱胁迫的方法,为抗旱栽培提供理论依据。方法考察15%PEG-6000模拟干旱胁迫条件下,经过不同浓度5-氨基乙酰丙酸(ALA)和不同时间处理后草珊瑚植株光合色素量、叶绿素荧光参数及能量参数等生理指标的变化。结果外源ALA显著提高了叶绿素a、叶绿素b、总叶绿素和类胡萝卜素的量,提高了最大荧光(Fm)、最大光化学效率(Fv/Fm)、光系统PSII潜在活性(Fv/Fo)、PSII有效光化学效率(Fv′/Fm′)、PSII实际光化学效率(ΦPSII)、光化学淬灭系数(qP)、电子传递率(ETR)和光化学速率(PCR)的水平,有效地降低了初始荧光(Fo),非光化学淬灭系数(NPQ)和热耗散速率(HDR),经过ALA处理后的光化学反应能量(P)所占比例显著升高,天线色素热耗散能量(D)和非光化学耗散能量(E)则表现出相反的趋势,并且P成为能量利用的主要途径,ALA促进了能量合理的再分配。结论 100 mg/L的外源ALA能够通过减少过剩激发能的耗散,提高光合电子传递效率,有效地缓解干旱胁迫对草珊瑚叶片PSII的伤害,提高植株的抗旱能力。
- 张春平何平袁凤刚喻泽莉杜丹丹韦品祥胡世俊
- 关键词：干旱胁迫叶绿素荧光草珊瑚
- 外源5-氨基乙酰丙酸对干旱胁迫下甘草种子萌发及幼苗生理特性的影响被引量：32
- 2011年
- 以药用植物甘草种子和幼苗为材料,在20%PEG-6000模拟干旱胁迫条件下,测定了不同浓度外源5-氨基乙酰丙酸(ALA)处理甘草种子的发芽势(Gv)、发芽率(Gr)、发芽指数(Gi)和活力指数(Vi)的变化,以及ALA处理幼苗叶片的质膜透性、丙二醛(MDA)含量、可溶性糖含量、游离脯氨酸含量和超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化物酶(POD)、过氧化氢酶(CAT)活性。结果显示:(1)在20%PEG-6000胁迫下,甘草种子萌发受到显著抑制,而各项萌发指标经过不同浓度的ALA进行恢复处理后均有明显提高,且均以10 mg.L-1ALA处理的各项指标值最大,其种子发芽势(75%)、发芽率(91%)比干旱胁迫对照显著提高了35%和30%,发芽指数(36.2)和活力指数(709.7)分别提高至干旱胁迫的2.6和3.5倍。(2)各ALA处理较对照均显著提高了干旱胁迫下甘草幼苗总生物量、可溶性糖的含量及脯氨酸含量,却显著降低了甘草叶片的MDA含量和质膜透性,同时显著提高了干旱胁迫下甘草叶片中的SOD、POD和CAT的活性,且以10 mg.L-1ALA处理后的酶活性最强。研究表明,适宜浓度(10 mg.L-1)的ALA能显著提高干旱胁迫下甘草种子的萌发能力,通过调节渗透调节物质含量和保护酶活性来有效减缓干旱胁迫对甘草幼苗的伤害,提高甘草种子及幼苗的抗旱能力。
- 张春平何平袁凤刚胡世俊韦品祥
- 关键词：甘草ALA干旱胁迫种子萌发生理特性
- 小鼠Nestin启动子的克隆及其表达载体的构建被引量：3
- 2012年
- 目的:克隆Nestin基因启动子序列,并研究其调控能力。方法:用高保真酶PCR扩增出小鼠Nestin启动子全序列、核心序列,pcDNA3.1质粒双酶切切掉CMV启动子序列,将Nestin基因启动子序列插入到原CMV启动子位置,pEGFP-N1质粒双酶切下EGFP序列,克隆入pcDNA3.1多克隆位点中,重组构建质粒,分别用Nestin启动子全序列和核心序列调控EGFP基因的表达。重组质粒分别转染Nestin+细胞和Nestin-细胞,观察EGFP基因在细胞内的表达情况。结果:成功克隆出Nestin基因启动子全序列和核心序列,经酶切鉴定及测序证实正确。二序列皆能调控EGFP在各种细胞内的表达。结论:Nestin基因启动子全序列和核心序列具有非特异性调控能力。
- 张丽袁红花袁凤刚朱孝荣
- 关键词：启动子NESTIN转染
- 外源性5-氨基乙酰丙酸对盐胁迫下决明子萌发及幼苗生理特性的影响被引量：13
- 2012年
- 目的通过对决明子萌发及幼苗生理特性的研究,寻找提高决明子及幼苗在盐胁迫条件下抗性能力的途径。方法测定盐胁迫下决明子在经过不同质量浓度的外源性5-氨基乙酰丙酸(ALA)处理后,种子的发芽势、发芽率、发芽指数和活力指数,并对决明幼苗叶片叶绿素量、叶绿素荧光参数、原生质膜透性、叶片丙二醛(MDA)量、可溶性糖量、可溶性蛋白量及脯氨酸量及超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化物酶(POD)和过氧化氢酶(CAT)活性进行测定。结果 100 mmol/L盐胁迫下的决明子萌发受到显著抑制,但是经过不同质量浓度的ALA处理后,萌发指标均有升高。结果表明,外源性ALA处理显著提高了决明子发芽势、发芽率、发芽指数和活力指数,提高了叶片叶绿素a、叶绿素b和总叶绿素量,显著提高了最大光化学效率(Fv/Fm),PSII有效光化学效率(Fv′/Fm′),PSII实际光化学效率(ΦPSII),光化学淬灭系数(qP),降低了原生质膜透性、叶片的MDA量及非光化学淬灭系数(NPQ),提高了盐胁迫下幼苗叶片可溶性糖、可溶性蛋白和脯氨酸量,显著提高了叶片SOD、POD、CAT活性。结论外源性ALA通过提高决明子的萌发指数,提高幼苗光合效率、渗透调节物质量及抗氧化酶活性,有效地减缓盐胁迫对决明子及幼苗产生的伤害,提高种子及幼苗的抗盐能力。
- 张春平何平刘海英谢英赞韦品祥袁凤刚胡世俊
- 关键词：决明子盐胁迫生理特性
