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郑华宝
作品数:
17
被引量:12
H指数:1
供职机构:
浙江大学
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发文基金:
中国科学院知识创新工程
国家高技术研究发展计划
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相关领域:
生物学
医药卫生
轻工技术与工程
化学工程
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合作作者
杨晟
中国科学院上海生命科学研究院植...
姜卫红
中国科学院上海生命科学研究院植...
杨蕴刘
中国科学院上海生命科学研究院植...
陈军
中国科学院上海生命科学研究院植...
张伟
中国科学院上海生命科学研究院植...
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作者
16篇
郑华宝
14篇
杨晟
13篇
姜卫红
12篇
杨蕴刘
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陈军
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王筱兰
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张伟
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杨俊杰
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1篇
2005
1篇
2003
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17
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一种提高黄素氧化酶活力的方法
本发明公开了一种提高黄素氧化酶催化效率的方法,构建出用于表达VHb和用于表达VHb和DAO结合在一起的融合蛋白HVDAO的重组大肠杆菌菌株;在固定化DAO催化头孢菌素C氧化的反应体系中加入VHb;实验表明,VHb可以显著...
杨晟
郑华宝
陈军
杨蕴刘
姜卫红
文献传递
一种分泌型毕赤酵母菌株及其构建方法
本发明构建了一种新的分泌型毕赤酵母表达载体用于表达带组氨酸标签的重组D-氨基酸氧化酶。工程菌培养过程中能够分泌重组D-氨基酸氧化酶,与胞内表达D-氨基酸氧化酶的重组菌株相比较,免除了细胞破碎步骤。利用蛋白质工程在DAO基...
杨晟
郑华宝
王筱兰
陈军
杨蕴刘
姜卫红
文献传递
一种新型亲和载体的制备方法
本发明公开了一种金属螯合亲和载体及其制备方法。该金属螯合亲和载体以琼脂粉为基质,交联了螯合剂,并螯合有金属离子。其制备包括分别用酸性缓冲液和碱性缓冲液抽提琼脂粉、用活化剂活化抽提的琼脂粉、与螯合剂交联、与金属离子螯合。本...
杨晟
陈军
苏流利
王筱兰
郑华宝
林欣
程天凡
杨俊杰
王金刚
姜卫红
杨蕴刘
文献传递
一种组成型毕赤酵母菌株及其构建方法
本发明公开了一种表达D-氨基酸氧化酶的组成型毕赤酵母重组菌株,该菌株转化有重组质粒pMMZY03,该重组质粒以三磷酸甘油醛脱氢酶基因为启动子,并含有D-氨基酸氧化酶基因,组氨醇脱氢酶基因和卡那霉素抗性基因。本发明还公开了...
杨晟
郑华宝
陈军
杨蕴刘
姜卫红
文献传递
重组SARS冠状病毒S蛋白的表达和分离纯化
本发明提供了重组SARS冠状病毒S蛋白的表达和分离纯化。SARS病毒S蛋白基因被分段和完整地克隆到不同的细菌表达载体进行了表达。S蛋白基因751-1925bp、2005-3410bp、1-1925bp、32-3659bp...
姜卫红
杨晟
俞浩
谢幼华
汪垣
杨勇
张伟
郑华宝
文献传递
7-氨基头孢烷酸酶法生产的研究
D-氨基酸氧化酶(D-Amino Acid Oxidase,DAAO)和戊二酰基-7-氨基头孢烷酸酰化酶(Glutaryl-7-aminocephalosporanic acid acylase,GLA)是两步酶法制备7...
郑华宝
关键词:
毕赤酵母
固定化酶
组氨酸标签
基因工程菌
一种新型亲和载体的制备方法
本发明公开了一种金属螯合亲和载体及其制备方法。该金属螯合亲和载体以琼脂粉为基质,交联了螯合剂,并螯合有金属离子。其制备包括分别用酸性缓冲液和碱性缓冲液抽提琼脂粉、用活化剂活化抽提的琼脂粉、与螯合剂交联、与金属离子螯合。本...
杨晟
陈军
苏流利
王筱兰
郑华宝
林欣
程天凡
杨俊杰
王金刚
姜卫红
杨蕴刘
文献传递
突变型GL-7-ACA酰化酶及其应用
本发明涉及突变型戊二酰-7-氨基头孢烷酸酰化酶,所述酶的β亚基第50位的氨基酸谷胺酰胺突变成了天冬酰胺和/或所述酶的β亚基第198位的氨基酸赖氨酸突变成了丙氨酸。本发明还涉及所述酶在生产7-氨基头孢烷酸中的应用。
姜卫红
张伟
郑华宝
杨蕴刘
杨晟
文献传递
人小肠三叶因子在毕赤酵母中克隆表达及对肠粘膜修复作用的研究
被引量:1
2007年
为了研究人肠三叶因子(hITF)对肠粘膜的保护作用,利用RT-PCR从肠粘膜中扩增出hITF基因片段,与诱导分泌型毕赤酵母载体pPIC9连接构建了重组质粒pPIC9hITF,重组质粒转化至宿主菌GS115,经过PCR鉴定和转化子发酵筛选,得到一个重组毕赤酵母高产菌株GS115/pPIC9hITF。在5L发酵罐中用基本盐培养基培养重组菌株,添加甲醇诱导表达hITF,离心收集的上清液通过离心交换层析纯化得到hITF。质谱鉴定结果表明纯化的hITF与天然提取产品在N端序列上完全相同。细胞实验和动物实验结果表明重组hITF能够促进细胞迁移,并可以保护肠粘膜免受有害因子的侵袭,保持了较好的生物学活性。
刘伟
郑华宝
钟雪梅
杨晟
许春娣
关键词:
毕赤酵母
粘膜修复
一种用高能有机改良剂改善土壤微生物群落结构的方法
本发明公开了一种用高能有机改良剂改善土壤微生物群落结构的方法,包括如下步骤:(1)依照高能有机改良剂,所述高能有机改良剂由植物油脂、KH<Sub>2</Sub>PO<Sub>4</Sub>、尿素和(NH4)<Sub>2<...
史非凡
高启燕
张梦杰
赵心悦
郑华宝
林辉
周启发
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