谢美娟
- 作品数：8 被引量：47H指数：4
- 供职机构：华中科技大学同济医学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金广东省科技计划工业攻关项目国家科技重大专项更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 基于高通量测序技术无创筛查双胎染色体非整倍体及胎儿游离DNA浓度分析被引量：8
- 2016年
- 目的评估无创高通量测序方法筛查双胎染色体非整倍体的可行性,并对胎儿游离DNA浓度进行分析。方法收集双胎妊娠样本120例,包括自然双胎67例,辅助生殖技术植入的双胎47例,双胎消失综合征样本6例,并收集68例单胎样本作为对照,采用无创高通量测序方法进行检测。通过Z值进行阴性和阳性判断,根据Y染色体唯一比对条数进行胎儿游离DNA浓度计算,并对三体阳性样本进行核型分析。结果本次实验筛查出2例双胎染色体三体阳性样本,分别为正常/21三体和13三体/18三体,均与核型结果一致。自然双胎妊娠组胎儿游离DNA浓度明显高于辅助生殖技术植入双胎组、双胎消失综合征组和自然妊娠单胎组,P值均小于0.05。其他3组间胎儿游离DNA浓度无显著性差异。结论采用无创高通量测序方法进行双胎妊娠染色体非整倍体筛查也是可行的,同时结果分析应该考虑胎儿游离DNA浓度的影响。
- 许旭平谢美娟甘海燕梁荣良韩尔康杨学习吴英松
- 关键词：双胎染色体非整倍体高通量测序
- 人酪氨酸激酶6原核表达载体的构建、表达、纯化与鉴定
- 2011年
- 目的构建人络氨酸激酶6(PTK6)与His融合蛋白重组表达载体,在大肠杆菌中诱导表达,并对重组蛋白进行纯化。方法通过PCR在编码PTK6的cDNA序列两端添加EcoR I和BamH I酶切位点,双酶切后将编码PTK6的cDNA序列亚克隆至原核表达载体PHUE构建重组蛋白表达载体PHUE/PTK。重组载体经鉴定后转化大肠杆菌表达菌株BL21(DE3)感受态细胞。IPTG诱导重组蛋白表达。收集菌体裂解后,用尿素洗涤和溶解包涵体。溶解上清经Ni-NTA亲和层析柱纯化,并用SDS-PAGE和Western blotting检测纯化产物。结果成功构建人PTK6重组蛋白原核表达载体,重组蛋白以包涵体形式表达,其相对分子质量为55 000,与预期一致。亲和层析纯化产物的SDS-PAGE和Western blotting鉴定表明获得纯度大于80%的目的重组蛋白。结论人PTK6 His融合蛋白的纯化为多克隆及单克隆抗体的制备以及结构和功能的研究奠定了基础。
- 杨学习谢美娟李欣李粉霞徐伟文李明
- 关键词：表达载体构建纯化
- 小檗碱对高果糖饲养诱导胰岛素抵抗大鼠肝组织HNF-4α表达的影响被引量：18
- 2008年
- 目的:探讨小檗碱对高果糖饲养诱导胰岛素抵抗大鼠肝细胞核因子(hepatocyte nuclearfactor-4α,HNF-4α)表达的影响以及其改善胰岛素抵抗的分子机制.方法:高果糖饲料喂养SD大鼠6wk,建立胰岛素抵抗模型;大鼠分为4组:正常对照组(普通饮食)、普通饮食+小檗碱处理组、高果糖饮食组及高果糖饮食+小檗碱组;小檗碱按187.5mg/(kg·d)灌服4wk;测定血糖、血清胰岛素、胰岛素抵抗指数及甘油三酯的变化;用RT-PCR法及免疫印迹法观察肝脏HNF-4α基因及蛋白的表达.结果:高果糖饮食组胰岛素、胰岛素抵抗指数HOMA及甘油三酯水平较正常对照组均明显升高(均P<0.01),而高果糖饮食+小檗碱组与高果糖饮食组比较上述指标明显下降(51.62±5.68vs64.91±7.87,P<0.01;12.40±1.76vs16.06±3.32,P<0.01;11.16±1.58vs14.46±2.99,P<0.05),小檗碱可促使肝脏表达下降的HNF-4α恢复.结论:小檗碱可改善胰岛素抵抗,其机制可能与促进HNF-4α的表达有关.
- 高志强陆付耳冷三华谢美娟徐丽君王开富邹欣
- 关键词：胰岛素抵抗小檗碱肝细胞核因子高果糖
- 国产HBeAg定量测定试剂的质量评价
- 2013年
- 目的评价新开发的HBeAg时间分辨荧光免疫分析法(TrFIA)定量测定试剂在临床标本检测中的分析性能。方法用考核试剂(广州达瑞公司)和对照试剂(意大利DiaSorin S.p.A公司)检测对1 043例血清标本,并进行符合率、一致性、相关性等指标的统计分析。对差异样本用复核试剂(Roche公司)进行复核。结果 1 043例标本用考核试剂与对照试剂检测结果的阳性符合率为98.8%,阴性符合率为100%,一致性检验Kappa值为0.986(P<0.05),相关系数r=0.920,P<0.01。对7个结果不一致样本进行重复试验及复核试验结果表明,其中2个差异样本重复试验结果仍为阴性,但复核试剂结果为阳性,另5个差异样本的重复试验结果与复核试剂判定结果一致,均为阳性。结论新开发的试剂与临床已在使用的试剂检测相关性良好,但是在对单个样本检测时由于方法学的原因,与化学发光法比较不具有检测速度和成本的优势。
- 李高飞董志宁谢美娟吴英松徐伟文
- 关键词：乙型肝炎病毒E抗原时间分辨荧光免疫分析
- 山楂果叶对脂肪肝大鼠脂质代谢及氧化应激的影响被引量：13
- 2016年
- 目的:探究不同比例的山楂果、叶的抗氧化作用及其对脂肪肝的防治作用。方法:将40只SD大鼠分成正常对照组,模型组,不同比例的山楂果、叶组后,通过高脂饮食建立大鼠脂肪肝模型,于造模的第5周开始进行药物干预,每天一次,连续4周,最后检测大鼠血凊TC、TG、AST、ALT、γ-GT、ALP水平及肝脏病理变化。结果:不同配比的山楂果、叶煎液可不同程度降低血清TC、TG、MDA、γ-GT、ALP,升高血清SOD及GSH-PX的水平,改善大鼠高脂血症、肝药酶谱异常及氧化应激状况。此外,山楂果叶还可改善肝脏脂肪性变及炎性浸润。结论:山楂可以通过改善脂质代谢及氧化应激状况,预防大鼠脂肪肝的发生发展,具体作用机制尚未完全阐明,有待进一步研究。
- 高志强谢美娟陈立波
- 关键词：山楂果脂肪肝
- 小檗碱对高果糖饲养诱导大鼠胰岛素抵抗和肝脏TNF-α表达的影响被引量：10
- 2008年
- 目的研究小檗碱对高果糖饲养诱导胰岛素抵抗大鼠的作用。方法高果糖饲料喂养SD大鼠6wk后,分为3组,模型组,小檗碱组(187.5mg.kg-1.d-1灌服)、二甲双胍组(184mg.kg-1.d-1灌服)作为对照,继续高果糖饮食。实验同时设立正常对照组,普通饮食喂养。4wk后处死大鼠;测定血糖、血清胰岛素、胰岛素抵抗指数及血脂的变化,用RT-PCR方法观察肝脏TNF-αmRNA的表达。结果模型组胰岛素、胰岛素抵抗指数、游离脂肪酸(free fatty acids,FFA)及甘油三酯(triglycerides,TG)水平均明显升高;肝脏TNF-αmRNA的表达与正常对照组比较明显升高。小檗碱降低了胰岛素抵抗大鼠的血糖、血清胰岛素、胰岛素抵抗指数、TG、FFA及TNF-αmRNA的表达。二甲双胍降低了大鼠的血糖、血清胰岛素、胰岛素抵抗指数及TG。结论小檗碱可以改善胰岛素抵抗,其机制可能包括抑制肝脏TNF-αmR-NA的表达与改善脂代谢紊乱。
- 高志强冷三华陆付耳谢美娟徐丽君王开富
- 关键词：胰岛素抵抗小檗碱高果糖TNF-Α
- 山楂果、叶对3T3-L1前脂肪细胞代谢的影响
- 2016年
- 目的试图探讨山楂果、叶对3T3-L1前脂肪细胞代谢的影响,从而初步揭示山楂降脂、抗炎的可能作用机制。方法将3T3-L1前脂肪细胞进行分组培养,山楂果、叶煎液以一定的比例加入培养基,并采用噻唑蓝(MTT)比色法检测OD值,绘制生长曲线,观察不同时间点山楂果、叶对细胞生长的影响。结果山楂果、叶对3T3-L1前脂肪细胞的生长曲线无明显影响,但其可明显减少细胞内的脂肪含量及代谢上清液中肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor,TNF)-α、白介素-6(IL-6)的含量(P<0.05或0.01)。结论山楂果、叶可以影响3T3-L1前脂肪细胞的代谢,减少脂质及炎性因子的产生,对机体具有一定的降脂、抗炎作用。
- 高志强谢美娟陈立波
- 关键词：山楂3T3-L1前脂肪细胞降脂抗炎
- INHA基因的克隆表达以及多克隆抗体的制备被引量：1
- 2009年
- 目的INHA的表达、纯化,以及多克隆抗体的制备。方法利用基因重组技术获得INHA基因以及去信号肽的INHA基因,将其都分别构建到原核表达系统并分离纯化得到相对分子质量为58000的带有组氨酸标签的重组INHA融合蛋白。用分离纯化后的INHA融合蛋白作为抗原免疫,获得抗INHA的多克隆抗体。结果成功地获得INHA基因,并且以包涵体的形式表达于大肠杆菌中,用间接酶联免疫吸附(ELISA)方法,Westernblot检测结果显示,该抗体能特异性地与INHA的抗原以及胎盘组织产生明显免疫亲和反应。结论建立原核高效稳定INHA表达系统,获得具有生物学活性的蛋白,为进一步获得高特异性的抗体奠定基础。
- 李月吴英松杨学习谢美娟李明
- 关键词：克隆表达酶联免疫吸附反应WESTERNBLOT
